發(fā)布時間：2018-04-30 14:06

  本文選題：精氨酸酯酶 + 鼻咽癌細胞系�。� 參考：《廣西醫(yī)科大學》2011年碩士論文

【摘要】：目的：研究蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin對鼻咽癌細胞系(CNE-2)的多藥耐藥相關蛋白1(MRP1),環(huán)氧合酶-2(COX-2)和表皮鈣粘素(E-CD)表達的影響,探討Agkihpin抑制人鼻咽癌CNE-2細胞的機制。方法：體外培養(yǎng)鼻咽癌細胞系CNE-2,用不同濃度的蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin處理鼻咽癌細胞系72 h后,收集細胞,采用RT-PCR法、免疫細胞化學和蛋白印跡(Western blotting)檢測MRP1、COX-2和E-CD的mRNA和蛋白表達水平在CNE-2細胞中的變化,分析Agkihpin抑制人鼻咽癌CNE-2細胞的機制。結果：1.不同濃度Agkihpin作用CNE-2細胞72 h后MRP1 mRNA和蛋白表達均降低,并呈現(xiàn)出一定的濃度依賴效應,Agkihpin濃度越高,MRP1表達下調越顯著。RT-PCR結果顯示,Agkihpin加藥組中,4.13、0.516和0.207 μg/ml濃度作用的CNE-2細胞中MRP1 mRNA與對照組比較均有明顯下調(P0.01)。Agkihpin加藥組中,4.13、0.516和0.207 μg/ml濃度作用的CNE-2細胞中MRP1蛋白表達量均有下調(P0.01)：免疫細胞化學顯示,MRP1蛋白表達分別下降了60.53%、45.21%和26.95%；Western blotting檢測MRP1蛋白表達結果與免疫細胞化學檢測結果類似,均呈下降趨勢。2.不同濃度Agkihpin作用CNE-2細胞72 h后COX-2 mRNA口蛋白表達均降低,并呈現(xiàn)出一定的濃度依賴效應,Agkihpin濃度越高,COX-2表達下調越顯著。RT-PCR結果顯示,各加藥組的CNE-2細胞中COX-2 mRNA與對照組比較均有明顯下調(P0.01)。不同濃度Agkihpin作用的CNE-2細胞中COX-2蛋白表達量均有下調(P0.01)：免疫細胞化學顯示,COX-2蛋白表達分別下降了52.17%、32.82%和26.74%；Western blotting檢測COX-2蛋白表達結果與免疫細胞化學檢測結果類似,均呈下降趨勢。3.不同濃度Agkihpin作用CNE-2細胞72 h后E-CD mRNA和蛋白表達均降低,并呈現(xiàn)出一定的濃度依賴效應,Agkihpin濃度越高,E-CD表達下調越顯著。RT-PCR結果顯示,Agkihpin加藥組中,4.13、0.516和0.207 μg/ml濃度作用的CNE-2細胞中E-CD mRNA與對照組比較均有明顯下調(P0.05)。Agkihpin各加藥組中CNE-2細胞中E-CD蛋白表達量均有下調(P0.01)：免疫細胞化學顯示,E-CD蛋白表達分別下降了36.66%、31.28%和14.21%。Western blotting檢測E-CD蛋白表達結果與免疫細胞化學檢測結果類似,均呈下降趨勢。結論：1.在鼻咽癌CNE-2細胞系中,Agkihpin能抑制MRP1的表達,并且隨濃度的增大有明顯的抑制作用,這可能是Agkihpin能降低鼻咽癌細胞活力的原因之一；Agkihpin抑制MRP1的表達提示,在一定程度上Agkihpin可通過抑制MRP1表達來減少細胞內藥物的排出而提高腫瘤細胞對藥物的敏感性。2.在鼻咽癌CNE-2細胞系中,Agkihpin能抑制COX-2的表達,并且隨濃度的增大有明顯的抑制作用；Agkihpin對COX-2的抑制作用,可能成為鼻咽癌化療的有效藥物。3.在鼻咽癌CNE-2細胞系中,Agkihpin能抑制E-CD的表達,并且隨濃度的增大有明顯的抑制作用。4. Agkihpin可能通過下調MRP1來抑制鼻咽癌細胞系CNE-2的活力,而通過下調COX-2和E-CD來抑制CNE-2的遷移和增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of arginine esterase (Agkihpin) from snake venom on the expression of multidrug resistance-associated protein (MRP1), cyclooxygenase-2 (COX-2) and epidermal cadherin (E-CDE) in human nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE-2, and to explore the mechanism of inhibition of Agkihpin on human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cells. Methods: nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2 was cultured in vitro. The nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2 was treated with different concentrations of arginine esterase Agkihpin for 72 h. The cells were collected by RT-PCR assay. The changes of mRNA and protein expression of COX-2 and E-CD in CNE-2 cells were detected by immunocytochemistry and Western blotting. The mechanism of Agkihpin inhibition on CNE-2 cells of human nasopharyngeal carcinoma was analyzed. The result is 1: 1. The expression of MRP1 mRNA and protein decreased in CNE-2 cells treated with different concentrations of Agkihpin for 72 h. The lower the concentration of Agkihpin, the more down-regulated the expression of MRP1. RT-PCR results showed that the MRP1 mRNA in the CNE-2 cells treated with 4. 