本文關(guān)鍵詞：乙琥胺治療老年性耳聾的實驗性研究

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【摘要】：目的觀察乙琥胺對老年性耳聾小鼠模型NOD/LtJ小鼠的耳聾保護作用,并探討乙琥胺延緩小鼠聽力損失的可能機制。方法①將耳聾小鼠模型NOD/LtJ小鼠隨機分為乙琥胺治療組與對照組,在小鼠3周齡時,治療組小鼠給予每天200 mg/kg乙琥胺灌胃治療,對照組給予同劑量的PBS對照治療。分別在小鼠生后第4、6、8周檢測兩組小鼠的聽性腦干反應(yīng)(ABR)與畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(DPOAE)對比觀察兩組小鼠的聽力變化②在第8周取兩組小鼠耳蝸進行耳蝸基底膜鋪片,觀察兩組小鼠耳蝸基底膜毛細胞掉落情況。③同樣取第8周兩組小鼠耳蝸,通過免疫熒光技術(shù)對比觀察兩組小鼠耳蝸毛細胞內(nèi)凋亡蛋白Caspasse-3含量變化。④通過實時定量熒光PCR技術(shù)檢測兩組小鼠第8周耳蝸內(nèi)凋亡基因caspasse-3的表達。結(jié)果1.連續(xù)對照比較兩組小鼠click聲ABR值可見兩組小鼠聽力閾值都呈現(xiàn)增長趨勢,但乙琥胺治療組小鼠比對照組小鼠ABR值增長緩慢且閾值低。在第8周測得治療組小鼠純音8、16、32kHz頻率ABR值均低于對照組,差異有顯著性(P0.05)。2.在第8周測試治療組與對照組小鼠的DPOAE值,可見在低頻刺激聲17672Hz前,測得兩組小鼠DPOAE值差異不明顯(P0.05)。而在高頻24990Hz時,測得兩組DPOAE值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.在用乙琥胺治療NOD/LtJ小鼠5周后觀察治療組小鼠與對照組小鼠耳蝸毛細胞脫落情況,可見在耳蝸基底膜頂環(huán)與中環(huán),兩組小鼠外毛細胞脫落都較少,未見內(nèi)毛細胞脫落。而在基底膜底環(huán)中,兩組小鼠外毛細胞均有脫落,但治療組小鼠較對照組小鼠脫落的毛細胞數(shù)目明顯減少。4.在用乙琥胺治療NOD/LtJ小鼠5周后處死兩組小鼠后觀察兩組小鼠耳蝸毛細胞中凋亡相關(guān)蛋白Caspasse-3的變化,可見治療組中小鼠的內(nèi)、外毛細胞中Caspasse-3蛋白的熒光信號弱于對照組中Caspasse-3蛋白的熒光信號。5.用rt-PCR方法定量檢測乙琥胺治療5周后檢測治療組小鼠與對照組小鼠耳蝸中凋亡相關(guān)基因mRNA的含量,結(jié)果顯示治療組caspasse-3 mRNA含量較對照組減少,差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論本實驗通過對乙琥胺治療組NOD/LtJ小鼠與對照組小鼠的聽力功能檢測、耳蝸基底膜毛細胞的組織學(xué)觀察以及相關(guān)凋亡基因表達的檢測,認為乙琥胺有保護耳聾小鼠聽力功能的作用,且主要是通過抗凋亡途徑來延緩小鼠聽力損失的進展。
【關(guān)鍵詞】：乙琥胺 老年性耳聾 小鼠模型 凋亡 Caspasse-3
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R764.43
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本文編號：1004393