發(fā)布時間：2017-08-22 13:28

  本文關(guān)鍵詞：HBV轉(zhuǎn)基因小鼠尿液中乙肝病毒相關(guān)指標的分析

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【摘要】：目的檢測分析HBV轉(zhuǎn)基因小鼠尿液中HBV相關(guān)指標表達情況,進一步認識轉(zhuǎn)基因小鼠的生物學(xué)特性;并通過多種實驗方法確定尿液中HBV相關(guān)指標的組織來源。方法使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和熒光定量PCR(real-time PCR)檢測轉(zhuǎn)基因小鼠尿液中HBV相關(guān)指標;并通過水動力轉(zhuǎn)染的小鼠實驗、RNA干擾方法抑制HBV表達轉(zhuǎn)基因鼠實驗、乙肝患者HBV陽性血清感染正常小鼠實驗等多種實驗方法確定其復(fù)制表達組織來源。結(jié)果 HBV轉(zhuǎn)基因小鼠尿液中存在HBsAg、HBe Ag、及HBV-DNA表達,其中HBsAg的表達水平較高(6674±619.8 IU/m L),但低于血清中HBsAg的表達水平(16470±2704 IU/m L),尿液HBsAg雄性小鼠的表達水平高于雌性小鼠;而尿液HBe Ag表達水平較低,且尿液中HBe Ag的陽性率高于血液,HBe Ag的表達水平個體間和性別間有明顯差異;尿液中存在HBV-DNA含量達到10~3~10~5copy/m L;未檢測到相關(guān)抗體表達。通過水動力轉(zhuǎn)染等實驗表明轉(zhuǎn)基因鼠尿液中的HBV相關(guān)指標來源于腎臟的復(fù)制表達,而不是由肝臟分泌進入血液循環(huán)以尿液排出,腎臟是HBV獨立的表達場所。結(jié)論轉(zhuǎn)基因小鼠尿液中存在HBV相關(guān)指標的表達,并隨月齡長期表達,其中HBsAg及HBV-DNA表達水平較高且比較穩(wěn)定,雄性小鼠尿液HBsAg的滴度高于雌性小鼠;HBe Ag雄性鼠表達水平相對雌性鼠較高且比較穩(wěn)定;尿液中無各類抗體表達;腎臟也是HBV獨立的復(fù)制表達場所。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)比較醫(yī)學(xué)研究所暨實驗動物中心;解放軍第458醫(yī)院全軍肝病中心;
【關(guān)鍵詞】： 肝炎病毒 乙型 轉(zhuǎn)基因小鼠 模型 動物 尿液 生物學(xué)特性
【基金】：國家科技重大專項課題—艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治—HBV細胞和動物模型的建立和應(yīng)用(課題編號:2012ZX10004503010)
【分類號】：R512.62
【正文快照】： 目前轉(zhuǎn)基因小鼠在乙型肝炎的研究中得到了廣泛地應(yīng)用,綜合國內(nèi)外相關(guān)文獻表明[1-5],HBV轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)表達的組織特異性及與病毒元件和細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄活性子的相互作用有關(guān)。此外,其它還有許多因素影響轉(zhuǎn)錄,包括激素、組織特異性轉(zhuǎn)錄子及各種修飾細胞在轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平相互作用均

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本文編號：719406