發(fā)布時間：2018-04-17 04:24

  本文選題：鼻咽癌 + 伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆轉(zhuǎn)誘導(dǎo)蛋白(RECK)　； 參考：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2014年06期

【摘要】：目的探討姜黃素對鼻咽癌細(xì)胞RECK基因表達(dá)及甲基化的影響,并探討可能的機制。方法體外培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞系CNE-1,用1、10和30μmol/L姜黃素處理后,用Western blot和實時定量PCR分別檢測RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)的蛋白和mRNA表達(dá);高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜檢測RECK甲基化,同時用MTT檢測CNE-1細(xì)胞增殖,EMSA法檢測核轉(zhuǎn)錄因子Sp1的DNA結(jié)合活性。結(jié)果 CNE-1細(xì)胞未刺激時RECK表達(dá)水平較低,而經(jīng)1~30μmol/L姜黃素處理后,能顯著增強RECK蛋白和mRNA的表達(dá)(P0.05)。30μmol/L姜黃素處理CNE-1細(xì)胞后,RECK啟動子甲基化水平降低至31%(P0.05),全基因組甲基化水平降低39%(P0.05),細(xì)胞系的甲基化活性減少了72%(P0.05)。同時,姜黃素能顯著降低CNE-1細(xì)胞中DNMT1的蛋白和mRNA表達(dá)(P0.05),也能減低CNE-1細(xì)胞的存活率(P0.05)。EMSA結(jié)果顯示,姜黃素處理后,CNE-1細(xì)胞中Sp1的DNA活性顯著降低。結(jié)論姜黃素可能通過上調(diào)RECK基因表達(dá),降低細(xì)胞內(nèi)甲基化水平,從而抑制CNE-1細(xì)胞生長。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of curcumin on RECK gene expression and methylation in nasopharyngeal carcinoma cells.Methods Nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 was cultured in vitro. Western blot and real-time quantitative PCR were used to detect the protein and mRNA expression of RECK gene and DNA methylase 1 DNMT1, and RECK methylation was detected by high performance liquid chromatography-electrospray mass spectrometry (HPLC-ESI-MS).At the same time, MTT was used to detect the DNA binding activity of nuclear transcription factor Sp1 by CNE-1 cell proliferation and EMSA assay.Results the level of RECK expression in CNE-1 cells was lower than that in unstimulated cells, but was treated with curcumin for 30 渭 mol/L.After treated with curcumin of RECK protein and mRNA, the methylation level of Reck promoter in CNE-1 cells was reduced to 31 ~ 1 ~ 0. 05%, the whole genome methylation level was reduced to 39 ~ (0.05) and the methylation activity of cell line was decreased by 72 ~ 0. 05%.At the same time, curcumin significantly decreased the expression of DNMT1 protein and mRNA in CNE-1 cells, and also decreased the survival rate of CNE-1 cells. EMSA results showed that the DNA activity of Sp1 in CNE-1 cells was significantly decreased after curcumin treatment.Conclusion curcumin may inhibit the growth of CNE-1 cells by up-regulating the expression of RECK gene and decreasing the intracellular methylation level.
【作者單位】： 南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院腫瘤研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81372894)
【分類號】：R739.63

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1762060