本文關(guān)鍵詞：蘋果酵素對小鼠腸道微生態(tài)的恢復(fù)重建作用

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【摘要】：目的： 建立小鼠腸道菌群失調(diào)模型,使用自制蘋果酵素對模型小鼠進(jìn)行干預(yù),從微生態(tài)學(xué)角度研究自制蘋果酵素對腸道菌群失調(diào)小鼠腸道微生態(tài)的恢復(fù)重建作用,為治療腸道菌群失調(diào)癥找到安全、高效的微生態(tài)制劑提供理論依據(jù)。方法： 1、50只清潔級昆明種小鼠,8周齡,體重33.28±3.13g,雌雄各半,分籠喂養(yǎng),清潔環(huán)境飼養(yǎng)。隨機抽取10只小鼠做為正常對照組,其余40只建立動物模型。2、采用鹽酸林可霉素致小鼠抗生素相關(guān)性腹瀉,隨機選取10只建模小鼠進(jìn)行檢測。待菌群失調(diào)模型建立后,隨機將30只小鼠分為模型組,實驗組,微生態(tài)制劑組,每組10只。3、使用自制蘋果酵素進(jìn)行干預(yù)后,無菌收集各組小鼠腸道回腸部和結(jié)腸部中的糞便,提取糞便總DNA,采用PCR-DGGE進(jìn)行檢測,通過條帶的灰度值進(jìn)行比較。4、采用聚類分析、相似性分析和多樣性分析統(tǒng)計方法進(jìn)行評價。結(jié)果： 1、建模小鼠腹瀉癥狀逐漸加重,糞便稀,不成形,呈黃色水樣;同時出現(xiàn)不同程度的精神萎靡,食量下降,活動遲緩,畏寒扎堆;被毛無光澤。平均體重由造模第1d的最高體重35.69±1.32g降到造模第7d的30.52±0.72g,與正常對照組小鼠相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(R0.01)。建模小鼠回腸和結(jié)腸糞便樣本細(xì)菌16S r DNA的PCR-DGGE圖譜分析顯示泳道中條帶數(shù)量及亮度較正常對照組明顯減少,腸道菌群多樣性指數(shù)降低,較相應(yīng)對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(R0.05)。2、各處理因素干預(yù)7d后,微生態(tài)制劑組和實驗組小鼠行為逐漸活躍,精神狀況良好,腹瀉癥狀減輕。糞便性狀轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色顆粒狀,質(zhì)地較硬,進(jìn)食量增加。且比模型組恢復(fù)的快。實驗組小鼠體重恢復(fù)最快,達(dá)到35.35±2.56g,實驗組小鼠體重與治療前(R0.01)和模型組相比(R0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。而與正常對照組(R0.05)和微生態(tài)制劑組相比(R0.05),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。3、正常對照組小鼠腸道回腸和結(jié)腸部菌群DGGE顯示,泳道中有大量條帶存在,對于同一部位樣本,泳道中條帶的位置和亮度無明顯差異。不同部位樣本間條帶的數(shù)量、位置和亮度有明顯差異。正常對照組結(jié)腸部菌群多樣性高于回腸部,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(R0.05)。4、不同處理因素對小鼠腸道回腸和結(jié)腸部菌群影響的DGGE圖譜顯示,微生態(tài)制劑組和實驗組條帶數(shù)均比模型組多。各組與正常對照組DGGE圖譜中出現(xiàn)一些共性條帶,同時各組均出現(xiàn)差異性條帶,且亮度也有所不同。相似性分析和聚類分析表現(xiàn)為實驗組所對應(yīng)的泳道與正常對照組相似性最高。微生態(tài)制劑組、實驗組和模型組小鼠回腸和結(jié)腸部菌群多樣性指數(shù)低于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(R0.05)。微生態(tài)制劑組和實驗組多樣性指數(shù)均大于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(R0.05)。實驗組略優(yōu)于微生態(tài)制劑組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論： 通過建立腸道菌群失調(diào)小鼠模型,采用PCR-DGGE方法證實,自制蘋果酵素對腸道菌群失調(diào)小鼠腸道微生態(tài)有恢復(fù)重建的作用。
【關(guān)鍵詞】：蘋果酵素 菌群失調(diào) 腸道微生態(tài) 恢復(fù)重建 小鼠 體內(nèi)試驗
【學(xué)位授予單位】：大理學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R57
【目錄】：

• 英文縮略詞4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 實驗技術(shù)路線12-13
• 材料與方法13-19
• 1 實驗材料13
• 2 主要實驗試劑與儀器13-14
• 3 試劑配置14-15
• 4 實驗方法15-19
• 試驗結(jié)果19-29
• 1 腸道菌群失調(diào)小鼠模型的建立19-22
• 2 自制蘋果酵素對小鼠腸道菌群的恢復(fù)重建作用22-29
• 討論29-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 附錄44-45
• 致謝45

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：713589