本文選題：眼眶 + 淚腺腫瘤　； 參考：《天津醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的 1.本實(shí)驗(yàn)在人類腺樣囊腺癌組織學(xué)標(biāo)本中尋找并確認(rèn)血管生成擬態(tài)結(jié)構(gòu),明確其與病理學(xué)分型的關(guān)系及其表達(dá)的意義。 2.觀察被腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記相關(guān)蛋白CD44v6,CD133,ABCG2標(biāo)記的標(biāo)本在人類腺樣囊腺癌組織學(xué)標(biāo)本中的表達(dá),分析比較血管生成擬態(tài)與其之間的相關(guān)性,為該腫瘤易于局部復(fù)發(fā)提供新的解釋。 3.從細(xì)胞水平再次進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,明確血管生成擬態(tài)結(jié)構(gòu)在人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系SACC-83中存在,并觀察腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記相關(guān)CD44v6,CD133,ABCG2在人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系SACC-83中的表達(dá)。為進(jìn)一步腫瘤干細(xì)胞的提取及分析VM生成的機(jī)制打下基礎(chǔ)。 方法 1.本實(shí)驗(yàn)收集天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院1999年1月-2009年3月間手術(shù)切除的符合實(shí)驗(yàn)條件的淚腺腺樣囊腺癌組織標(biāo)本33例。將所有標(biāo)本統(tǒng)一進(jìn)行重新切片經(jīng)HE染色后觀察確認(rèn)病理診斷及分型。通過CD31/PAS雙重染色后在光學(xué)顯微鏡下對(duì)比觀察切片,在人淚腺腺樣囊腺癌組織標(biāo)本中尋找并確認(rèn)VM結(jié)構(gòu)。同時(shí)應(yīng)用二步法免疫組織化學(xué)檢測(cè)33例標(biāo)本中CD44v6、CD133和ABCG2的表達(dá)情況。 2.根據(jù)VM結(jié)構(gòu)在淚腺腺樣囊腺癌中的觀察情況,應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較其在不同病理分型中的表達(dá)以及在VM表達(dá)組與非表達(dá)組腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記相關(guān)蛋白CD44v6, CD133, ABCG2的表達(dá)有無差異。 3.通過人涎腺腺樣囊性癌SACC-83細(xì)胞系由北京醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院李盛霖中心實(shí)驗(yàn)室饋贈(zèng))二維培養(yǎng)及三維培養(yǎng),觀察血管生成擬態(tài)及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記相關(guān)蛋白CD44v6, CD133, ABCG2在細(xì)胞系SACC-83中的表達(dá)。 結(jié)果 1.33例標(biāo)本經(jīng)觀察HE染色切片,并結(jié)合免疫組織化學(xué)結(jié)果確診為淚腺腺樣囊腺癌,其中實(shí)體型13例(39.39%),腺樣-管狀型20例(60.61%)。通過CD31/PAS雙重染色方法觀察,在10例標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)了VM結(jié)構(gòu),出現(xiàn)率為30.3%。,實(shí)體型6例(46.2%),腺樣-管狀型4例(20.0%),二者差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.346)。 2.所觀察到的VM均由腺樣囊腺癌細(xì)胞圍繞形成管狀、裂隙狀結(jié)構(gòu),該腔隙結(jié)構(gòu)內(nèi)可見紅細(xì)胞,這些紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,且周圍沒有出血灶存在。此外還觀察到部分瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)分泌大量PAS陽性物質(zhì)及CD31陽性物質(zhì)。在VM表達(dá)組與非表達(dá)組CD44v6的表達(dá)分別為1.57%與2.51%,二者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.023)。 3.33例標(biāo)本應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法觀察腫瘤干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志蛋白CD44v6,CD133, ABCG2的表達(dá)情況分別為：CD44v6陽性表達(dá)率為54.5%(18/33)。實(shí)體型陽性率76.9%(10/13),腺樣-管狀型陽性率為40.0%(8/20),二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.037)。CD133陽性表達(dá)率為57.6%(19/33),在實(shí)體型和腺樣-管狀型中分別為76.92%(10/13)、45%(9/20),差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.070)；表達(dá)產(chǎn)物定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿,呈淡黃色至棕褐色,部分病例同時(shí)表達(dá)于胞漿和胞核。ABCG2陽性表達(dá)率為21.2%(7/33),在實(shí)體型和腺樣-管狀型中分別為30.8%(4/13)、15.0%(3/20),差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.297);ABCG2陽性表達(dá)細(xì)胞具有沿血管分布的傾向。 4.在涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系SACC-83的二維培養(yǎng)中,可見細(xì)胞呈環(huán)狀,網(wǎng)狀生長(zhǎng),三維培養(yǎng)中呈腔狀、管狀生長(zhǎng)。在三維培養(yǎng)中可見VM陽性表達(dá)。腫瘤干細(xì)胞相關(guān)蛋白在人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系SACC-83中,可見CD44v6表達(dá)率為42.47±7.37%,CD133表達(dá)率為56.56±10.27%,ABCG2表達(dá)率為2.94±1.23%。 結(jié)論 1.人淚腺腺樣囊性癌及人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系SACC-83中均有VM結(jié)構(gòu)表達(dá) 2.人淚腺腺樣囊性癌的病理分型對(duì)VM的表達(dá)并無直接影響,而CD44v6則與其分型有關(guān)； 3.人淚腺腺樣囊性癌中VM與CD44v6的表達(dá)有關(guān),提示不僅VM與人淚腺腺樣囊性癌的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有關(guān),而且CD44v6可能影響VM的生成。 4.人淚腺腺樣囊性癌及人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系SACC-83中可不同程度的表達(dá)腫瘤干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志蛋白CD44v6、CD133、ABCG2,提示人淚腺腺樣囊性癌中可能存在腫瘤干細(xì)胞；
[Abstract]:objective
1., we searched and confirmed the vasculogenic mimicry structure in human adenoid cystadenocarcinoma specimens, and identified its relationship with pathological typing and its significance.
