本文關(guān)鍵詞：慢性乙型肝炎肝纖維化的無創(chuàng)診斷與機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與目的:慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是一個世界性的公共健康問題(共計約四億人口)。大多數(shù)慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者均有不同程度的肝纖維化病理改變。肝纖維化作為一組慢性進展性肝損傷反應(yīng),若不及時診治,極有可能發(fā)展為肝硬化乃至肝癌。各個乙肝防治指南一致推崇顯著性肝纖維化(S≥2)作為抗病毒治療的重要指征,爭取肝纖維化是在早期肝硬化可以得到逆轉(zhuǎn)。因而,肝纖維化、肝硬化的早期診斷顯得尤為重要。肝組織活檢雖為金標準,但局限性也顯而易見。肝纖維化無創(chuàng)性診斷方法(包括Fibro Scan與血清學(xué)指標或模型)由此應(yīng)運而生,在診斷慢性乙型病毒性肝炎患者纖維化方面體現(xiàn)出一定價值。本研究擬在大樣本基礎(chǔ)上評估Fibro Scan、肝纖維化血清學(xué)模型(AAR、API、APRI、GPRI、S index、FIB-4與Fibro-Q)單獨或聯(lián)合診斷顯著性肝纖維化的診斷準確度,挑選出更適合基層社區(qū)醫(yī)院診斷肝纖維化的血清學(xué)模型,并分析炎癥活動對Fibro Scan結(jié)果的影響。同時,尋找新的與肝纖維化程度相關(guān)的血清細胞因子,評估其診斷顯著性肝纖維化的效能;進一步探索這類與纖維化相關(guān)的因子(本研究中為MIP-3α)所具有的潛在致纖維化機制。方法:第一部分:無創(chuàng)模型診斷肝纖維化價值的研究收集來我院同時行肝臟穿刺檢查、Fibro Scan與實驗室檢查的CHB患者的臨床資料與血清標本(各檢查間隔時間不超過2天)。參照2000年《病毒性肝炎防治方案》,進行肝組織的纖維化分期(S0~S4)以及炎癥分級(G0~G4),分別評估Fibro Scan、肝纖維化血清學(xué)模型(AAR、API、APRI、GPRI、S index、FIB-4與Fibro-Q)診斷顯著性肝纖維化(S≥2)的價值,并分析炎癥分級對Fibro Scan結(jié)果的影響。第二部分:肝纖維化血清標志物的篩選蛋白芯片初篩的8例患者包括CHB患者4例,CHB相關(guān)性肝硬化4例。共篩選507個因子,以期從中獲得兩組之間存在差異性表達的因子。酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassays,elisa)主要篩選2012年3月至2013年11月間第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院于兩日內(nèi)同時行肝穿刺術(shù)、fibroscan以及實驗室檢查的chb患者。研究對象分為健康志愿者、非顯著性肝纖維化者以及顯著性肝纖維化者。檢測指標包括巨噬細胞炎性蛋白-3α(mip-3α)、轉(zhuǎn)化生長因子β以及血小板衍生生長因子-bb(pdgf-bb)。第二部分:mip-3α對肝星狀細胞活性與增殖的影響采用體外培養(yǎng)人肝星狀細胞lx-2,將細胞分為空白對照組和不同濃度mip-3α共培養(yǎng)的實驗組。24小時后,運用elisa法檢測細胞培養(yǎng)上清液pdgf-bb的含量,mtt法檢測細胞增殖情況。結(jié)果:第一部分:無創(chuàng)模型診斷肝纖維化價值的研究1.fibroscan、sindex、gpri、fib-4、apri、api、fibro-q及aar診斷顯著性肝纖維化的auroc依次為0.757(p0.001)、0.726(p0.001)、0.726(p0.001)、0.621(p=0.001)、0.619(p=0.001)、0.580(p=0.033)、0.569(p=0.066)及0.495(p=0.886)。2.fibroscan聯(lián)合sindex以及gpri診斷顯著肝纖維化的auroc依次為0.753(p0.001)、0.740(p0.001)。3.fibroscan在不同炎癥分級階段(g0、g1、g2、g3、g4)診斷顯著性肝纖維化的auroc分別為0.8267(p0.001)、0.6956(p0.001)、0.7092(p=0.0012)與0.6947(p=0.137)。