本文關(guān)鍵詞：一線抗結(jié)核藥物誘導(dǎo)小鼠肝損傷對(duì)肝細(xì)胞NF-κB表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究三種一線抗結(jié)核藥物(異煙肼、利福平、吡嗪酰胺)誘導(dǎo)小鼠肝損傷發(fā)生過(guò)程中NF-κB、IκB、TNF-α在肝組織中的表達(dá)情況,旨在揭示NF-κB在不同抗結(jié)核藥物致肝損傷發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的變化,對(duì)闡明不同抗結(jié)核藥物性肝損傷發(fā)生機(jī)制具有重要價(jià)值。方法SPF級(jí)昆明小鼠168只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后將所有動(dòng)物隨機(jī)分為四個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)基線組,實(shí)驗(yàn)組分別為異煙肼組(異煙肼90mg/Kg.d)、利福平組(利福平135mg/Kg.d)、吡嗪酰胺組(吡嗪酰胺315mg/Kg.d)、三藥聯(lián)合組(異煙肼+利福平+吡嗪酰胺90mg/Kg.d+135mg/Kg.d+315mg/Kg.d)。再將各實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)分成5組,為3d、5d、7d、10d、15d組,每組8只,分別在灌胃3d、5d、7d、10d、15d后處死�；�組8只鼠,在開(kāi)始灌胃之前一天處死。采用摘眼球取血法收集小鼠血液,頸椎脫臼法處死小鼠取肝組織。全自動(dòng)生化檢測(cè)儀檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量;比色法檢測(cè)肝組織中丙二醛(MDA)含量和SOD酶活力;SYBR Green實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測(cè)肝組織中NF-κB、IκB和TNF-αm RNA表達(dá)水平;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)肝組織中NF-κB、IκB和TNF-α蛋白含量。所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,時(shí)間與處理因素的效應(yīng)分析采用兩因素析因設(shè)計(jì)方差分析;單獨(dú)效應(yīng)分析時(shí),多樣本均數(shù)的比較均采用Brown-Forsythe法,Dunnett`s T3方法進(jìn)行組間兩兩比較;相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果肝組織病理學(xué)觀察和常用肝功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示:用藥3d后的組織切片即見(jiàn)病理改變,各用藥組小鼠血清ALT和AST水平顯著上升,提示造模成功。與基線組相比,各用藥組小鼠肝組織MDA含量逐漸升高,而SOD活力卻逐漸下降,兩者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;進(jìn)一步對(duì)NF-κB及其活性抑制因子IκB和炎癥相關(guān)因子TNF-α的m RNA及蛋白表達(dá)情況的分析發(fā)現(xiàn),NF-κB、IκB和TNF-α三項(xiàng)指標(biāo)m RNA的相對(duì)表達(dá)量變化與其對(duì)應(yīng)的蛋白表達(dá)也呈現(xiàn)出明顯的對(duì)應(yīng)關(guān)系。隨著用藥時(shí)間延長(zhǎng),各組NF-κB及TNF-α的m RNA和蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)一致,對(duì)小鼠肝組織NF-κB及TNF-αm RNA和蛋白表達(dá)進(jìn)行析因方差分析,不同用藥組間NF-κB及TNF-αm RNA和蛋白表達(dá)存在差異(NF-κB:F=3.110,P=0.028;F=18.551,P0.001。TNF-α:F=8.655,P0.001;F=8.218,P=0.004),不同時(shí)間點(diǎn)NF-κB及TNF-αm RNA和蛋白表達(dá)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(NF-κB:F=4.944,P0.001;F=5.920,P0.001。TNF-α:F=6.171,P0.001;F=11.807,P0.001),時(shí)間與組間存在交互效應(yīng)(NF-κB:F=1.744,P=0.047;F=4.596,P0.001。TNF-α:F=2.756,P=0.001;F=4.495,P0.001)。進(jìn)而對(duì)各組各時(shí)間點(diǎn)單獨(dú)效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn),隨灌胃時(shí)間的延長(zhǎng)異煙肼組NF-κB、TNF-αm RNA和蛋白表達(dá)逐漸升高,而利福平組、吡嗪酰胺組和三藥聯(lián)合組出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),7d、10d和15d時(shí)各用藥組NF-κB蛋白表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.840,P=0.003;F=17.746,P0.001;F=54.020,P0.001),異煙肼、利福平和吡嗪酰胺組的各時(shí)間點(diǎn)間差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.955,P=0.028;F=7.918,P0.001;F=8.793,P0.001)。