目的：隨著肥胖及其相關(guān)代謝綜合征全球化的流行趨勢(shì),非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)在世界范圍內(nèi)成為最主要的肝臟疾病之一。脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(Fatty acid translocase, FAT/CD36)作為介導(dǎo)長(zhǎng)鏈脂肪酸細(xì)胞攝取的膜糖蛋白,在FFA的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中起重要作用。本課題旨在觀察棕櫚酸對(duì)HepG2細(xì)胞CD36表達(dá)和翻譯后修飾的作用,并由此造成的對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)積聚產(chǎn)生的影響。方法：HepG2細(xì)胞用不同濃度的棕櫚酸處理。用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)CD36啟動(dòng)子活性；實(shí)時(shí)熒光定量PCR (real time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫印跡(western blot)測(cè)定CD36 mRNA和蛋白水平；多聚核糖體分析測(cè)定蛋白翻譯效率；熒光顯微鏡實(shí)時(shí)觀測(cè)細(xì)胞脂肪酸攝入；油紅O染色和游離脂肪酸(free fatty acid,FFA)測(cè)定反映胞內(nèi)脂質(zhì)含量。將NC-siRNA和CD36-siRNA轉(zhuǎn)入HepG2細(xì)胞中CD36的表達(dá),比較CD36下調(diào)后對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積聚的影響。用定點(diǎn)突...

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３梅桐跋對(duì)ＦＡＴ／ＣＤ３６轉(zhuǎn)錄和翻譯的影響？（ｍｅａｎ±ＳＤ（ｎ備３）．?＊：Ｐ＜０．０５?ｖｓ?ＰＡ＝０ｍＭ）??Ａ：?ＦＡＴ／ＣＤ３６雇動(dòng)子活性測(cè)定；Ｂ：?ｍ民ＮＡ水平測(cè)定；Ｂ：?ＦＡＴ／ＣＤ：３６蛋白表達(dá)；Ｃ：多聚板??糖體分析ＦＡＴ／ＣＤ％蛋白翻譯效率

重慶醫(yī)科大學(xué)碩±研巧生學(xué)位論文???ＡＬ?Ｂ?？Ｎ??？?ｏ??０?色?Ａ?ｆ??Ｅ?皂?２．５－１?＊??〇?８－１?＊？?工?ｏｏｎ?？下??＾ｃ＾〇６?Ｔ?Ｔ?．ＳＳ?２．０－?Ｘ?ｉ??－當(dāng)吝６．?Ｔ?Ｉ?ｉ２?？?１－５－?－１－?Ｔ?ｎ??８?罷名?４．?１．０．??....

圖１．４掠桐酸對(duì)Ｈ巧Ｇ２細(xì)化內(nèi)脂質(zhì)積聚的巧響??Ａ：油紅?０?染色；Ｂ：細(xì)胞內(nèi)?ＦＦＡ?的定量測(cè)定（ｍｅａｎ?±ＳＤ，ｎ＝４，＊：?Ｐ＜０．０５ｖｓ?Ｃｏｎｔｒｏｌ）；?Ｃ：巧光??顯微鏡動(dòng)態(tài)觀察ＦＦＡ攝取??

Ｈ巧Ｇ２細(xì)胞經(jīng)ＯｍＭ或０．１６ｍＭ掠擱酸處理２４小時(shí)后，正胃顯微鏡觀察油紅??０染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)；與對(duì)照組相比，掠擱酸處理的Ｈ巧Ｇ２細(xì)胞內(nèi)橘紅色顆粒增加，??提示肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積聚增加（圖１．４圖Ａ）；同時(shí)用酶聯(lián)免疫吸附巧驗(yàn)檢測(cè)ＨｅｐＧ２??細(xì)胞內(nèi)ＦＦＡ含量（閣１．４閔Ｂ），結(jié)果與油紅....

圖1.6CD36siRNA干擾對(duì)“epG2細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積策的影響

ａ?ｃ?ｃ?２??ｇ?２１．０，?Ｉ??＾－１．０－?Ｉ?１?＊??５?０?？萬(wàn)?Ｉ??＾?ｗ?０．５－?＊?ｃ?２?０．５－??１玄?Ｉ?玄魚??泛星?ｏ．〇Ｊ￣ｌ￣，￣￣￣，￣￣Ｌ?（２?ｏ．ｏ＊ＬＩ＿，＿＿＿，＿＿Ｌ??ｇ?ＮＣ?ＣＤ３６ｓｉＲＮＡ?ＮＣ?ＣＤ３６?ＳｉＲＮ....

圖２．２重組質(zhì)粒ＰＯ－ＣＤ３６－ＡＡ－ＳＳ－Ｈｉｓ測(cè)序峰圖??Ｆｉｇｕｒｅ２．?

?重慶醫(yī)科大學(xué)碩壬研究生學(xué)位論文???合柱中的結(jié)合膜上。繼續(xù)施Ｗ真空，至所有液體通過(guò)兩個(gè)柱子；??（８）取下藍(lán)色柱了，向白柱了中加入５ｍｌ去陽(yáng)毒素洗液（Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ民ｅｍｏｖａｌ??Ｗａｓｈ），打開(kāi)真空裝置使液體流過(guò)柱子；??（９）加入２０ｍｌ純化柱沈液（Ｃｏｌｕｍｎ?Ｗａ....

本文編號(hào)：4014233