本文關(guān)鍵詞：Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在非酒精性脂肪肝大鼠模型中的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】 以高脂飲食建立大鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型，觀察在NAFLD發(fā)展中T輔助細(xì)胞17(the help17cells,Th17)、維甲酸相關(guān)孤兒核受體mRNA(retinoic acid-related orphan receptorγt,RORγtmRNA)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)、白介素17(Interleukin-17,IL-17)的表達(dá)情況，探討Th17及相關(guān)細(xì)胞因子在NAFLD發(fā)病機(jī)制中的免疫學(xué)作用。 【方法】 雄性SD大鼠64只，體重160±10g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后按隨機(jī)原則分為正常飲食對(duì)照組(normal diet group,NG)和高脂飲食組(fat-rich diet,FG)，每組32只。對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)，高脂組以高脂飼料喂養(yǎng)(88％普通飼料+2％膽固醇+10％豬油)。分別于實(shí)驗(yàn)第2、6、10、14周末隨機(jī)抽取兩組大鼠各8只，禁食12小時(shí)后稱(chēng)重，麻醉后下腔靜脈取血，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定AST、ALT、TG、TC。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)大鼠外周血Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例。取出肝臟并稱(chēng)其濕重，計(jì)算肝指數(shù)，觀察肝臟的顏色、質(zhì)地，取部分肝組織固定于10%的中性甲醛溶液中以備HE染色，觀察大鼠肝臟組織病理變化情況。剪取少許肝組織，用Real-time PCR檢測(cè)肝臟RORγt mRNA的表達(dá)情況。酶聯(lián)免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)血清及肝勻漿中IL-6、IL-17的含量。使用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用獨(dú)立t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)，兩因素相關(guān)性用pearson相關(guān)分析，p0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 【結(jié)果】 1、總體上，高脂組大鼠增長(zhǎng)較快。第2周末時(shí)即出現(xiàn)肝濕重、肝指數(shù)較同期正常對(duì)照組顯著升高(p值均0.000)，2組大鼠體重在第6周末顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.001)。 2、HE染色顯示對(duì)照組大鼠肝臟脂肪變及炎癥病變均為陰性，高脂組大鼠的脂肪變及炎癥程度隨造模時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸加重。高脂組在2周末出現(xiàn)1級(jí)脂肪變，以小泡性為主；第6周末小泡脂肪變繼續(xù)加重，并出現(xiàn)大泡性脂肪變，脂肪變達(dá)2-3級(jí)，且肝內(nèi)開(kāi)始出現(xiàn)炎性病灶，炎癥分級(jí)達(dá)0-1級(jí)；第10周末脂肪變及炎癥病變均加重，分別處于3-4級(jí)和2-3級(jí)；第14周末脂肪變達(dá)4級(jí)，且以大泡性為主，炎癥已達(dá)到3級(jí)。與同期正常對(duì)照組比較，，高脂組的脂肪變均有顯著差異(p分別為0.002，0.000，0.000，0.000)，炎癥在6周末時(shí)出現(xiàn)顯著差異(p分別為1.000，0.010，0.000，0.000)。 3、高脂組大鼠血清ALT、AST、TG、TC均高于同期正常對(duì)照組，TC在第2周末出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.023)， ALT在第6周末出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.046),AST、TG在第10周末出現(xiàn)顯著差異(p分別為0.001，0.000)。 4、我們觀察到高脂組血清及肝勻漿的IL-6、IL-17濃度均高于對(duì)照組。血清IL-6和IL-17水平分別在第6、10周末出現(xiàn)顯著差異(p分別為0.000，0.003)。而肝勻漿的IL-6、IL-17水平則分別在第2、6周末顯著高于對(duì)照組(p分別為0.003，0.000)。 5、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例顯示：對(duì)照組間的比例基本相同，高脂組間比例則逐漸增加。在第10周末對(duì)照組顯著低于高脂組(各時(shí)段p分別為：0.397，0.900，0.000，0.000)。 6、QRT-PCR檢測(cè)肝組織RORγt mRNA的表達(dá)：同期高脂組的表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(p分別為0.122、0.192、0.002、0.000)。 7、高脂組相關(guān)分析顯示： IL-6、IL-17的血清濃度與肝勻漿濃度成明顯正相關(guān)(r=0.921,p=0.000;r=0.877,p=0.000)；Th17細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例與細(xì)胞因子IL-6、IL-17的表達(dá)成正相關(guān)(r分別為0.824，0.734)；外周血Th17細(xì)胞和血清、肝組織中IL-6、IL-17的表達(dá)量隨著肝脂肪變(r分別為0.693，0.898，0.801)、炎癥程度(r分別為0.664，0.907，0.823)的加重而升高，其中IL-6、IL-17與肝臟病變的關(guān)系最強(qiáng)。 【結(jié)論】 1、持續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)導(dǎo)致大鼠肝臟脂肪變、肝臟炎癥持續(xù)加重，進(jìn)而形成NASH。 2、Th17、IL-17和IL-6三者間密切相關(guān)，三者與肝臟病變程度成正相關(guān)，三者可能參與了NAFLD的發(fā)生、發(fā)展且Th17細(xì)胞可能通過(guò)IL-6、IL-17等細(xì)胞因子間接推進(jìn)NAFLD的發(fā)展。 3、檢測(cè)外周血IL-6、IL-17的濃度可能有助于NAFLD的診斷和判斷其嚴(yán)重程度。
【關(guān)鍵詞】：非酒精性脂肪性肝病 大鼠 Th17細(xì)胞 IL-6 IL-17
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R575.5
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-21
• 第一節(jié)材料12-14
• 第二節(jié)方法14-21
• 結(jié)果21-37
• 討論37-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 致謝47-48
• 綜述48-55
• 參考文獻(xiàn)52-55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陸喜燕;董國(guó)慶;鐘麗華;李堅(jiān)旭;甘海瓊;龍峰;;單純性肥胖患兒非酒精性脂肪肝病與胰島素抵抗[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2012年11期

2 高占娟;胡曉娜;保志軍;;高血壓合并非酒精性脂肪肝的流行病學(xué)[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年16期

  本文關(guān)鍵詞：Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在非酒精性脂肪肝大鼠模型中的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：258189