本文關(guān)鍵詞： 抑癌基因P27 人眼球筋膜囊 成纖維細(xì)胞 基因轉(zhuǎn)染　出處：《大連醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的：青光眼是一組以視神經(jīng)凹陷性萎縮和視野缺損為共同特征的疾病,其致盲率已居于第二位。目前濾過手術(shù)是治療青光眼術(shù)式中最常用的一種。但青光眼濾過術(shù)后2年內(nèi)失敗率為15-25%,其主要原因為手術(shù)區(qū)成纖維細(xì)胞的增殖,細(xì)胞外間質(zhì)的合成,膠原沉積,以及繼之發(fā)生的結(jié)膜下組織纖維化,使手術(shù)形成的濾過道瘢痕化,從而使濾過泡功能減退,最終導(dǎo)致手術(shù)失敗。為抑制濾過道的瘢痕形成,常將能抑制瘢痕形成的藥物應(yīng)用于濾過性手術(shù),以期延緩或抑制濾過道的瘢痕形成,提高手術(shù)成功率。目前臨床上常用的抗瘢痕化藥物主要有5-氟尿嘧啶、絲裂霉素C等,它們對細(xì)胞的增殖都有一定的抑制作用,但是其抑制作用缺乏靶向性。這些藥物對細(xì)胞的增殖雖有不同程度的抑制,但因其有各種不可避免的毒副作用,故在臨床上的應(yīng)用存在一定程度的受限。抑癌基因P27為細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制劑,為控制細(xì)胞周期由G1-S期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵。本實驗將探討陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的抑癌基因P27對體外培養(yǎng)的人眼球筋膜囊成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用,為臨床上基因治療青光眼濾過術(shù)后瘢痕化提供理論依據(jù)。 方法：體外培養(yǎng)原代人眼球筋膜囊成纖維細(xì)胞,免疫組化鑒定,傳至第三代用于實驗。采用陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法,將構(gòu)建的PEGFP-N1 P27真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的人眼球筋膜囊成纖維細(xì)胞,同時以重組質(zhì)粒PEGFP-N 1作為空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組,體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞作為空白對照組。以流式細(xì)胞儀行細(xì)胞周期分析,MTT法檢測抑癌基因P27對成纖維細(xì)胞的作用。 結(jié)果：轉(zhuǎn)染P27抑癌基因組的細(xì)胞周期大都處于G0-G1期,轉(zhuǎn)染PEGFP-N 1空質(zhì)粒組和空白對照組的細(xì)胞周期大都處于S期,轉(zhuǎn)染的P27抑癌基因可使細(xì)胞周期停滯于G1期,明顯抑制成纖維細(xì)胞的增殖。 結(jié)論：轉(zhuǎn)染的抑癌基因P27對體外培養(yǎng)的人眼球筋膜囊成纖維細(xì)胞的增殖具有抑制作用。
[Abstract]:Objective : glaucoma is a group of diseases with common characteristics of optic nerve depression and visual field defect . The blindness rate has been in the second place . Methods : The cultured human eyeball fascia balloon fibroblasts were cultured in vitro . The eukaryotic expression plasmid of PEGFP - N1 was transferred to the third generation . The recombinant plasmid PEGFP - N1 was used as the empty plasmid transfection group , and the cultured fibroblasts were used as blank control group . Results : The cell cycle of the transfected cell cycle was in G0 - G1 phase , and the cell cycle of transfected PEGFP - N 1 empty plasmid group and blank control group was mostly in S phase . Conclusion : The inhibitory effect of transfected tumor suppressor gene on proliferation of human eyeball fascia fibroblasts cultured in vitro .

【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R775

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本文編號：1527053