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長爪沙鼠肝星狀細胞的分離培養(yǎng)與鑒定

發(fā)布時間:2017-07-08 12:19

  本文關(guān)鍵詞:長爪沙鼠肝星狀細胞的分離培養(yǎng)與鑒定


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【摘要】:目的探索長爪沙鼠穩(wěn)定、經(jīng)濟的肝星狀細胞分離和培養(yǎng)方法,為深入探討長爪沙鼠肝纖維化的細胞機制提供技術(shù)支撐。方法取成年雄性長爪沙鼠,用鏈蛋白酶、膠原酶及DNA酶體內(nèi)門靜脈灌注消化長爪沙鼠肝臟細胞,經(jīng)Nycodenz密度梯度離心,分離肝星狀細胞。臺盼藍拒染實驗鑒定細胞活力,α-SMA,Desmin免疫細胞化學(xué)染色鑒定細胞性質(zhì)。結(jié)果肝星狀細胞得率為0.5~1×107/肝。肝星狀細胞存活率在90%以上。原代培養(yǎng)3 dα-SMA陽性細胞達75%以上,傳代培養(yǎng)后,α-SMA,Desmin陽性達100%。結(jié)論成功建立了穩(wěn)定可靠的長爪沙鼠肝星狀細胞分離培養(yǎng)方法,為肝臟相關(guān)疾病研究和防治藥物的開發(fā)提供了技術(shù)支持。
【作者單位】: 浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心浙江省實驗動物與安全性研究重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】長爪沙鼠 肝星狀細胞 細胞分離 原代培養(yǎng)
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31301933) 浙江省科技計劃項目(2013C37012,2013C37013,2014C27013)
【分類號】:R575
【正文快照】: 。肝星狀細胞(hepatic stellate cell,HSC),又稱儲脂細胞(fat-store cell,FSC)、間質(zhì)細胞和Ito細胞,主要分布于肝細胞與肝竇內(nèi)皮細胞之間的竇周隙內(nèi)(Disse間隙)[1-2]。HSC在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中具有核心作用,是促進肝纖維化發(fā)展的主要因素[3]。靜息狀態(tài)的HSC主要參與維生素A

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本文編號:534543

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