本文關鍵詞：替普瑞酮對大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型HSF1表達的影響

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【摘要】：目的：通過向大鼠玻璃體腔注射N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartic acid,NMDA)制作視網(wǎng)膜興奮性損傷模型,觀察替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA)對熱休克轉錄因子1(heat shock transcription factor1,HSF1)表達的影響,從而進一步明確GGA誘導熱休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)表達的機制。 方法：將48只健康清潔級Wistar大鼠隨機平均分為4組：分別為正常對照組、實驗對照A組、實驗對照B組以及實驗組。正常對照組不行任何處理；實驗組腹腔內注射GGA(800mg/Kg),實驗對照A組、實驗對照B組腹腔注射等量溶劑(10%DMS0)。腹腔注射后1h實驗對照B組和實驗組的每只大鼠隨機抽取一只眼,將2μ1NMDA(80mmol/L)注入玻璃體腔內,做好標記；實驗對照A組隨機取一只眼行玻璃體腔穿刺并注射等量PBS。實驗組及實驗對照組于玻璃體腔穿刺后2h處死大鼠,正常對照組于實驗開始后1h全部處死。HE染色觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學變化,采用RT-PCR分析視網(wǎng)膜中HSFlmRNA的表達,免疫組織化學染色方法檢測P-HSF1-Ser326蛋白的表達。 結果：HE染色顯示：正常對照組大鼠視網(wǎng)膜組織層次完整清晰,細胞形態(tài)規(guī)則,染色均勻；實驗對照A組與正常組相比,視網(wǎng)膜組織結構、神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目及形態(tài)無明顯差別；實驗對照B組大鼠較正常組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層水腫,視神經(jīng)節(jié)細胞胞漿內出現(xiàn)空泡樣變性,內核層、外核層排列疏松,但視神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目及視網(wǎng)膜厚度未見明顯變化；實驗組大鼠視網(wǎng)膜損傷較實驗對照B組明顯減輕。RT-PCR結果顯示：實驗對照A組較正常對照組大鼠視網(wǎng)膜中HSFlmRNA的表達無明顯差別；實驗對照B組HSFlmRNA的表達量較前兩組明顯增加；實驗組較正常對照組mRNA表達量增加,較實驗對照B組無明顯差別。免疫組織化學染色顯示：正常對照組及實驗對照A組視神經(jīng)節(jié)細胞層、內核層及光感受器細胞層的內節(jié)只見微量的棕黃色顆粒沉積；實驗對照B組視神經(jīng)節(jié)細胞層、內核層、光感受器細胞層內節(jié)的棕黃色顆粒表達量較正常對照組及實驗對照A組明顯增加；實驗組視網(wǎng)膜各層均可見大量棕黃色顆粒沉積陰性對照組均未見明顯陽性染色。 結論：1、成功建立大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型： 2、在興奮性損傷模型中,GGA能于視網(wǎng)膜全層激活HSFl的活性,激活HSF1為GGA誘導視網(wǎng)膜表達HSP70的有效機制。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R774.1

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本文編號：1202755