JNK細(xì)胞通路在高壓氧和過氧化氫誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡中的作用
本文選題:高壓氧 + 過氧化氫 ; 參考:《眼科新進(jìn)展》2014年10期
【摘要】:目的研究JNK細(xì)胞信號通路在高壓氧(hyperbaric oxygen,HBO)和過氧化氫(hydrogen peroxide,H2O2)影響晶狀體上皮細(xì)胞活力和凋亡中的作用。方法培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞系SRA01/04,實驗分為對照組、SP600125組(20μmol·L-1)、HBO組(體積分?jǐn)?shù)95%O2+體積分?jǐn)?shù)5%CO2,600 Pa)、HBO+SP600125組、H2O2組(200μmol·L-1)和H2O2+SP600125組,處理6 h后收集細(xì)胞,應(yīng)用MTT法檢測各組細(xì)胞活力,Annexin V-FITC凋亡試劑盒處理細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞的凋亡率,通過Western-blot法檢測各組細(xì)胞JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9的表達(dá)情況。結(jié)果作用6 h后,HBO和H2O2處理的晶狀體上皮細(xì)胞A570分別為0.423±0.047和0.406±0.069,較對照組的0.824±0.065明顯下降(P0.05),細(xì)胞凋亡率為(19.773±1.147)%和(29.206±1.678)%,較對照組的(2.184±1.015)%明顯上升(P0.05),SP600125可部分抑制HBO和H2O2對晶狀體上皮細(xì)胞活力和凋亡的影響,HBO和H2O2處理的晶狀體上皮細(xì)胞p-JNK、p-c-Jun蛋白表達(dá)量及caspase 3、caspase 9蛋白表達(dá)量升高,Sp600125可部分抑制高壓氧和H2O2誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞p-JNK、p-c-Jun、caspase 3、caspase 9蛋白高表達(dá)。結(jié)論 HBO和H2O2可激活晶狀體上皮細(xì)胞中JNK細(xì)胞信號通路,促使細(xì)胞凋亡,提示JNK細(xì)胞信號通路在HBO和H2O2誘導(dǎo)晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of hyperbaric oxygenation (HBO) and hydrogen peroxide (H 2O 2) on the viability and apoptosis of lens epithelial cells (LECs). Methods Human lens epithelial cell line SRA01 / 04 was cultured and divided into two groups: control group SP600125 (20 渭 mol L-1) and HBO group (95 渭 mol L-1). HBO SP600125 group was treated with H 2O 2 (200 渭 mol L -1) and H 2O 2 SP600125 group. The cells were collected after 6 h treatment. The apoptosis rate of each group was detected by flow cytometry after treated with Annexin V-FITC apoptosis kit, and the expression of JNK-p-JNKp-Junp-c-Juncaspase 3caspase 9 was detected by Western-blot. Results the A570 of lens epithelial cells treated with HBO and H 2O 2 were 0.423 鹵0.047 and 0.406 鹵0.069, respectively, which were significantly lower than those of the control group (0.824 鹵0.065) (P0.05). The apoptosis rate was (19.773 鹵1.147)% and (29.206 鹵1.678). Compared with the control group (2.184 鹵1.015)%, SP600125 could partly inhibit the inhibition of HBO and H _ 2O _ 2 on lens formation. The effects of HBO and H2O2 on the expression of p-JNK-c-Jun protein and caspase _ 3 caspase 9 protein expression in lens epithelial cells induced by hyperbaric oxygen and H _ 2O _ 2, the overexpression of p-JNKp-c-Juncaspase 3 caspase 9 protein in lens epithelial cells induced by hyperbaric oxygen and H _ 2O _ 2 was partly inhibited by the increase of the expression of p-JNKp-c-Juncaspase 3 caspase 9 protein in cultured lens epithelial cells induced by hyperbaric oxygen and H _ 2O _ 2. Conclusion HBO and H2O2 can activate the signal pathway of JNK cells in lens epithelial cells and promote the apoptosis of lens epithelial cells, suggesting that the signal pathway of JNK cells plays an important role in the development of apoptosis of lens epithelial cells induced by HBO and H2O2.
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院眼科;北京大學(xué)人民醫(yī)院眼科視覺損傷與修復(fù)教育部重點實驗室;
【分類號】:R776.1
【共引文獻(xiàn)】
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本文編號:2091541
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