本文關(guān)鍵詞：Hedgehog信號通路在大鼠急性胰腺炎中的作用及其對TNF-α、IL-10的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是臨床常見急腹癥,具有起病急、病情重、變化快等特點(diǎn),除了胰腺本身病變之外,還可能引起胰腺外器官和組織的損傷,甚至最終或可誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)、多器官功能障礙綜合征(multiple-organ dysfunction syndrome,MODS)等而導(dǎo)致死亡。目前,關(guān)于AP發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究很多,細(xì)胞內(nèi)信號通路即為其中重要的一個(gè)方面。大量研究發(fā)現(xiàn),Hedgehog(Hh)信號通路作為細(xì)胞內(nèi)信號通路的新熱點(diǎn),不僅在動(dòng)物胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化增殖、器官發(fā)育調(diào)節(jié)等生理過程中發(fā)揮著重要作用,還與許多疾病的發(fā)生發(fā)展有著直接的關(guān)系。但是,目前Hh信號通路與疾病間關(guān)系的研究大多集中在其異常激活所導(dǎo)致的惡性腫瘤疾病中,如胰腺癌、胃癌、卵巢癌等,而與炎癥性疾病的研究則相對較少。故本研究擬初步探討Hh信號通路在AP中的作用及其可能的機(jī)制。目的:本研究應(yīng)用Hh信號通路的特異性激動(dòng)劑Purmorphamine預(yù)處理大鼠AP模型,并通過監(jiān)測Hh信號通路對血清中淀粉酶(Amylase,AMY)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平的影響,初步探討Hh信號通路的激活對大鼠AP的作用,并研究其可能的機(jī)制。方法:1實(shí)驗(yàn)分組:54只清潔級成年雄性SD大鼠,體重220±20 g,隨機(jī)分為正常對照組(N組,n=18)、急性胰腺炎組(AP組,n=18)、Purmorphamine干預(yù)組(Pur組,n=18),每組再以不同時(shí)間點(diǎn)6h、12h、24h分為三個(gè)亞組,每個(gè)亞組6只大鼠。2制造模型:本研究采用L-精氨酸腹腔注射法制造大鼠AP模型。AP組給予腹腔注射20%L-精氨酸2.5 g/kg,間隔1 h注射2次,N組則給予等體積的生理鹽水腹腔注射2次。Pur組于造模前1 h給予Purmorphamine溶液0.69 mg/kg腹腔注射1次,另兩組給予等體積的DMSO溶液腹腔注射1次。最后一次腹腔注射后,分別于6 h、12 h、24 h處死各組大鼠,留取血清及胰腺組織。3實(shí)驗(yàn)方法:應(yīng)用淀粉酶試劑盒檢測血清中淀粉酶(amylase,AMY)水平,利用ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)方法檢測血清中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白細(xì)胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)測定胰腺組織中Ptch1 m RNA表達(dá)水平。4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:應(yīng)用SPSS 22.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1血清AMY:在各時(shí)間點(diǎn),N組血清AMY水平較低且無顯著變化;AP組及Pur組各時(shí)間點(diǎn)AMY水平較N組均顯著升高(P0.05),且隨時(shí)間延長而逐漸上升;與AP組相比,Pur組各時(shí)間點(diǎn)血清AMY水平則明顯下降(P0.05)。2血清TNF-α:N組血清TNF-α在各時(shí)間點(diǎn)均無顯著變化,且水平較低;與之相比,AP組和Pur組血清TNF-α水平都出現(xiàn)了明顯升高(P0.05);但Pur組與AP組相比,血清TNF-α水平則顯著降低(P0.05)。3血清IL-10:N組血清IL-10水平在各時(shí)間點(diǎn)均較低;AP組和Pur組分別與N組比較,各時(shí)間點(diǎn)血清IL-10均顯著升高(P0.05);應(yīng)用Purmorphamine干預(yù)后,Pur組血清IL-10較AP組在各時(shí)間點(diǎn)均顯著升高(P0.05)。4胰腺組織Ptch1 m RNA:在各時(shí)間點(diǎn),N組胰腺Ptch1 m RNA均未見明顯表達(dá);AP組和Pur組分別與N組比較,Ptch1 m RNA水平均顯著升高(P0.05),且隨時(shí)間呈上升趨勢;由于Purmorphamine的作用,Pur組各時(shí)間點(diǎn)Ptch1 m RNA水平較AP組均進(jìn)一步明顯升高(P0.05)。5 AP組及Pur組兩組中不同指標(biāo)間的相關(guān)性檢驗(yàn):將血清TNF-α與血清AMY進(jìn)行相關(guān)性分析,二者呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=0.704(P0.01);將血清IL-10與血清AMY進(jìn)行相關(guān)性分析,二者呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=-0.429(P0.01);將血清IL-10與血清TNF-α進(jìn)行相關(guān)性分析,二者呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=-0.463(P0.01);將胰腺組織Ptch1 m RNA與血清IL-10進(jìn)行相關(guān)性分析,二者呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)rs=0.700(P0.01);將胰腺組織Ptch1 m RNA與血清TNF-α進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果提示二者并無相關(guān)性(rs=-0.129,P=0.4540.01)。結(jié)論:1應(yīng)用L-精氨酸腹腔注射方法可成功復(fù)制大鼠AP模型,為研究Hh信號通路在大鼠AP中的作用提供了條件。2 AMY是反應(yīng)急性胰腺炎炎癥的重要指標(biāo),給予外源性Hh信號通路激動(dòng)劑Purmorphamine后,可引起大鼠AP模型血清AMY水平明顯下降,胰腺損害減輕,促進(jìn)急性胰腺炎的恢復(fù)。3 TNF-α作為關(guān)鍵性的促炎因子,在AP發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,其水平可直接反應(yīng)炎癥嚴(yán)重程度;抗炎因子IL-10則可通過降低血清AMY、抑制包括TNF-α在內(nèi)的炎癥因子等方式在AP的進(jìn)展中起保護(hù)作用。4應(yīng)用外源性Hh信號通路激動(dòng)劑Purmorphamine后,Ptch1的表達(dá)明顯升高,可作為Hh信號通路激活的標(biāo)志。在AP中,Hh信號通路的激活可引起IL-10水平明顯升高,進(jìn)而TNF-α水平顯著下降,說明Hh信號通路參與了AP的發(fā)展過程,并可能通過上調(diào)IL-10而對AP起到保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：急性胰腺炎 Hedgehog信號通路 Purmorphamine 腫瘤壞死因子-α 白細(xì)胞介素-10 Ptch1
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R576
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-21
• 結(jié)果21-23
• 附圖23-27
• 附表27-29
• 討論29-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 綜述Hedgehog信號通路與胰腺疾病38-50
• 參考文獻(xiàn)45-50
• 致謝50-51
• 個(gè)人簡歷51

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 陳婧文;湯其群;;Hedgehog信號通路與脂肪細(xì)胞發(fā)育[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2011年01期

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  本文關(guān)鍵詞：Hedgehog信號通路在大鼠急性胰腺炎中的作用及其對TNF-α、IL-10的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：270552