13 渭 g/ml and 0.207 渭 g/ml was significantly down-regulated than that in the control group. 4. 130.516 and 4. 130.516 in the agkihpin group and 0.207 渭 g/ml in the control group, respectively. The expression of MRP1 protein was down-regulated in CNE-2 cells treated with 0.207 渭 g/ml. The results of immunocytochemistry showed that the expression of MRP1 P1 protein decreased by 60.5345.21% and 26.95% respectively, and the results were similar to those detected by immunocytochemistry. All showed a downward trend. The expression of COX-2 mRNA protein in CNE-2 cells decreased after 72 h treatment with different concentrations of Agkihpin. The higher the concentration of Agkihpin was, the lower the expression of COX-2 was. Compared with the control group, COX-2 mRNA in CNE-2 cells of each drug group was significantly down-regulated. The expression of COX-2 protein was down-regulated in CNE-2 cells treated with different concentrations of Agkihpin. The results of immunocytochemistry showed that the expression of COX-2 protein decreased by 52.1732.82% and 26.74%, respectively, and the expression of COX-2 protein was similar to that of immunocytochemistry. The expression of E-CD mRNA and protein decreased in CNE-2 cells treated with different concentrations of Agkihpin for 72 h. The lower the concentration of Agkihpin was, the more down-regulated the E-CD expression was. RT-PCR results showed that the E-CD mRNA in CNE-2 cells treated with 4. 13 渭 g/ml and 0.207 渭 g/ml was significantly down-regulated compared with the control group. The expression of E-CD protein decreased by 36.66% and 31.28%, respectively, and the expression of E-CD protein by 14.21%.Western blotting was similar to that by immunocytochemistry. All showed a downward trend. Conclusion 1. Agkihpin can inhibit the expression of MRP1 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cell line, and has obvious inhibitory effect with the increase of concentration. This may be one of the reasons why Agkihpin can reduce the viability of NPC cell line. It is suggested that Agkihpin inhibits the expression of MRP1. To a certain extent, Agkihpin can increase the sensitivity of tumor cells to drugs by inhibiting the expression of MRP1 to reduce the excretion of drugs in the cells. Agkihpin can inhibit the expression of COX-2 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cell line, and has obvious inhibitory effect on COX-2 with the increase of concentration. It may be an effective drug for nasopharyngeal carcinoma chemotherapy. Agkihpin can inhibit the expression of E-CD in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cell line. Agkihpin may inhibit the activity of CNE-2 by down-regulation of MRP1, and inhibit the migration and proliferation of CNE-2 by down-regulating COX-2 and E-CD.
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R739.63

