Th22細(xì)胞及其細(xì)胞因子白介素22在四氯化碳致肝纖維化小鼠模型中的表達(dá)和意義
發(fā)布時(shí)間:2017-03-21 23:10
本文關(guān)鍵詞:Th22細(xì)胞及其細(xì)胞因子白介素22在四氯化碳致肝纖維化小鼠模型中的表達(dá)和意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的研究Th22細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子白介素22(interleukin-22,IL-22)在四氯化碳(carbon tetrachloride,,CCl4)致肝纖維化小鼠模型中的表達(dá)和相互關(guān)系,探討它們是否參與肝纖維化的發(fā)病機(jī)制。 方法36只雄性BALB/c小鼠分為3組(按隨機(jī)數(shù)字表法):正常對(duì)照組、橄欖油對(duì)照組、肝纖維化模型組,每組12只。橄欖油對(duì)照組腹腔內(nèi)注射橄欖油,2mg/kg體重,每周2次;模型組腹腔內(nèi)注射濃度20%的CCl4(橄欖油配置),2mg/kg體重,每周2次,8周后處死各組小鼠。HE和Masson染色觀察小鼠肝臟病理改變;免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)肝臟組織中α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、IL-22的表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟IL-22+CD4+T細(xì)胞、 IL-22+IL-17-IFN-γ-T(Th22)細(xì)胞、 IL-17+CD4+T(Th17)細(xì)胞、IFN-γ+CD4+T(Th1)細(xì)胞的比例;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定外周血IL-22的含量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(RT-PCR)檢測(cè)肝組織IL-22、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、芳香烴受體(arylhydrocarbon receptor,AhR) mRNA的表達(dá)水平;并分析Th22細(xì)胞及其相關(guān)因子白介素22與肝纖維化的相關(guān)性。 結(jié)果(1)肝組織病理切片HE染色顯示:模型組肝小葉被寬窄不一的纖維間隔分割,纖維隔可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞及成纖維細(xì)胞浸潤(rùn),肝細(xì)胞索排列紊亂,條索狀纖維由匯管區(qū)伸展向肝小葉,使小葉結(jié)構(gòu)破壞。Masson染色鏡下觀察可見(jiàn)模型組肝組織匯管區(qū)、中央靜脈大量膠原纖維沉積,肝小葉被寬窄不一的纖維間隔分割,通過(guò)CCl4腹腔注射法成功建立肝纖維化小鼠模型。(2)免疫組織化學(xué)染色分析結(jié)果顯示:模型組α-SMA表達(dá)(0.38±0.09)高于正常對(duì)照組(0.07±0.03)及橄欖油對(duì)照組(0.08±0.03);模型組肝組織IL-22的表達(dá)(0.21±0.05)高于正常對(duì)照組(0.06±0.03)及橄欖油對(duì)照組(0.07±0.02),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。(3)流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示肝纖維化模型組小鼠脾臟IL-22+CD4+T細(xì)胞比例(8.59±2.00)%較正常對(duì)照組(2.40±0.57%)%及橄欖油對(duì)照組(2.27±1.21%)%明顯升高;Th22細(xì)胞比例(8.69±3.27)%較正常對(duì)照組(3.28±0.87)%及橄欖油對(duì)照組(3.12±1.56)%明顯升高;Th17細(xì)胞比例(2.02±1.06)%較正常對(duì)照組(0.62±0.28)%及橄欖油對(duì)照組(0.63±0.25%)%升高;Th1細(xì)胞比例(2.35±1.40)%較正常對(duì)照組(1.26±0.46)%及橄欖油對(duì)照組(1.25±0.52)%升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。(4)模型組外周血IL-22的含量(65.08±12.29) pg/ml明顯高于正常對(duì)照組(24.80±3.66)pg/ml及橄欖油對(duì)照組(26.62±8.62) pg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(5)模型組肝組織IL-22mRNA的表達(dá)量(3.10±0.60)高于正常對(duì)照組(1.01±0.44)及橄欖油對(duì)照組(0.99±0.24);模型組IL-6mRNA的表達(dá)量(1.90±0.47)高于正常對(duì)照組(0.57±0.16)及橄欖油對(duì)照組(0.63±0.26);模型組TNF-α mRNA的表達(dá)量(1.39±0.50)高于正常對(duì)照組(0.25±0.11)及橄欖油對(duì)照組(0.28±0.09),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組AhR mRNA的表達(dá)量(1.52±0.74)亦高于正常對(duì)照組(0.80±0.28)及橄欖油對(duì)照組(0.79±0.39),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。(6)模型組小鼠脾臟Th22細(xì)胞比例與肝臟α-SMA呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.725,P0.01),模型組小鼠脾臟Th22細(xì)胞比例與外周血IL-22水平呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.660,P0.05)。未發(fā)現(xiàn)Th17、Th1細(xì)胞比例與血漿IL-22水平有明顯相關(guān)性。 結(jié)論Th22細(xì)胞是肝纖維化模型小鼠脾臟中分泌IL-22的主要CD4+T細(xì)胞來(lái)源,Th22細(xì)胞通過(guò)分泌IL-22參與肝纖維化過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】:Th22細(xì)胞 肝纖維化 白細(xì)胞介素22
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R575.2
【目錄】:
- 中英文對(duì)照一覽表4-5
- 摘要5-7
- ABSTRACT7-11
- 前言11-14
- 材料與方法14-28
- 結(jié)果28-41
- 討論41-49
- 結(jié)論49-50
- 參考文獻(xiàn)50-55
- 綜述55-74
- 參考文獻(xiàn)67-74
- 致謝74-75
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文75
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
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2 楊智;陳洪濤;張毅;吳詩(shī)品;;IL-22和IL-17 mRNA在慢性HBV感染者PBMCs中的表達(dá)及其意義[J];世界華人消化雜志;2012年34期
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本文關(guān)鍵詞:Th22細(xì)胞及其細(xì)胞因子白介素22在四氯化碳致肝纖維化小鼠模型中的表達(dá)和意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):260455
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