【摘要】：目的探討人玻璃體體外培養(yǎng)對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞收縮性的影響。方法低傳代(3-5代)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞分兩組體外培養(yǎng),一組用普通培養(yǎng)液(含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清的DMEM/F12)培養(yǎng),一組用體積分?jǐn)?shù)25%玻璃體培養(yǎng),應(yīng)用I型膠原凝膠收縮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)收縮力的變化,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞骨架蛋白F-actin、α-SMA和vinculin的定位染色,應(yīng)用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)α-SMA和vinculin蛋白的表達(dá)。結(jié)果與普通培養(yǎng)液培養(yǎng)相比,低傳代的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞玻璃體中培養(yǎng)48 h,膠原凝膠面積為(22 127±2072)像素,明顯大于在普通培養(yǎng)液中的凝膠面積(16 084±1154)像素,細(xì)胞收縮能力顯著下降,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.412,P=0.012)。在普通培養(yǎng)液中,Factin、vinculin主要分布于細(xì)胞周邊,vinculin形成的粘連斑粗大;而在玻璃體中培養(yǎng)后,Factin重組,在細(xì)胞的一端形成扁平偽足結(jié)構(gòu),vinculin主要分布于細(xì)胞扁平偽足端和細(xì)胞中央,形成的粘連斑明顯變小。玻璃體培養(yǎng)后α-SMA蛋白表達(dá)顯著下降,與普通培養(yǎng)液相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.845,P=0.047);vinculin蛋白表達(dá)無顯著變化(t=0.198,P=0.852)。結(jié)論玻璃體培養(yǎng)可導(dǎo)致視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞收縮性下降,這一作用可能與α-SMA蛋白表達(dá)下調(diào)及vinculin重新分布有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of human vitreous culture in vitro on the contractility of human retinal pigment epithelial cells (RPE). Methods low passage (3 ~ 5 passages) of human retinal pigment epithelial cells (RPE) were cultured in vitro. The first group was cultured in normal medium (containing 10% fetal bovine serum) and the other group was cultured in 25% vitreous medium. I collagen gel contraction test was used to detect the contractile force, immunofluorescence technique was used to detect the localization staining of cytoskeleton protein, 偽-SMA and vinculin, and the expression of 偽-SMA and vinculin protein was detected by immunoblotting technique. Results compared with the normal culture medium, the collagen gel area of human retinal pigment epithelial cells cultured in low passage medium for 48 hours was (22 127 鹵2072) pixels, which was significantly larger than that in normal medium (16 084 鹵1154) pixels. The contractility of the cells decreased significantly (t = 4.412, P = 0.012), and there was a significant difference between the two groups (t = 4.412, P = 0.012). In the normal culture medium, Factin,vinculin was mainly distributed around the cells, and the adhesion spots formed by vinculin were thick. After cultured in vitreous body, Factin reconstituted to form a flat pseudopod structure at one end of the cell, and vinculin was mainly distributed in the end and center of the cell, and the adhesion spots became smaller obviously. The expression of 偽-SMA protein decreased significantly after vitreous culture (t = 2.845, P = 0.047, P = 0.852, t = 2.845, P = 0.047, t = 0.198, P = 0.852), and there was no significant difference between the two groups (t = 2.845, P = 0.047). Conclusion vitreous culture can decrease the contractility of retinal pigment epithelial cells, which may be related to the down-regulation of 偽-SMA protein expression and the redistribution of vinculin.
【作者單位】： 中山大學(xué)中山眼科中心;中山眼科中心;海南眼科醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助(編號(hào):81170866) 海南省自然科學(xué)基金資助(編號(hào):814367)~~
【分類號(hào)】：R774.1

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 Ke'en Chen;Wenbin Zhang;Jing Chen;Sumei Li;Guoqing Guo;;Rho-associated protein kinase modulates neurite extension by regulating microtubule remodeling and vinculin distribution[J];Neural Regeneration Research;2013年32期

2 陸融;喬偉振;;Vinculin和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白在視網(wǎng)膜前膜細(xì)胞及其遷出傳代細(xì)胞中的表達(dá)[J];眼科新進(jìn)展;2011年12期

3 姚麗芬;冒韻東;王馥新;;黏著斑蛋白vinculin在子宮內(nèi)膜異位癥組織中表達(dá)的初步研究[J];實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志;2011年11期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 馮松福;折疊式人工玻璃體填充聚乙烯醇水凝膠重建自然玻璃體的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 朱明瓊;光損傷中視網(wǎng)膜TNF-α、IL-1β的表達(dá)及烏司他丁的保護(hù)作用[D];南華大學(xué);2013年

2 周薇;維拉帕米抑制兔外傷性增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 段靈;張美霞;;內(nèi)皮抑素對(duì)視網(wǎng)膜新生血管中細(xì)胞骨架蛋白Tubulinβ mRNA表達(dá)的影響[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年06期

