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川芎含藥血清對肝星狀細(xì)胞Toll樣受體4及下游信號因子MyD88表達(dá)的影響

發(fā)布時間:2017-08-22 15:23

  本文關(guān)鍵詞:川芎含藥血清對肝星狀細(xì)胞Toll樣受體4及下游信號因子MyD88表達(dá)的影響


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【摘要】:目的:觀察川芎含藥血清對脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的大鼠肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell, HSC)Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)及下游信號因子髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)表達(dá)的影響。方法:選用健康清潔級SD大鼠60只,隨機(jī)分為川芎低劑量組、川芎中劑量組、川芎高劑量組、模型組、秋水仙堿組、空白組6組,每組10只,給予川芎低中高水煎劑、秋水仙堿、生理鹽水連續(xù)灌胃7天制備川芎含藥血清、秋水仙堿含藥血清和空白含藥血清。體外培養(yǎng)的肝星狀細(xì)胞,除空白組外,其余各組均予LPS 1μg-ml-1刺激24 h,各組含藥血清干預(yù)后于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24 h后收集細(xì)胞,分別采用半定量RT-PCR和Western blot法測定TLR4,MyD88 mRNA和蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:用LPS刺激大鼠HSC后,TLR4與MyD88的mRNA和蛋白的表達(dá)均明顯增加(與空白對照組比較P0.01)。川芎含藥血清干預(yù)后,TLR4、MyD88 mRNA和蛋白的表達(dá)明顯減少(與模型組比較P0.01或P0.05),其中川芎含藥血清中、高劑量組減少最為明顯。結(jié)論:川芎含藥血清可通過抑制LPS誘導(dǎo)的HSC中TLR4及下游信號因子MyD88的表達(dá),參與調(diào)控TLR4信號通路而發(fā)揮其抗肝纖維化作用。中藥川芎抗肝纖維化的效果具有一定的劑量依賴關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】:川芎 肝星狀細(xì)胞 脂多糖 Toll樣受體4 肝纖維化
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R575
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照6-7
  • 中文摘要7-9
  • 英文摘要9-11
  • 前言11-12
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)動物12
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞12
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)藥物12
  • 1.4 主要試劑與器材12-13
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法13-17
  • 2.1 藥物制備13
  • 2.2 含藥血清制備13-14
  • 2.3 細(xì)胞培養(yǎng)14-15
  • 2.3.1 相關(guān)試劑的配置14
  • 2.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)14
  • 2.3.3 細(xì)胞傳代14
  • 2.3.4 細(xì)胞凍存14-15
  • 2.3.5 細(xì)胞復(fù)蘇15
  • 2.4 細(xì)胞干預(yù)15
  • 2.5 RT-PCR檢測肝星狀細(xì)胞內(nèi)TLR4、MyD88的表達(dá)15-17
  • 2.6 蛋白質(zhì)印跡分析(Western blot))檢測肝星狀細(xì)胞內(nèi)TLR4、MyD88蛋白的表達(dá)17
  • 3 統(tǒng)計學(xué)處理17
  • 4 結(jié)果分析17-19
  • 4.1 川芎含藥血清對LPS刺激的肝星狀細(xì)胞TLR4,MyD88基因表達(dá)的影響17-18
  • 4.2 川芎含藥血清對LPS刺激的肝星狀細(xì)胞TLR4,MyD88蛋白表達(dá)的影響18-19
  • 5 討論19-23
  • 5.1 Toll樣受體4信號通路與肝纖維化19-20
  • 5.2 中醫(yī)對肝纖維化病機(jī)的認(rèn)識20
  • 5.3 中藥含藥血清的運(yùn)用20-21
  • 5.4 肝纖維化的治療目標(biāo)21-23
  • 參考文獻(xiàn)23-27
  • 小結(jié)27-28
  • 附圖28-31
  • 1. 肝星狀細(xì)胞形態(tài)28-29
  • 2. Western blot檢測蛋白的表達(dá)29-30
  • 3. RT-PCR檢測mRNA的表達(dá)30-31
  • 文獻(xiàn)綜述 Toll樣受體4信號通路與肝纖維化研究進(jìn)展31-40
  • 1 Toll樣受體4結(jié)構(gòu)31-32
  • 2 Toll樣受體4信號通路32-33
  • 2.1 MyD88依賴途徑32-33
  • 2.2 MyD88非依賴途徑33
  • 3 Toll樣受體4信號通路與肝星狀細(xì)胞33-34
  • 4 Toll樣受體4信號通路與肝纖維化34-35
  • 5 展望35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-40
  • 致謝40-41
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文41

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 涂傳濤,張順財;過氧化物酶體增殖物激活受體γ與肝星狀細(xì)胞[J];肝臟;2002年02期

2 龔浩,張忠濤,王宇;血管緊張素Ⅱ與肝星狀細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2005年06期

3 龔浩;王宇;張忠濤;李建設(shè);馬雪梅;周延忠;;血管緊張素Ⅱ及其受體拮抗劑對肝星狀細(xì)胞Ⅰ型膠原合成的影響[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年01期

4 張宗h,

本文編號:719885


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