本文關(guān)鍵詞：反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)對(duì)丙型肝炎病毒可視化分型檢測(cè)

  更多相關(guān)文章： 丙型肝炎病毒(HCV) 反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(RT-LAMP) 分型檢測(cè)

【摘要】：目的應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(RT-LAMP)可視化檢測(cè)丙型肝炎病毒(HCV)1b和2a基因型,為RTLAMP技術(shù)應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)或基層醫(yī)院提供初步探索經(jīng)驗(yàn)。方法首先,收集臨床陽性樣本并用熒光定量PCR分型檢測(cè),把樣本基本分為1型和非1型。然后分別根據(jù)HCV 1b和2a基因型設(shè)計(jì)RT-LAMP引物并優(yōu)化反應(yīng)條件,通過互換模板實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證這2套引物的特異性,并通過檢測(cè)稀釋的模板以驗(yàn)證引物的靈敏度。同時(shí)用鈣黃綠素進(jìn)行產(chǎn)物顯色,使HCV分型檢測(cè)可視化。最后用RT-LAMP方法檢測(cè)臨床樣本,并計(jì)算陽性率,應(yīng)用配對(duì)卡方檢驗(yàn)比較RT-LAMP和熒光定量PCR的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果優(yōu)化好的RT-LAMP體系的特異性好,對(duì)HCV 1b型的檢測(cè)靈敏度為103 IU/mL,2a型的檢測(cè)靈敏度為104 IU/mL。另外,利用鈣黃綠素進(jìn)行產(chǎn)物檢測(cè)的效果和電泳結(jié)果相當(dāng)。通過對(duì)臨床樣本分型檢測(cè),HCV 1b型樣本的RTLAMP檢測(cè)結(jié)果和熒光定量PCR差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),HCV 2a型樣本的RT-LAMP檢測(cè)結(jié)果和熒光定量PCR差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但是未檢出的樣本中有2例為HCV 2b型。結(jié)論 RT-LAMP對(duì)HCV的可視化分型檢測(cè)具有較好的特異性和靈敏度,操作簡便,具有在現(xiàn)場(chǎng)或基層醫(yī)院的應(yīng)用前景。
【作者單位】： 承德醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院全軍肝病診治中心;
【關(guān)鍵詞】： 丙型肝炎病毒(HCV) 反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(RT-LAMP) 分型檢測(cè)
【基金】：全軍醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金項(xiàng)目(No.CBJ14C010)資助~~
【分類號(hào)】：R512.63;R440
【正文快照】： 丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是僅次于乙型肝炎病毒引起慢性肝炎的主要病原體,如果不進(jìn)行正確治療,將有相當(dāng)比例的患者會(huì)發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。根據(jù)HCV序列之間超過30%的差異,可將HCV主要分為6個(gè)基因型,每一型又可細(xì)分為不同的亞型。HCV基因分型檢測(cè)具有重要的臨床意

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于樂成,顧長海,毛青,李奇芬,王宇明;丁型肝炎病毒核酶在分子水平對(duì)丙型肝炎病毒RNA的反式剪切活性[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2001年06期

2 王金湖;丙型肝炎病毒胃腸傳播初探[J];江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué);2001年04期

3 Akbayir N.,G銉kdemir G. ,Mansur T. ,王志宇;丙型肝炎病毒與白斑病是否相關(guān)[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè));2005年03期

4 Ito H.;Nagano M. ;王英鵬;;原位鑒定肌肉中的丙型肝炎病毒RNA[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(神經(jīng)病學(xué)分冊(cè));2005年09期

5 郭振華,景濤;丙型肝炎病毒傳播研究新進(jìn)展[J];臨床消化病雜志;2005年02期

6 馮麗萍;白鋼鉆;張曉林;;丙型肝炎病毒宮內(nèi)傳播的臨床研究[J];山西醫(yī)藥雜志;2006年05期

7 Yildirim B.;Tahan V.;Ozaras R.;李宏宇;;土耳其社區(qū)人群感染丙型肝炎病毒的危險(xiǎn)因素[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè));2006年05期

8 Karaca 噻.;噻akalo■lu Y.;Demir K.;王順濤;;丙型肝炎病毒在土耳其人群中傳播的危險(xiǎn)因素[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè));2006年09期

9 Anand B.S.;Currie S.;Dieperink E.;尹勇;;飲酒與丙型肝炎病毒治療:美國一項(xiàng)多中心研究結(jié)果[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè));2006年10期

10 張?jiān)葡?;丙型肝炎病毒來了,你知道嗎?[J];肝博士;2007年03期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 唐小平;聶建敏;;HIV和HCV合并感染研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 熊瑜琳;張長江;朱研;王小紅;譚朝霞;胡亞君;;丙型肝炎病毒1b型3′端4456bp半基因組擴(kuò)增[A];病毒性肝炎慢性化、重癥化基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 李婷婷;陳姿喧;曾勁峰;章金剛;王文敬;邊奕鑫;黎誠耀;;獻(xiàn)血者丙型肝炎病毒自然康復(fù)與慢性感染的分子特征[A];中國輸血協(xié)會(huì)第五屆輸血大會(huì)論文專集（摘要篇）[C];2010年

