hOGG1重組腺病毒載體在人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的表達(dá)及其抗氧化應(yīng)激作用研究
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更多相關(guān)文章: 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 人-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶 -羥基鳥(niǎo)嘌呤 氧化損傷
【摘要】:目的:觀察重組腺病毒pAd-CMV5-DEST-hogg1轉(zhuǎn)染人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞ARPE-19后,高表達(dá)hOGG1對(duì)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞在H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷中的作用。方法:鑒定和包裝重組腺病毒pAd-CMV5-DEST-hogg1和腺病毒載體對(duì)照p Ad/CMV/V5-GW/lac Z,并分別轉(zhuǎn)染ARPE-19細(xì)胞。H2O2(100μmol·L-1,2 h)干預(yù)轉(zhuǎn)染重組腺病毒的ARPE-19細(xì)胞(RPE-Ad-hogg1)、轉(zhuǎn)染腺病毒載體對(duì)照的ARPE-19細(xì)胞(RPE-Ad-lac Z)以及未轉(zhuǎn)染病毒的ARPE-19細(xì)胞。蛋白免疫印跡法檢測(cè)3組細(xì)胞hOGG1的表達(dá)量;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS的生成量;免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)氧化損傷標(biāo)志性終產(chǎn)物8-羥基鳥(niǎo)嘌呤(8-oxod G)的形成量。結(jié)果:重組腺病毒p Ad-CMV5-DEST-hogg1包裝成功,并在ARPE-19細(xì)胞中表達(dá);高表達(dá)h OGG1的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞較兩對(duì)照組細(xì)胞顯示出更少的ROS生成量(P0.05)、更低的8-oxod G氧化損傷程度(P0.01)。結(jié)論:視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞hOGGl蛋白高表達(dá),可提高ARPE-19細(xì)胞堿基水平的修復(fù)能力。
【作者單位】: 東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院;東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院眼科;
【關(guān)鍵詞】: 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 人-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶 -羥基鳥(niǎo)嘌呤 氧化損傷
【分類號(hào)】:R774.1
【正文快照】: 內(nèi)外界因素引起的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)的失衡會(huì)引起諸如糖尿病性視網(wǎng)膜病變(DR)、年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)等許多眼底疾病[1-2],而多數(shù)視網(wǎng)膜疾病的發(fā)生為慢性過(guò)程,早期癥狀不明顯,難以通過(guò)篩查明確診斷,并且發(fā)生氧化損傷后的組織病理改變具有一定的不可逆性[3],因此
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1112479
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