本文關(guān)鍵詞：Smad7基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外對(duì)肝星狀細(xì)胞TGF-β1信號(hào)傳導(dǎo)的影響

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【摘要】：目的:探討Smad7基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Smad7-EGFP-BMSCs)在體外抑制肝纖維化的機(jī)制。方法:分離、純化大鼠BMSCs并經(jīng)Smad7基因腺病毒質(zhì)粒(Ad-Smad7-EGFP)轉(zhuǎn)染建立Smad7-EGFP-BMSCs。實(shí)驗(yàn)將大鼠肝星狀細(xì)胞HSC-T6分為A組、B組、C組和D組,分別與Smad7-EGFP-BMSCs、BMSCs、Smad7質(zhì)粒及PBS進(jìn)行共同培養(yǎng)72 h,采用ELISA測(cè)定培養(yǎng)液中Smad7和TGF-β1的表達(dá),采用Western印跡法和RT-PCR法測(cè)定細(xì)胞Smad7、TGF-β1、ColⅠ、α-SMA蛋白和mRNA的表達(dá),采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果:(1)ELISA結(jié)果顯示,B組、C組和D組培養(yǎng)液TGF-β1蛋白水平較A組顯著降低(P0.01),而Smad7蛋白水平較A組顯著升高(P0.01);D組TGF-β1蛋白水平較B組和C組顯著降低(P0.01),而Smad7蛋白水平較B組和C組顯著升高(P0.01);(2)Western印跡法和PCR結(jié)果顯示,B組、C組和D組TGF-β1、ColⅠ和α-SMA蛋白和mRNA表達(dá)水平較A組顯著降低(P0.01),而Smad7蛋白和mRNA表達(dá)水平較A組顯著升高(P0.01);D組TGF-β1、ColⅠ、α-SMA蛋白和mRNA表達(dá)水平較B組和C組顯著降低(P0.01),而Smad7蛋白和mRNA表達(dá)水平較B組和C組顯著升高(P0.01);(3)流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,B組、C組和D組HSC-T6細(xì)胞凋亡率較A組顯著升高(P0.01),而D組細(xì)胞凋亡率較B組和C組顯著升高(P0.01)。結(jié)論:Smad7基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可通過(guò)作用肝星狀細(xì)胞TGF-β1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及促進(jìn)星狀細(xì)胞凋亡而具有抗肝纖維化的作用。
【作者單位】： 深圳市人民醫(yī)院感染內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： Smad 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 肝星狀細(xì)胞 TGF-β信號(hào)通路 細(xì)胞凋亡
【基金】：深圳市科創(chuàng)委立項(xiàng)課題(JCYJ20140416122812003)
【分類號(hào)】：R575.2
【正文快照】： 1本文為深圳市科創(chuàng)委立項(xiàng)課題(JCYJ20140416122812003)。肝硬化是各種慢性肝病發(fā)展的晚期階段,具有發(fā)病率高、治療療效差及死亡率高的特點(diǎn),我國(guó)是肝硬化的高發(fā)國(guó)家,研究肝硬化治療方法十分迫切。肝纖維化(Hepatic fibrosis,HF)是慢性肝病進(jìn)展至肝硬化的重要階段,以細(xì)胞外基質(zhì)(

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本文編號(hào)：612225