本文關(guān)鍵詞：STAT3、Cyclin D1蛋白在EGCG促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞CNE-2凋亡中的表達(dá)變化及意義

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【摘要】：目的：鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，簡(jiǎn)稱NPC)系惡性程度較高的頭頸部腫瘤，在世界各大洲均有發(fā)現(xiàn)，但歐洲、美洲、大洋洲和拉丁美洲國(guó)家較少，東南亞較高發(fā)，但日本和朝鮮鼻咽癌發(fā)病率均低于1/10萬(wàn)。它在我國(guó)則是一種常見(jiàn)的惡性腫瘤，且分布具有明顯的地區(qū)性差異，廣東、廣西、福建、湖南等省發(fā)病率較高�，F(xiàn)今鼻咽癌的治療以放療為主輔以化療或手術(shù)等綜合性治療。Ⅰ期病例的綜合治療5年生存率可達(dá)95%，而Ⅳ期病人則僅為35%。大量研究表明，表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯能夠有效地降低腸癌、肺癌的的發(fā)生，，并具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。本試驗(yàn)主要在于觀察EGCG在體外的情況下對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞的影響，同時(shí)分析STAT3信號(hào)通路中的STAT3、Cyclin D1的蛋白表達(dá)變化，探討STAT3信號(hào)通路在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的機(jī)制，進(jìn)一步分析EGCG在促進(jìn)CNE2細(xì)胞凋亡中的作用。 方法：1.用不同濃度的EGCG分別處理CNE2細(xì)胞24h、48h、72h后，利用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖的情況，算出增殖抑制率。2.使用Hoechst33258熒光染色法觀察經(jīng)過(guò)不同濃度EGCG處理后的CNE2細(xì)胞，觀察細(xì)胞凋亡情況，計(jì)算凋亡率。3.分別用流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)過(guò)不同濃度EGCG處理過(guò)的CNE2細(xì)胞，觀察其對(duì)鼻咽癌細(xì)胞周期的影響。4.通過(guò)蛋白印跡技術(shù)western blot方法檢測(cè)不同濃度的EGCG對(duì)CNE2細(xì)胞中STAT3、Cyclin D1的不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化的影響。 結(jié)果：1. MTT比色法結(jié)果顯示，當(dāng)提高EGCG的濃度及作用時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)，EGCG對(duì)CNE2細(xì)胞的增殖抑制作用增強(qiáng)，且呈濃度與時(shí)間依賴性（p0.05）。2. Hochest熒光染色的結(jié)果顯示，EGCG處理CNE2細(xì)胞后出現(xiàn)了典型的凋亡的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。與對(duì)照組比較，隨著EGCG濃度的增加，凋亡細(xì)胞數(shù)不斷增多（p＜0.05）。3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度的EGCG分別干預(yù)后CNE2細(xì)胞24h、48h后，停滯在S、G1/G0的細(xì)胞與對(duì)照組相比，隨著濃度的提高而增多。4. Western blot檢測(cè)經(jīng)過(guò)EGCG干預(yù)后的CNE2細(xì)胞中STAT3、CyclinD1蛋白表達(dá)量隨著EGCG濃度的增加而表達(dá)降低。 結(jié)論：1. EGCG可能通過(guò)下調(diào)STAT3蛋白，作為EGCG抗鼻咽癌的生物學(xué)作用機(jī)制之一。3. EGCG抑制CNE2細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其凋亡，可能與下調(diào)Cyclin D1蛋白的表達(dá)相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：EGCG STAT3 CyclinD1 CNE2 凋亡
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R739.63
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英漢縮略詞對(duì)照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器12-13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法13-25
• 2 結(jié)果25-31
• 2.1 EGCG 對(duì) CNE2 細(xì)胞增殖的抑制作用25-26
• 2.2 Hochest33258 染色觀察 EGCG 誘導(dǎo) CNE2 細(xì)胞的凋亡26-27
• 2.3 EGCG 對(duì)細(xì)胞周期的影響27-29
• 2.4 蛋白免疫印跡試驗(yàn)29-31
• 3 討論31-38
• 4 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-45
• 綜述45-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 吳民華;陳小毅;蔡康榮;;JAK激酶抑制劑AG490對(duì)鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];癌癥;2009年01期

2 王俊閣;李曉明;陳英會(huì);路秀英;;信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3在喉癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2007年03期

3 雷迅;劉強(qiáng)和;孔中雨;向秋;耿宛平;黃輝;董譯元;劉芳賢;;EGCG對(duì)鼻咽癌細(xì)胞株裸鼠移植瘤的放療增敏作用以及對(duì)Survivin表達(dá)的影響[J];山東大學(xué)耳鼻喉眼學(xué)報(bào);2009年01期

4 李玲,張平,章崇杰,蔡美英;STAT3研究近況[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2001年02期

5 崔巍;流式細(xì)胞術(shù)PI染色進(jìn)行細(xì)胞周期分析的原理是什么?[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2004年03期

本文編號(hào)：1122438