2 王正敏;;耳科和耳神經(jīng)科的遺傳學(xué)(中)[耳顯微外科2007版(七)][J];中國(guó)眼耳鼻喉科雜志;2008年06期

3 郎海南;內(nèi)耳感覺上皮的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè);1997年04期

4 尹莉莉;管懷進(jìn);吳堅(jiān);丁潤(rùn)生;張?zhí)煲?楊鈴;;白內(nèi)障患者晶狀體上皮細(xì)胞β1整聯(lián)蛋白和Fas蛋白的表達(dá)[J];眼科研究;2007年10期

5 遲放魯;;重視耳聾基因的臨床應(yīng)用研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年16期

6 季櫻紅;盧奕;李娜;金紅;楊們?cè)?;小鼠晶體蛋白質(zhì)組的雙向電泳和質(zhì)譜鑒定研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2008年02期

7 熊壯;冷非;;先天性白內(nèi)障的分類及致病基因研究進(jìn)展(續(xù))[J];中國(guó)斜視與小兒眼科雜志;2008年03期

8 李華偉;王正敏;沈云珍;;大鼠螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元Peripherin的表達(dá)[J];中國(guó)眼耳鼻喉科雜志;2000年03期

9 王蘋;杜波;杜寶東;;鈣蛋白酶活性及其誘導(dǎo)內(nèi)耳細(xì)胞死亡[J];國(guó)際耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2006年06期

10 王靜波;惠延年;;剪切力對(duì)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞syndecan-1,血管細(xì)胞黏附分子-1,E-選擇素蛋白表達(dá)和肌動(dòng)蛋白的影響[J];國(guó)際眼科雜志;2006年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前5條

1 范德生;孫寧;;放射殘存細(xì)胞CNE-2Z-TR12的生物學(xué)特性及姜黃素對(duì)其侵襲、轉(zhuǎn)移及凋亡的影響機(jī)理[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

2 姜鴻彥;Jochen Schacht;許庚;;Transient energy depletion trigger small GTPase pathways and hair cell death in noise-induced hearing loss[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2007年

3 劉木根;柯鐵;王兆祥;吉斌初;劉靜宇;王擎;;CRYAB和HSF4基因的兩個(gè)新的突變導(dǎo)致兩個(gè)中國(guó)人家系先天性白內(nèi)障[A];第六次全國(guó)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議文摘匯編[C];2005年

4 鄒劍;陳飛;李文;楊慧;王力紅;劉世喜;;Fascin-1表達(dá)對(duì)喉鱗癌細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和侵襲能力的影響[A];2010全國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

5 陳卡;糜漫天;朱俊東;張乾勇;周永;冉莉;謝艷;;�；撬釋�(duì)急性低壓缺氧大鼠視網(wǎng)膜Calpain-2介導(dǎo)的突觸功能相關(guān)骨架蛋白降解的影響[A];膳食變遷對(duì)民眾健康的影響：挑戰(zhàn)與應(yīng)對(duì)——第二屆兩岸四地營(yíng)養(yǎng)改善學(xué)術(shù)會(huì)議學(xué)術(shù)報(bào)告及論文摘要匯編[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 季櫻紅;先天性遺傳性白內(nèi)障的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

2 姚志斌;人正常晶狀體蛋白質(zhì)表達(dá)譜的構(gòu)建和生物信息學(xué)分析[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

3 王欣玲;整合素介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在晶狀體后囊混濁形成中的作用[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

4 李慶忠;遺傳性耳聾致病基因定位克隆與縫隙連接蛋白分子流行病學(xué)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2005年

5 于飛;非綜合征型耳聾患者GJB2基因突變篩查和全頻譜突變圖譜繪制[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前7條

1 付霞;蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子對(duì)視神經(jīng)橫斷傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的細(xì)胞骨架蛋白影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

2 孫國(guó)華;Duffy抗原趨化因子受體（DARC）及細(xì)胞骨架蛋白Fascin在喉癌中表達(dá)及其臨床意義[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

3 楊義;鈣蛋白酶抑制劑E-64d對(duì)高鈣誘導(dǎo)的白內(nèi)障保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2007年

4 翟妍;PTEN基因與喉癌相關(guān)性的研究[D];吉林大學(xué);2009年

5 黃燕;角膜穿通傷后眼內(nèi)炎癥性損傷及視網(wǎng)膜細(xì)胞骨架蛋白降解機(jī)制的研究[D];江蘇大學(xué);2010年

6 謝國(guó)麗;糖皮質(zhì)激素受體介導(dǎo)的激素性白內(nèi)障形成機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

7 杜麗敏;黃體酮對(duì)大鼠視神經(jīng)損傷視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞微管相關(guān)蛋白-1B和降鈣素基因相關(guān)肽的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：2437088