4 李瑩;陳建杰;;丙型肝炎病毒基因的研究進(jìn)展[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十二屆內(nèi)科肝膽病學(xué)術(shù)會(huì)議暨第四次國家中醫(yī)肝病重點(diǎn)�？茀f(xié)作組學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 張瑞;杜紹財(cái);田園;韓建德;魏來;;丙型肝炎病毒1b型5’非編碼區(qū)變異區(qū)域性分布的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

6 楊光;陳姝;崔金環(huán);;利用基因膜芯片技術(shù)進(jìn)行乙型和丙型肝炎病毒聯(lián)合診斷與分型[A];肝臟病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)及新進(jìn)展學(xué)習(xí)班專刊[C];2005年

7 郁佩青;池琦;趙暉;;血液凈化治療中丙型肝炎病毒跨膜通透的臨床探討[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

8 丁世雄;梁曉岳;胡愛榮;周文紅;翁彭劍;;寧波地區(qū)丙型肝炎病毒基因分型檢測(cè)[A];2011年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

9 陳智;張萍;;丙型肝炎病毒基因組結(jié)構(gòu)和功能研究進(jìn)展[A];2004年浙江省傳染病、肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 李王霞;;丙型肝炎病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展[A];中國輸血協(xié)會(huì)第四屆輸血大會(huì)論文集[C];2006年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 記者　陳勇;美人工復(fù)制成丙型肝炎病毒[N];光明日?qǐng)?bào);2005年

2 記者劉浦泉;丙肝檢測(cè)速度大大加快[N];人民日?qǐng)?bào);2003年

3 記者 王江;俄羅斯科學(xué)家發(fā)現(xiàn)丙肝病毒會(huì)傷害中樞神經(jīng)[N];科技日?qǐng)?bào);2000年

4 劉浦泉;提前30天確認(rèn)丙肝[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

5 劉浦泉;我國丙肝檢測(cè)法獲重大突破[N];保健時(shí)報(bào);2003年

6 新華社;丙肝病毒人工復(fù)制成功[N];健康報(bào);2005年

7 桔梗;全球1.8 億人患丙肝[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

8 記者 白毅;中科院發(fā)現(xiàn)丙肝治療潛在新靶點(diǎn)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2014年

9 張京華;治丙肝新藥投放臨床[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李友杏;丙型肝炎病毒NS4B蛋白調(diào)控MMP-2和Bcl-2表達(dá)的信號(hào)通路研究[D];武漢大學(xué);2012年

2 時(shí)方圓;以流感病毒神經(jīng)氨酸酶和丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶為靶點(diǎn)的抗病毒先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)[D];山東大學(xué);2015年

3 劉菲;應(yīng)用感染性丙型肝炎病毒細(xì)胞模型研究其病毒顆粒組份和干擾素omega的體外抗病毒作用[D];中南大學(xué);2008年

4 劉長虹;外周血單個(gè)核細(xì)胞的長期體外培養(yǎng)及丙型肝炎病毒細(xì)胞模型的建立[D];山東大學(xué);2005年

5 趙志海;丙型肝炎病毒慢性感染臨床免疫學(xué)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

6 關(guān)默;丙型肝炎病毒高變區(qū)1中存在介導(dǎo)病毒入侵和免疫逃避的三個(gè)不同結(jié)構(gòu)域[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 張欣欣;丙型肝炎病毒高變區(qū)1高反應(yīng)性多肽篩選、表達(dá)及其特性研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2003年

8 毛青;免疫選擇壓力對(duì)丙型肝炎病毒高變區(qū)基因變異的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

9 屈靜;人Ⅰ型免疫缺陷病毒Rev蛋白促進(jìn)丙型肝炎病毒翻譯的分子機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2011年

10 張立新;丙型肝炎病毒5’非編碼區(qū)及非結(jié)構(gòu)蛋白5A的基因變異及其臨床意義[D];山東大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李鵬飛;丙型肝炎病毒高變區(qū)1介導(dǎo)HCV感染細(xì)胞機(jī)制的初步研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 呂銘洋;丙型肝炎病毒基因分型的方法學(xué)建立及初步應(yīng)用[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2015年

3 馬力;丙型肝炎病毒體外細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的建立和超微結(jié)構(gòu)觀察及受體介導(dǎo)的入胞作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 姜翠;丙型肝炎病毒自發(fā)清除者的血清代謝組學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2013年

5 元順女;延吉市丙型肝炎病毒感染狀況初步分析[D];延邊大學(xué);2010年

6 王佳;樹，

本文編號(hào)：732168