4.肝硬度值在非顯著性肝纖維化患者呈顯著性增加(g0vs.g1,p=0.051;g1vs.g2,p=0.005;g2vs.g3,p0.001);而在顯著性纖維化患者中,雖然肝硬度值在升高,但相鄰兩組之間并無統(tǒng)計學(xué)差異(g0vs.g1,p=0.135;g1vs.g2,p=0.294;g2vs.g3,p=0.260;g3vs.g4,p=0.056)。第二部分:肝纖維化血清標志物的篩選1.在肝硬化與非肝硬化的chb患者對比中,有下列12種蛋白因子存在顯著差異性(p0.05):β-鏈蛋白、cd27、cd163、內(nèi)皮素、人粒細胞趨化蛋白-2、白介素il-12p40、巨噬細胞游走抑制因子、組織因子途徑抑制素、尿激酶型纖溶酶原激活劑、血管內(nèi)皮生長因子以及wnt誘導(dǎo)的分泌型蛋白1。2.mip-3α具有診斷顯著性肝纖維化的作用(auroc=0.724,p0.001)。第三部分:mip-3α對肝星狀細胞活性與增殖的影響當共培養(yǎng)的MIP-3α濃度依次為0 ng/ml、250 ng/ml、500 ng/ml、1μg/ml、2μg/ml時,ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液PDGF-BB對應(yīng)的光吸收平均值分別為0.0608、0.2533、0.1112、0.0561以及0.0581;MTT法檢測細胞增殖情況,相應(yīng)的光吸收平均值分別為1.6550、0.9670、1.1319、1.1405以及1.2157。結(jié)論:1.Fibro Scan診斷慢性乙型肝炎肝纖維化準確度較高,但臨床應(yīng)用時易受肝臟炎癥活動的影響。2.較我們評估的其他血清學(xué)模型,GPRI與S index診斷顯著纖維化的效能最高,是基層醫(yī)院或無Fibro Scan時,評估CHB患者肝纖維化程度的簡單有效指標。3.肝臟炎癥分級對顯著性肝纖維化患者的肝硬度值無顯著影響,但嚴重的炎癥活動可降低Fibro Scan診斷準確度。4.血清MIP-3α水平可有效地診斷HBV相關(guān)性顯著肝纖維化。5.MIP-3α能夠激活肝星狀細胞。
【關(guān)鍵詞】：Fibro Scan 肝臟硬度值 慢性乙型肝炎 顯著性肝纖維化 無創(chuàng)模型 巨噬細胞炎性蛋白-3α 肝星狀細胞
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R512.62
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-9
• 中文摘要9-12
• 第一章 前言12-15
• 第二章 無創(chuàng)模型診斷肝纖維化價值的研究15-33
• 2.1 研究對象與方法15-19
• 2.2 研究結(jié)果19-29
• 2.3 討論29-32
• 2.4 小結(jié)32-33
• 第三章 肝纖維化血清標志物的篩選33-50
• 3.1 研究對象與方法33-42
• 3.2 研究結(jié)果42-47
• 3.3 討論47-49
• 3.4 小結(jié)49-50
• 第四章 MIP-3Α 對肝星狀細胞活性與增殖的影響50-55
• 4.1 實驗材料50-51
• 4.2 實驗方法51-52
• 4.3 實驗結(jié)果52-53
• 4.4 討論53-54
• 4.5 小結(jié)54-55
• 全文總結(jié)55-56
• 參考文獻56-64
• 文獻綜述FIBROSCAN在慢性肝病中的應(yīng)用新進展64-74
• 參考文獻69-74
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果74-75
• 致謝75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李天然;早期肝硬化定量診斷的CT研究[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2004年01期

  本文關(guān)鍵詞：慢性乙型肝炎肝纖維化的無創(chuàng)診斷與機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：298128