本文關(guān)鍵詞：Th17細(xì)胞與IL-17在TON中的作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 外傷性視神經(jīng)病變 Th17細(xì)胞 IL-17 流式細(xì)胞儀 免疫組化學(xué) 蛋白免疫印跡

【摘要】：目的： 1.建立SD大鼠外傷性視神經(jīng)病變動(dòng)物模型,觀察SD大鼠外傷性視神經(jīng)病變后Th17細(xì)胞(Th17lymphocytes)及IL-17(interleukin-17)的變化趨勢(shì)。 2.探討Thl7細(xì)胞和IL-17在外傷性視神經(jīng)病變中的作用,為治療外傷性視神經(jīng)病變提供理論依據(jù)。 方法： 1.采用液壓沖擊顱腦損傷儀建立外傷性視神經(jīng)病變動(dòng)物模型,將70只4周齡健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組：正常組10只,假傷對(duì)照組10只和實(shí)驗(yàn)組50只,實(shí)驗(yàn)組分為5個(gè)亞組(1d、3d、7d、14d、28d,每組10只)。實(shí)驗(yàn)組大鼠用液壓顱腦損傷儀(FPI)建立外傷性視神經(jīng)病變模型；假傷對(duì)照組大鼠除不進(jìn)行打擊外,余處理同實(shí)驗(yàn)組；正常組大鼠不進(jìn)行任何處理。 2.分別在造模后1、3、7、14、28天對(duì)正常組、假傷對(duì)照組和相應(yīng)實(shí)驗(yàn)組大鼠進(jìn)行閃光視覺(jué)誘發(fā)電位(F-VEP)檢查,取大鼠脾臟制備脾單細(xì)胞懸液進(jìn)行Th17細(xì)胞的流式細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù),制作大鼠眼球標(biāo)本進(jìn)行IL-17免疫組化染色,提取視神經(jīng)蛋白應(yīng)用蛋白免疫印跡(Western blot)檢測(cè)視神經(jīng)中IL-17蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： 1.閃光視覺(jué)誘發(fā)電位結(jié)果顯示：各組大鼠均可引出典型的NPN波形。與正常組相比較假傷對(duì)照組大鼠的隱含值稍升高,振幅稍降低,但與正常組比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.219,P=0.829；t=-0.218,=0.830)；與假傷對(duì)照組相比較各實(shí)驗(yàn)組大鼠的隱含值從損傷后開(kāi)始上升,到14d左右開(kāi)始穩(wěn)定,而振幅正相反,從損傷后開(kāi)始下降,到14d左右開(kāi)始穩(wěn)定,與假傷對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.769,3.171,7.503,10.278,12.264,P0.05；t=3.413,5.979,7.291,9.352,10.070,P0.05)。 2.流式細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果顯示：與正常組相比較假傷對(duì)照組大鼠的脾臟單細(xì)胞懸液中,Thl7細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例稍增高,但與正常組比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.241,P=0.813)；與假傷對(duì)照組相比較各實(shí)驗(yàn)組Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例從損傷后開(kāi)始上升,損傷后7d達(dá)到高峰,然后開(kāi)始下降,但28d時(shí)仍高于假傷對(duì)照組。與假傷對(duì)照組相比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=12.244,13.659,18.302,19.813,13.938；P0.05)。 3.IL-17免疫組化結(jié)果顯示：與正常組相比較假傷對(duì)照大鼠組視網(wǎng)膜中IL-17陽(yáng)性表達(dá)稍增多,但與正常組比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.537,P=0.496)；與假傷對(duì)照組相比較各實(shí)驗(yàn)組大鼠視網(wǎng)膜中IL-17陽(yáng)性表達(dá)從損傷后開(kāi)始上升,損傷后7d達(dá)到高峰,然后開(kāi)始下降,但28d時(shí)仍高于假傷對(duì)照組。與假傷對(duì)照組相比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.253,5.219,7.974,9.528,7.441；P0.05)。 4. Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示：與正常組相比較假傷對(duì)照組大鼠視神經(jīng)中IL-17蛋白表達(dá)稍增高,但與正常組比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.405,P=0.690)；與假傷對(duì)照組相比較各實(shí)驗(yàn)組大鼠視神經(jīng)中IL-17蛋白表達(dá)從損傷后開(kāi)始上升,損傷后7d達(dá)到高峰,然后開(kāi)始下降,但28d時(shí)仍高于假傷對(duì)照組。與假傷對(duì)照組相比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.342,7.469,9.737,10.484,8.946；P0.05)。 結(jié)論： 1.實(shí)驗(yàn)組大鼠的隱含值從損傷后開(kāi)始上升,而振幅從損傷后開(kāi)始下降,并均在14d左右開(kāi)始穩(wěn)定,這些改變符合臨床上視神經(jīng)外傷后的電生理檢查變化特征,表明用FPI可以成功造成外傷性視神經(jīng)病變。 2.假傷對(duì)照組大鼠脾臟單細(xì)胞懸液中Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例、IL-17免疫組化及IL-17蛋白的表達(dá)與正常組相比較差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明除打擊外的操作對(duì)Th17細(xì)胞及IL-17的表達(dá)沒(méi)有影響。 3.實(shí)驗(yàn)組大鼠脾臟單細(xì)胞懸液中Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例、IL-17免疫組化及IL-17蛋白的表達(dá)與假傷對(duì)照組相比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明Th17細(xì)胞及IL-17可能在外傷性視神經(jīng)病變的發(fā)生和進(jìn)展過(guò)程中起到了一定的促進(jìn)作用。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R779.1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張琳琳;呂瀛娟;于榮國(guó);王興;申戰(zhàn)省;張蔚;顏華;;標(biāo)準(zhǔn)化大鼠外傷性視神經(jīng)損傷動(dòng)物模型建立[J];眼外傷職業(yè)眼病雜志(附眼科手術(shù));2008年12期

2 李佳;陳小平;;Th效應(yīng)細(xì)胞家族的新成員——Th17[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2007年11期

，

本文編號(hào)：1270900