7d、10d和15d時(shí)各用藥組TNF-α蛋白表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.630,P=0.029;F=10.773,P0.001;F=16.230,P0.001),各用藥組的各時(shí)間點(diǎn)間差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.334,P0.001;F=9.095,P0.001;F=3.250,P=0.019;F=6.763,P0.001);但是,各組IκB m RNA和蛋白表達(dá)與前兩者趨勢(shì)相反,對(duì)小鼠肝組織IκB m RNA表達(dá)進(jìn)行析因方差分析,不同用藥組間IκB m RNA表達(dá)存在差異(F=2.797,P=0.042),不同時(shí)間點(diǎn)IκB m RNA表達(dá)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.982,P=0.002),時(shí)間與組間不存在交互效應(yīng)(F=1.702,P=0.055)。進(jìn)行單獨(dú)效應(yīng)分析,結(jié)果表明15d時(shí)各用藥組IκB m RNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.766,P=0.026)。結(jié)論異煙肼導(dǎo)致的肝損傷發(fā)生過(guò)程中,NF-κB通路被激活,其抑制蛋白IκB下調(diào),促炎性因子TNF-α過(guò)量產(chǎn)生;而利福平和吡嗪酰胺這兩種藥物,本身具有的免疫調(diào)節(jié)作用會(huì)使NF-κB通路的激活受到抑制,三藥聯(lián)合組NF-κB活化的結(jié)果可能綜合了異煙肼的促進(jìn)作用及利福平和吡嗪酰胺的抑制作用所致。
【關(guān)鍵詞】：核因子-κB 異煙肼 利福平 吡嗪酰胺 肝損傷
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R575;R52
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-12
• 1.1 材料與方法12-19
• 1.1.1 主要材料12-13
• 1.1.2 動(dòng)物的選擇及分組13-14
• 1.1.3 小鼠一般情況觀察及標(biāo)本采集14
• 1.1.4 小鼠肝組織病理形態(tài)學(xué)觀察14
• 1.1.5 小鼠血清ALT、AST水平測(cè)定14
• 1.1.6 小鼠肝組織丙二醛含量、超氧化物歧化酶活力的測(cè)定14-17
• 1.1.7 小鼠肝組織NF-κB、IκB、TNF-α m RNA的表達(dá)水平分析17-18
• 1.1.8 小鼠肝組織NF-κB、IκB、TNF-α蛋白的表達(dá)水平檢測(cè)18
• 1.1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
• 1.2 結(jié)果19-27
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況19
• 1.2.2 肝組織病理學(xué)檢查19-20
• 1.2.3 血清中ALT、AST水平分析20-22
• 1.2.4 肝組織中MDA含量、SOD酶活力分析22-23
• 1.2.5 肝組織中NF-κB m RNA及蛋白表達(dá)情況23-24
• 1.2.6 肝組織中IκB m RNA及蛋白表達(dá)情況24-25
• 1.2.7 肝組織中TNF-α m RNA及蛋白表達(dá)情況25-26
• 1.2.8 NF-κB與氧化損傷指標(biāo)（MDA、SOD）和其相關(guān)因子IκB、TNF-α的相關(guān)性分析26-27
• 1.3 討論27-34
• 1.3.1 三種一線抗結(jié)核藥物對(duì)小鼠造成的肝損傷28-30
• 1.3.2 一線抗結(jié)核藥物導(dǎo)致的肝損傷過(guò)程中肝組織氧化損傷的情況30-31
• 1.3.3 肝組織中NF-κB、IκB m RNA及蛋白表達(dá)情況31-33
• 1.3.4 肝組織中TNF-α m RNA及蛋白表達(dá)情況33-34
• 1.4 小結(jié)34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 綜述 NF-κB通路的組成及其調(diào)控機(jī)制39-47
• 2.1 NF-κB通路的基本結(jié)構(gòu)39
• 2.2 NF-κB通路及其活化39-41
• 2.2.1 NF-κB信號(hào)通路40
• 2.2.2 NF-κB的活化40-41
• 2.3 NF-κB信號(hào)通路的調(diào)控41-42
• 2.4 TNF-α42
• 2.5 NF-κB與疾病42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 結(jié)論47-48
• 致謝48-49
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介49-50
• 作者簡(jiǎn)介50-51
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陳榮;;一線抗結(jié)核藥致肝損害分析[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2012年12期

2 查月芳;曾文;胡建軍;張廣宇;李欣;袁志芳;佟曉旭;;主要抗結(jié)核藥物肝臟毒性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)防癆雜志;2006年03期

  本文關(guān)鍵詞：一線抗結(jié)核藥物誘導(dǎo)小鼠肝損傷對(duì)肝細(xì)胞NF-κB表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：276978