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人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞血紅素加氧酶1表達(dá)及其對卡鉑作用的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-04-19 20:37

  本文選題:喉鱗癌 + 血紅素加氧酶 ; 參考:《山東醫(yī)藥》2015年36期


【摘要】:目的探討人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞血紅素加氧酶1(HO-1)表達(dá)對卡鉑作用的影響及其可能的作用機(jī)制。方法將對數(shù)生長期Hep-2細(xì)胞分為六組?瞻讓φ战M不干預(yù),Zn PP(HO-1抑制劑鋅原卟啉)組加入Zn PP 10μmol/L;Hemin(HO-1誘導(dǎo)劑氯化血紅素)組加入Hemin 10μmol/L;卡鉑組加入卡鉑10μg/m L;Hemin聯(lián)合卡鉑組先加入Hemin 10μmol/L,作用1 h后再加入卡鉑10μg/m L;Zn PP聯(lián)合卡鉑組先加入Zn PP 10μmol/L,作用1 h后再加入卡鉑10μg/m L。每組設(shè)5個(gè)復(fù)孔,加藥后培養(yǎng)24 h。采用MTT法觀察各組細(xì)胞存活率;RT-PCR、Western blotting法檢測各組細(xì)胞內(nèi)HO-1 mRNA和蛋白表達(dá)情況;DCFH-DA探針檢測各組細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS);流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡率。結(jié)果 1細(xì)胞存活率:與空白對照組比較,卡鉑組和Zn PP組明顯降低,Hemin組明顯升高(P均0.05);與卡鉑組比較,Zn PP聯(lián)合卡鉑組明顯降低,Hemin聯(lián)合卡鉑組明顯升高(P均0.05)。2細(xì)胞HO-1 mRNA和蛋白相對表達(dá)量:與空白對照組比較,卡鉑組和Hemin組明顯升高,Zn PP組明顯下降(P均0.05);與卡鉑組比較,Zn PP聯(lián)合卡鉑組明顯降低,Hemin聯(lián)合卡鉑組明顯升高(P均0.05)。3細(xì)胞凋亡率:與空白對照組比較,卡鉑組、Zn PP組明顯升高(P均0.05);與卡鉑組比較,Zn PP聯(lián)合卡鉑組明顯升高,Hemin聯(lián)合卡鉑組明顯降低(P均0.05);4細(xì)胞內(nèi)ROS活性:與空白對照組比較,卡鉑組、Zn PP組顯著增高(P均0.05);與卡鉑組比較,Zn PP聯(lián)合卡鉑組明顯升高,Hemin聯(lián)合卡鉑組明顯降低(P均0.05)。結(jié)論 HO-1在Hep-2細(xì)胞內(nèi)的高表達(dá)可影響卡鉑對Hep-2細(xì)胞的促凋亡作用,應(yīng)用Zn PP后HO-1表達(dá)下調(diào),同時(shí)提高了人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞在卡鉑作用下的凋亡率,這一過程可能與增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)ROS水平相關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of heme oxygenase 1 (HO-1) expression on carboplatin in human laryngeal squamous cell carcinoma (Hep-2) cells and its possible mechanism. Methods Hep-2 cells in logarithmic phase were divided into six groups. The blank control group did not interfere with Zn PP(HO-1 inhibitor zinc protoporphyrin) group added Hemin 10 渭 mol / L (ZnPP 10 渭 mol / L HeminHO-1 inducer) group, carboplatin group added 10 渭 g / mL Hemin 10 渭 g / L Hemin combined with carboplatin group, then added 10 渭 g / m Zn PP of carboplatin for 1 h. In combination with carboplatin group, Zn PP 10 渭 mol / L was added first, then 10 渭 g / mL of carboplatin was added for 1 h. Each group was treated with 5 multiple holes and cultured for 24 hours. The expression of HO-1 mRNA and protein in the cells of each group was detected by MTT assay and flow cytometry was used to detect the apoptosis rate of each group. Results 1Cell survival rate: compared with the blank control group, Compared with the control group, the relative expression of HO-1 mRNA and protein was significantly decreased in the zinc-PP combined with carboplatin group, and the relative expression of HO-1 mRNA and protein was significantly decreased in the zinc-PP combined with carboplatin group as compared with that in the control group, and the relative expression of HO-1 mRNA and protein in both groups were significantly lower than those in the control group, and compared with the control group, the relative expression of HO-1 mRNA and protein in both groups were significantly decreased. Compared with the carboplatin group, the Zn PP combined with carboplatin group significantly decreased the apoptotic rate of P0. 05%, and compared with the control group, compared with the control group, the apoptotic rate of P0. 05% was significantly decreased in the Zn-PP combined with carboplatin group, and compared with the control group, and compared with the control group, the apoptosis rate was significantly decreased in the DDP group and the Hemin group. Compared with carboplatin group, Zn-PP combined with carboplatin group significantly increased the ROS activity of P0. 05%, compared with the control group, the activity of ROS was significantly decreased in the Zn-PP combined with carboplatin group, and compared with that in the blank control group, and compared with the control group, the activity of ROS was significantly decreased in the Zn-PP + carboplatin group compared with that in the control group. Compared with carboplatin group, Zn-PP + carboplatin group increased significantly (P < 0.05) and Hemin combined with carboplatin group (P < 0.05). Conclusion the high expression of HO-1 in Hep-2 cells can affect the apoptotic effect of carboplatin on Hep-2 cells. The expression of HO-1 is down-regulated and the apoptotic rate of human laryngeal squamous cell carcinoma Hep-2 cells is increased after the application of ZnPP. This process may be related to the enhancement of intracellular ROS levels.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院;河北醫(yī)科大學(xué);
【基金】:河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(H2013206264)
【分類號】:R739.65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1774628

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