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李智,林素暇,梁英杰;巨噬細胞移動抑制因子提高鼻咽癌細胞體外侵襲能力[J];中華病理學雜志;2004年01期

2 張蕾,王曉華,馬秀蘭,何安光;EB病毒基因BARF1在鼻咽癌細胞中的表達及意義[J];中國癌癥雜志;2004年01期

3 王安宇;鼻咽癌細胞生物節(jié)律基礎研究和臨床時辰治療現(xiàn)狀[J];廣西醫(yī)學;2005年06期

4 吳敬波;崔艷慧;張建文;范娟;文慶蓮;;心肌細胞培養(yǎng)液對鼻咽癌細胞生長的體外抑制作用實驗研究[J];四川腫瘤防治;2006年02期

5 姚輝璐;朱淼;王桂文;彭立新;何碧娟;何敏;黎永青;;單個鼻咽癌細胞的拉曼光譜分析的研究[J];光譜學與光譜分析;2007年09期

6 杜玲艷;黃丹;詹旭;;鼻咽癌細胞后向偏振散射光譜研究[J];四川理工學院學報(自然科學版);2009年03期

7 蘇欣;李仕晟;康競;謝yN;江靜;;靶向阻斷表皮生長因子受體信號通路影響鼻咽癌細胞生長的研究[J];實用醫(yī)學雜志;2009年18期

8 易翔;唐安洲;覃穎;溫文勝;謝瑩;;一氧化氮對鼻咽癌細胞生長及血管內皮生長因子的調節(jié)作用[J];中國癌癥防治雜志;2009年03期

9 陳蔚;崔英;岳惠芬;梁新強;;新城疫病毒抑制鼻咽癌細胞的體外實驗研究[J];中華腫瘤防治雜志;2010年01期

10 何曉松;易世江;凌月福;;表沒食子兒茶素沒食子酸酯通過下調誘導型一氧化氮合酶促進鼻咽癌細胞的凋亡[J];廣東醫(yī)學;2010年14期

相關會議論文 前10條

1 陳陽;李永增;陳榮;;鼻咽癌細胞的拉曼光譜[A];中國遺傳學會第十屆全國激光生物學學術會議論文摘要集[C];2009年

2 焦偉;莫祥蘭;;腫瘤壞死因子聯(lián)合白介素2抗鼻咽癌細胞實驗研究[A];2000全國腫瘤學術大會論文集[C];2000年

3 姚輝璐;王桂文;何敏;蔣玉艷;黎永青;;單細胞拉曼光譜分析鼻咽癌細胞的研究[A];第六屆全國光生物學學術研討會論文集[C];2004年

4 李步洪;林慧韞;謝樹森;;鼻咽癌細胞的熒光光譜特性[A];大珩先生九十華誕文集暨中國光學學會2004年學術大會論文集[C];2004年

5 姚輝璐;王桂文;彭立新;黎永青;;單個鼻咽癌細胞的拉曼光譜分析的研究[A];中國光學學會2006年學術大會論文摘要集[C];2006年

6 王瓊;伍鋼;;血管緊張素Ⅱ及其受體阻滯劑與放療聯(lián)合對鼻咽癌細胞的作用及其機制的研究[A];2007第六屆全國放射腫瘤學學術年會論文集[C];2007年

7 高健赫;蔡紅星;張喜和;;鼻咽癌細胞分泌物的拉曼光譜研究[A];第十六屆全國光散射學術會議論文摘要集[C];2011年

8 冼勵堅;孫健;曹棄元;葉燕麗;;鼻咽癌細胞DNA合成的時間節(jié)律研究[A];2000全國腫瘤學術大會論文集[C];2000年

9 吳敬波;崔艷慧;張建文;范娟;文慶蓮;;心肌細胞培養(yǎng)液對鼻咽癌細胞生長抑制作用體外實驗研究[A];第九屆全國腫瘤生物治療學術會議論文集[C];2006年

10 張配;趙素容;宋樂樂;浦龍健;蔣志文;劉浩;蔣琛琛;;低分子量肝素聯(lián)合紫杉醇對鼻咽癌細胞侵襲和遷移能力的影響[A];促進科技經(jīng)濟結合，，服務創(chuàng)新驅動發(fā)展——蚌埠市科協(xié)2012年度學術年會論文集[C];2012年

相關博士學位論文 前10條

1 裴娜娜;Ang-(1-7)過表達對鼻咽癌細胞體內外生長的影響[D];南方醫(yī)科大學;2015年

2 李文雯;Snail介導的上皮—間質轉化在鼻咽癌放射抵抗中的作用[D];華中科技大學;2015年

3 趙孟陽;miR-3188參與FOXO1調節(jié)mTOR-pPI3K/AKT-c-JUN正反饋通路抑制鼻咽癌細胞的增殖[D];南方醫(yī)科大學;2016年

4 李國萍;不同侵襲遷移能力鼻咽癌細胞蛋白組學及轉移相關基因功能研究[D];昆明醫(yī)科大學;2012年

5 苗北平;辣根過氧化物酶/吲哚三醋酸酶前藥對鼻咽癌細胞的殺傷作用[D];山東大學;2008年

6 徐娟;EB病毒LMP1通過轉錄因子EGFR調節(jié)酪氨酰蛋白硫酸轉移酶TPST-1介導趨化因子受體CXCR4活性的分子機制[D];中南大學;2010年

7 吳平;ARC基因在鼻咽癌中的表達及與鼻咽癌細胞放化療敏感性的研究[D];中南大學;2012年

8 張荔茗;鼻咽癌細胞中“c-Myc/miRNA/靶基因”交互作用分子網(wǎng)絡的初步構建及功能研究[D];中南大學;2009年

9 謝李;HSP70調控雷帕霉素對鼻咽癌細胞生長抑制作用分子機制研究[D];中南大學;2010年

10 王瓊;放射線對小鼠組織線粒體基因和鼻咽癌細胞生物學行為影響的初步研究[D];華中科技大學;2010年

相關碩士學位論文 前10條

1 劉燁松;MiR-145調控c-Myc基因表達影響鼻咽癌細胞的增殖[D];蘇州大學;2016年

2 撖子建;Eb病毒感染與鼻咽癌細胞鈣結合蛋白S100A8、S100A9上調的相關性研究[D];廣西醫(yī)科大學;2016年

3 許淑茹;蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin抑制鼻咽癌細胞機制的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2011年

4 劉雙;X射線對CD133-鼻咽癌細胞干性能力影響的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2016年

5 李紅霞;沉默DEPDC1抑制鼻咽癌細胞HNE-1和CNE-1侵襲遷移[D];重慶醫(yī)科大學;2016年

6 陳偉煒;鼻咽癌細胞表面增強拉曼光譜研究[D];福建師范大學;2009年

7 陳蔚;新城疫病毒抑制鼻咽癌細胞的體外實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學;2008年

8 藍英;細胞色素b5還原酶2對鼻咽癌細胞抑制作用的機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2015年

9 朱慶堯;蛋白酶活化受體1在鼻咽癌細胞中的表達及其意義[D];華中科技大學;2010年

10 黃詩婷;鼻咽癌細胞放射抗拒的差異蛋白質組學分析[D];廣西醫(yī)科大學;2011年

本文編號：1824853