【摘要】： 目的:探討趨化因子受體CXCR4小干擾RNA(siRNA)對人喉癌細(xì)胞株(Hep-2細(xì)胞)在裸鼠體形成的移植瘤淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的影響,以尋找人喉癌基因治療的有效途徑。方法:將與CXCR4 mRNA互補(bǔ)的小干擾RNA(siRNA)通過陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染人喉癌細(xì)胞株Hep-2,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶連反應(yīng)(RT-PCR)檢測轉(zhuǎn)染后Hep細(xì)胞CXCR4 mRNA表達(dá)情況。雄性裸小鼠10只,隨機(jī)分成2組,即Hep-2組和siRNA轉(zhuǎn)染組,建立人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型,建模成功后觀察裸鼠的一般情況,每3d用游標(biāo)卡尺測量皮下腫塊大小,按照公式V=1/2ab2計算腫塊體積(a:腫塊長徑,b:腫塊短徑),繪制裸鼠生長曲線,計算腫瘤抑制率。喂養(yǎng)6wK后處死裸鼠,處死裸鼠后測量移植瘤體積并計數(shù)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況;采用蘇木精-伊紅染色病理證實移植瘤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,免疫組織化學(xué)SP法檢測各組皮下移植瘤CXCR4蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型建立成功后,siRNA轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤的體積增長明顯滯后于Hep-2組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。免疫組織化學(xué)顯示isRNA轉(zhuǎn)染組CXCR4蛋白表達(dá)明細(xì)減少。結(jié)論:siRNA能在體內(nèi)明細(xì)抑制喉癌CXCR4基因的表達(dá),進(jìn)而抑制喉癌實體瘤增殖和生長。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of chemokine receptor CXCR4 small interfering RNA (siRNA) on the micrometastasis of human laryngeal carcinoma cell line (Hep-2) in nude mice and to find an effective approach to gene therapy of human laryngeal carcinoma. Methods: the expression of CXCR4 mRNA in human laryngeal carcinoma cell line Hep-2, was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) after transfection of small interfering RNA (siRNA) complementary to CXCR4 mRNA by cationic liposome. Ten male nude mice were randomly divided into two groups: Hep-2 group and siRNA transfection group. The subcutaneous transplanted tumor model of human laryngeal carcinoma was established in nude mice. The general condition of nude mice was observed after modeling successfully. The size of subcutaneous tumor was measured by Vernier caliper every 3 days. The tumor volume (a: tumor long diameter, b: mass short diameter) was calculated according to the formula V=1/2ab2, the growth curve of nude mice was drawn, and the tumor inhibition rate was calculated. After feeding with 6wK, nude mice were killed, the volume of transplanted tumor was measured and lymph node metastasis was counted. Hematoxylin-eosin staining was used to confirm the metastasis of transplanted tumor and lymph node. The expression of CXCR4 protein in subcutaneous transplanted tumor was detected by immunohistochemical SP method. Results: after the establishment of subcutaneous transplanted tumor model of human laryngeal carcinoma in nude mice, the volume growth of subcutaneous transplanted tumor in siRNA transfection group was significantly slower than that in Hep-2 group (P0.05). Immunohistochemistry showed that the expression of CXCR4 protein decreased in isRNA transfection group. Conclusion: siRNA can inhibit the expression of CXCR4 gene in laryngeal carcinoma and then inhibit the proliferation and growth of laryngeal carcinoma solid tumor.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R739.65

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本文編號：2382266