川芎含藥血清對肝星狀細胞Toll樣受體4及下游信號因子MyD88表達的影響
發(fā)布時間:2017-08-22 15:23
本文關(guān)鍵詞:川芎含藥血清對肝星狀細胞Toll樣受體4及下游信號因子MyD88表達的影響
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【摘要】:目的:觀察川芎含藥血清對脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的大鼠肝星狀細胞(hepatic stellate cell, HSC)Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)及下游信號因子髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)表達的影響。方法:選用健康清潔級SD大鼠60只,隨機分為川芎低劑量組、川芎中劑量組、川芎高劑量組、模型組、秋水仙堿組、空白組6組,每組10只,給予川芎低中高水煎劑、秋水仙堿、生理鹽水連續(xù)灌胃7天制備川芎含藥血清、秋水仙堿含藥血清和空白含藥血清。體外培養(yǎng)的肝星狀細胞,除空白組外,其余各組均予LPS 1μg-ml-1刺激24 h,各組含藥血清干預(yù)后于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24 h后收集細胞,分別采用半定量RT-PCR和Western blot法測定TLR4,MyD88 mRNA和蛋白的表達情況。結(jié)果:用LPS刺激大鼠HSC后,TLR4與MyD88的mRNA和蛋白的表達均明顯增加(與空白對照組比較P0.01)。川芎含藥血清干預(yù)后,TLR4、MyD88 mRNA和蛋白的表達明顯減少(與模型組比較P0.01或P0.05),其中川芎含藥血清中、高劑量組減少最為明顯。結(jié)論:川芎含藥血清可通過抑制LPS誘導(dǎo)的HSC中TLR4及下游信號因子MyD88的表達,參與調(diào)控TLR4信號通路而發(fā)揮其抗肝纖維化作用。中藥川芎抗肝纖維化的效果具有一定的劑量依賴關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】:川芎 肝星狀細胞 脂多糖 Toll樣受體4 肝纖維化
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R575
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照6-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-11
- 前言11-12
- 1 實驗材料12-13
- 1.1 實驗動物12
- 1.2 實驗細胞12
- 1.3 實驗藥物12
- 1.4 主要試劑與器材12-13
- 2 實驗方法13-17
- 2.1 藥物制備13
- 2.2 含藥血清制備13-14
- 2.3 細胞培養(yǎng)14-15
- 2.3.1 相關(guān)試劑的配置14
- 2.3.2 細胞培養(yǎng)14
- 2.3.3 細胞傳代14
- 2.3.4 細胞凍存14-15
- 2.3.5 細胞復(fù)蘇15
- 2.4 細胞干預(yù)15
- 2.5 RT-PCR檢測肝星狀細胞內(nèi)TLR4、MyD88的表達15-17
- 2.6 蛋白質(zhì)印跡分析(Western blot))檢測肝星狀細胞內(nèi)TLR4、MyD88蛋白的表達17
- 3 統(tǒng)計學(xué)處理17
- 4 結(jié)果分析17-19
- 4.1 川芎含藥血清對LPS刺激的肝星狀細胞TLR4,MyD88基因表達的影響17-18
- 4.2 川芎含藥血清對LPS刺激的肝星狀細胞TLR4,MyD88蛋白表達的影響18-19
- 5 討論19-23
- 5.1 Toll樣受體4信號通路與肝纖維化19-20
- 5.2 中醫(yī)對肝纖維化病機的認識20
- 5.3 中藥含藥血清的運用20-21
- 5.4 肝纖維化的治療目標21-23
- 參考文獻23-27
- 小結(jié)27-28
- 附圖28-31
- 1. 肝星狀細胞形態(tài)28-29
- 2. Western blot檢測蛋白的表達29-30
- 3. RT-PCR檢測mRNA的表達30-31
- 文獻綜述 Toll樣受體4信號通路與肝纖維化研究進展31-40
- 1 Toll樣受體4結(jié)構(gòu)31-32
- 2 Toll樣受體4信號通路32-33
- 2.1 MyD88依賴途徑32-33
- 2.2 MyD88非依賴途徑33
- 3 Toll樣受體4信號通路與肝星狀細胞33-34
- 4 Toll樣受體4信號通路與肝纖維化34-35
- 5 展望35-36
- 參考文獻36-40
- 致謝40-41
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文41
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1 涂傳濤,張順財;過氧化物酶體增殖物激活受體γ與肝星狀細胞[J];肝臟;2002年02期
2 龔浩,張忠濤,王宇;血管緊張素Ⅱ與肝星狀細胞的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2005年06期
3 龔浩;王宇;張忠濤;李建設(shè);馬雪梅;周延忠;;血管緊張素Ⅱ及其受體拮抗劑對肝星狀細胞Ⅰ型膠原合成的影響[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年01期
4 張宗h,
本文編號:719885
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