目的：隨著肥胖及其相關代謝綜合征全球化的流行趨勢,非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)在世界范圍內成為最主要的肝臟疾病之一。脂肪酸轉位酶(Fatty acid translocase, FAT/CD36)作為介導長鏈脂肪酸細胞攝取的膜糖蛋白,在FFA的跨膜轉運中起重要作用。本課題旨在觀察棕櫚酸對HepG2細胞CD36表達和翻譯后修飾的作用,并由此造成的對細胞脂質積聚產生的影響。方法：HepG2細胞用不同濃度的棕櫚酸處理。用雙熒光素酶報告基因檢測CD36啟動子活性；實時熒光定量PCR (real time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫印跡(western blot)測定CD36 mRNA和蛋白水平；多聚核糖體分析測定蛋白翻譯效率；熒光顯微鏡實時觀測細胞脂肪酸攝入；油紅O染色和游離脂肪酸(free fatty acid,FFA)測定反映胞內脂質含量。將NC-siRNA和CD36-siRNA轉入HepG2細胞中CD36的表達,比較CD36下調后對HepG2細胞內脂質積聚的影響。用定點突...

【文章頁數】：81 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３梅桐跋對ＦＡＴ／ＣＤ３６轉錄和翻譯的影響？（ｍｅａｎ±ＳＤ（ｎ備３）．?＊：Ｐ＜０．０５?ｖｓ?ＰＡ＝０ｍＭ）??Ａ：?ＦＡＴ／ＣＤ３６雇動子活性測定；Ｂ：?ｍ民ＮＡ水平測定；Ｂ：?ＦＡＴ／ＣＤ：３６蛋白表達；Ｃ：多聚板??糖體分析ＦＡＴ／ＣＤ％蛋白翻譯效率

重慶醫(yī)科大學碩±研巧生學位論文???ＡＬ?Ｂ?？Ｎ??？?ｏ??０?色?Ａ?ｆ??Ｅ?皂?２．５－１?＊??〇?８－１?＊？?工?ｏｏｎ?？下??＾ｃ＾〇６?Ｔ?Ｔ?．ＳＳ?２．０－?Ｘ?ｉ??－當吝６．?Ｔ?Ｉ?ｉ２?？?１－５－?－１－?Ｔ?ｎ??８?罷名?４．?１．０．??....

圖１．４掠桐酸對Ｈ巧Ｇ２細化內脂質積聚的巧響??Ａ：油紅?０?染色；Ｂ：細胞內?ＦＦＡ?的定量測定（ｍｅａｎ?±ＳＤ，ｎ＝４，＊：?Ｐ＜０．０５ｖｓ?Ｃｏｎｔｒｏｌ）；?Ｃ：巧光??顯微鏡動態(tài)觀察ＦＦＡ攝取??

Ｈ巧Ｇ２細胞經ＯｍＭ或０．１６ｍＭ掠擱酸處理２４小時后，正胃顯微鏡觀察油紅??０染色結果發(fā)現；與對照組相比，掠擱酸處理的Ｈ巧Ｇ２細胞內橘紅色顆粒增加，??提示肝細胞內脂質積聚增加（圖１．４圖Ａ）；同時用酶聯免疫吸附巧驗檢測ＨｅｐＧ２??細胞內ＦＦＡ含量（閣１．４閔Ｂ），結果與油紅....

圖1.6CD36siRNA干擾對“epG2細胞內脂質積策的影響

ａ?ｃ?ｃ?２??ｇ?２１．０，?Ｉ??＾－１．０－?Ｉ?１?＊??５?０?？萬?Ｉ??＾?ｗ?０．５－?＊?ｃ?２?０．５－??１玄?Ｉ?玄魚??泛星?ｏ．〇Ｊ￣ｌ￣，￣￣￣，￣￣Ｌ?（２?ｏ．ｏ＊ＬＩ＿，＿＿＿，＿＿Ｌ??ｇ?ＮＣ?ＣＤ３６ｓｉＲＮＡ?ＮＣ?ＣＤ３６?ＳｉＲＮ....

圖２．２重組質粒ＰＯ－ＣＤ３６－ＡＡ－ＳＳ－Ｈｉｓ測序峰圖??Ｆｉｇｕｒｅ２．?

?重慶醫(yī)科大學碩壬研究生學位論文???合柱中的結合膜上。繼續(xù)施Ｗ真空，至所有液體通過兩個柱子；??（８）取下藍色柱了，向白柱了中加入５ｍｌ去陽毒素洗液（Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ民ｅｍｏｖａｌ??Ｗａｓｈ），打開真空裝置使液體流過柱子；??（９）加入２０ｍｌ純化柱沈液（Ｃｏｌｕｍｎ?Ｗａ....

本文編號：4014233