本文關(guān)鍵詞：甲基阿魏酸對人肝星狀細胞的增殖抑制作用及對α-SMA和Ⅰ型膠原表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：肝纖維化（hepatic fibrosis, HF）是由多種原因引起的慢性肝損傷所致的病理改變，肝實質(zhì)發(fā)生持續(xù)或反復的炎癥壞死，肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織降解相對不足，從而引起纖維結(jié)締組織大量增生，出現(xiàn)了肝臟細胞外基質(zhì)成分過度異常地沉積的現(xiàn)象，從而形成肝纖維化，進一步發(fā)展則形成肝硬化。肝纖維化的主要病因包括病毒性肝炎、酒精中毒以及膽道梗阻等。如果能給予有效的治療，可使肝纖維化的程度減輕，使其逆轉(zhuǎn)。肝星狀細胞（Hepaticstellate cell，HSC）是形成肝纖維化的主要細胞，是細胞外基質(zhì)（Extracellularmatrix，ECM）成分的主要來源。正常情況下HSC主要儲存維生素A并少量增殖,合成少量膠原。然而，肝損傷后HSC內(nèi)維生素A消失，肝星狀細胞轉(zhuǎn)化成肌成纖維樣細胞，即活化的HSC。活化狀態(tài)的HSC能夠合成和分泌ECM，導致ECM在肝內(nèi)過量沉積，并表達α-平滑肌肌動蛋白(α-smoothmuscle actin，α-SMA)。 轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming growth factor beta1,TGF-β1)能夠促進HSC轉(zhuǎn)化為肌成纖維樣細胞，使細胞外基質(zhì)的產(chǎn)生增加和降解減少，并抑制肝細胞的再生及誘導凋亡。TGF-β1在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，被認為是目前最強的致纖維化因子。 多種原因引起的慢性肝臟疾病嚴重威脅著我國人民的健康，尋求有效的抗肝纖維化藥物是當前的研究熱點。如今，許多研究將肝星狀細胞作為抗肝纖維化的中心環(huán)節(jié)，但尚無特異的治療方法。蟬翼藤為廣西民族特色中草藥，民間常用于治療急性黃疸性肝炎等。本課題組從蟬翼藤莖皮中提取分離純化得到甲基阿魏酸(Methyl ferulic acid,MFA)，探討其在HSC活化增殖過程中的影響及其作用的分子機制。對開發(fā)抗肝纖維化新藥具有重要意義。 目的：探討MFA對人肝星狀細胞(HSC-LX2)增殖的影響，及對α-SMA和Ⅰ型膠原的mRNA及α-SMA蛋白表達的影響及其可能的作用機制。 方法：以人肝星狀細胞作為研究對象，用MTT法檢測MFA對HSC-LX2細胞增殖的影響及檢測5ng／ml的TGF-β1作用48h后，對HSC-LX2增殖的影響；將TGF-β1刺激的人肝星狀細胞制造肝纖維化的氧化應激模型，并在此基礎上應用不同劑量的MFA對各組細胞進行干預，應用RT-PCR方法檢測不同濃度的MFA對TGF-β1刺激的HSC-LX2α-SMA和Ⅰ型膠原的mRNA表達；用Western blot技術(shù)檢測不同濃度的MFA對TGF-β1刺激的HSC-LX2α-SMA蛋白的表達。 結(jié)果：①MTT檢測結(jié)果顯示，MFA作用48h后對HSC-LX2的增殖具有抑制作用(P0.05)。與正常對照組相比，TGF-β1濃度為5ng／ml時能明顯促進HSC-LX2的增殖(P0.05)。②RT-PCR檢測結(jié)果顯示，MFA作用48后能降低TGF-β1刺激的HSC-LX2α-SMA和Ⅰ型膠原mRNA的表達(P0.05)，且以低濃度MFA(5μg/ml)最為明顯，高、中劑量MFA（10μg/ml、5μg/ml）對HSC-LX2的α-SMA和Ⅰ型膠原mRNA的表達也有抑制作用(P0.05)。③Western blot技術(shù)檢測結(jié)果顯示，中、低濃度MFA(10μg/ml、5μg/ml)明顯降低HSC-LX2α-SMA蛋白的表達(P0.01)，，高劑量MFA對HSC-LX2α-SMA蛋白的表達沒有明顯的抑制作用。 結(jié)論：①甲基阿魏酸可抑制人肝星狀細胞的增殖。②甲基阿魏酸預處理TGF-β1刺激的人肝星狀細胞可下調(diào)α-SMA和Ⅰ型膠原的mRNA的表達及降低α-SMA蛋白水平，從而推斷甲基阿魏酸可以抑制HSC增殖及活化，具有抑制肝纖維化發(fā)生發(fā)展的作用。
【關(guān)鍵詞】：TGF-β 肝星狀細胞 肝纖維化 甲基阿魏酸
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R575.2
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 英漢縮略詞對照表12-14
• 前言14-16
• 1 材料與方法16-36
• 1.1 主要實驗試劑16-18
• 1.2 主要實驗儀器18
• 1.3 實驗方法18-36
• 2 結(jié)果36-42
• 2.1 MTT 的結(jié)果及分析36-37
• 2.2 MFA 對 TGF-β1刺激 HSC-LX2 α-SMAmRNA 表達的影響37-38
• 2.3 MFA 對 TGF-β1刺激 HSC-LX2 Ⅰ型膠原 mRNA 表達的影響38-40
• 2.4 MFA 對 TGF-β1刺激 HSC-LX2 α-SMA 蛋白表達的影響40-42
• 3 討論42-50
• 3.1 肝纖維化的發(fā)病機制42-44
• 3.2 TGF-β1 與肝纖維化44-45
• 3.3 甲基阿魏酸相關(guān)的藥理研究45-46
• 3.4 根據(jù)實驗結(jié)果進行討論46-50
• 4 結(jié)論50
• 參考文獻50-56
• 綜述56-71
• 參考文獻63-71
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄71
• 致謝71

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 田曉麗;楊杰;;轉(zhuǎn)化生長因子-β研究進展[J];解放軍預防醫(yī)學雜志;2006年02期

  本文關(guān)鍵詞：甲基阿魏酸對人肝星狀細胞的增殖抑制作用及對α-SMA和Ⅰ型膠原表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：259724