2., we observed the expression of tumor stem cell marker associated protein CD44v6, CD133 and ABCG2 markers in histologic specimens of human adenoid cystadenocarcinoma, analyzed and compared the correlation between vasculogenic mimicry and their correlation, which provided new explanations for the local recurrence of the adenocarcinoma.
3. from the cellular level again were observed, clear angiogenesis exists in structural mimicry of human salivary adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83, and to observe the tumor stem cell markers CD44v6, CD133, ABCG2 expression in human salivary adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83. Lay the foundation for further tumor mechanism the extraction and analysis of VM generation of stem cells.
Method
1. this experiment collected in Second Hospital Affiliated to Tianjin Medical University in January 1999 33 cases of adenoid cystadenocarcinoma tissues were resected with the experimental conditions of -2009 in March. All specimens were stained by HE after re observation confirmed pathological diagnosis and classification. By CD31/PAS staining under the light microscope observation sections in human lacrimal adenoid cystic carcinoma tissue samples to identify the structure of VM. At the same time the application of two step immunohistochemistry in 33 specimens of CD44v6, expression of CD133 and ABCG2.
2., according to the observation of VM structure in adenoid cystadenocarcinoma of lacrimal gland, we applied statistical methods to compare their expression in different pathological types, and whether there was difference in the expression of CD44v6, CD133 and ABCG2 between VM expression group and non expression group.
3. by human salivary adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83 by Li Shenglin the Central Laboratory of Stomatology Hospital of Beijing Medical University) present two-dimensional culture and three-dimensional culture, observation of vasculogenic mimicry and tumor stem cell marker protein CD44v6, CD133, ABCG2 expression in SACC-83 cell line.
Result
1.33 cases were observed by HE staining, and immunohistochemistry results confirmed the diagnosis of lacrimal gland adenoid cystic carcinoma, including 13 cases of type (39.39%), 20 cases of adenoid tubular type (60.61%). By CD31/PAS double staining method to observe the structure of VM, found in 10 samples, the rate was 30.3%., 6 cases of solid type (46.2%), 4 cases of adenoid tubular type (20%), the difference between the two groups was not statistically significant (p=0.346).
2. VM were observed by adenoid cystic carcinoma cells surrounding the formation of tubular, slit shaped structure, the space structure visible red blood cells, red blood cells and the integrity of the structure, not around hemorrhage exist. We also observed the tumor cells cytoplasm of a large number of endocrine PAS positive substance and CD31 positive expression in the VM material. Group and non expression group CD44v6 were 1.57% and 2.51%, two showed a significant difference (p=0.023).
Methods 3.33 cases of tumors were observed by immunohistochemistry of stem cell related markers CD44v6, CD133, ABCG2 expression were CD44v6 positive expression rate was 54.5% (18/33). The positive rate of entity type 76.9% (10/13), the positive rate of adenoid tubular type 40% (8/20), the two groups was statistically significant the difference (p=0.037) positive expression rate of.CD133 was 57.6% (19/33), the entity type and adenoid tubular type were 76.92% (10/13), 45% (9/20), the difference was not statistically significant (p=0.070); protein expression localized in cell membrane and cytoplasm, pale yellow to brown, some of the cases at the same time the expression in the cytoplasm and nucleus of.ABCG2 positive expression rate was 21.2% (7/33), the entity type and adenoid tubular type were 30.8% (4/13), 15% (3/20), the difference was not statistically significant (p=0.297); the positive expression of ABCG2 cells with vascular distribution along the tendency.
4. in the two-dimensional culture of salivary adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83 cells were visible, ring, mesh growth, a cavity shaped, three-dimensional culture in tubular growth. In three-dimensional culture showed positive expression of VM. Cancer stem cell related protein in human salivary adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83, visible expression of CD44v6 the rate is 42.47 + 7.37%, the expression rate of CD133 was 56.56 + 10.27%, the expression rate of ABCG2 was 2.94 + 1.23%.
conclusion
The expression of VM in 1. human lacrimal gland adenoid cystic carcinoma and human salivary gland adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83
The pathological classification of 2. human lacrimal gland adenoid cystic carcinoma has no direct influence on the expression of VM, while CD44v6 is related to its typing.
The expression of VM is correlated with the expression of CD44v6 in 3. cases of adenoid cystic carcinoma of lacrimal gland, suggesting that VM is not only related to metastasis and recurrence of human lacrimal gland adenoid cystic carcinoma, but also CD44v6 may affect the generation of VM.
4. human lacrimal gland adenoid cystic carcinoma and human salivary adenoid cystic carcinoma cell line SACC-83 can express CD44v6, CD133 and ABCG2 of tumor stem cells related to different degrees, suggesting that there may be cancer stem cells in human lacrimal adenoid cystic carcinoma.

【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R739.7

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本文編號(hào)：1749980