本文關(guān)鍵詞：FTO與FoxO1在非酒精性脂肪肝中的表達(dá)及其意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景 非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是遺傳-環(huán)境-代謝應(yīng)激相關(guān)性疾病，與肥胖密切相關(guān)。FTO(fat mass and obesity associated)基因是Frayling發(fā)現(xiàn)的肥胖新基因。FTO在NAFLD中表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)肝臟細(xì)胞內(nèi)的成脂及氧化應(yīng)激。在肝臟發(fā)生胰島素抵抗時，叉頭轉(zhuǎn)錄因子O1(Forkhead BoxO1,FoxO1)的活性增加，引起糖脂代謝紊亂。然而，F(xiàn)TO與FoxO1在非酒精性脂肪肝發(fā)病過程中的關(guān)系及作用機制尚未完全闡明。本實驗旨在觀察FTO與FoxO1在非酒精性脂肪肝小鼠模型肝臟中的表達(dá)水平及組織學(xué)定位，及肝細(xì)胞脂肪變性模型中FTO mRNA、FoxO1mRNA的表達(dá)水平，并初步探討其可能的機制，期望為NAFLD的防治提供新的思路。 目的 (1)觀察非酒精性脂肪肝小鼠模型中FTO、FoxO1及AMPK的組織學(xué)定位及表達(dá)水平，并分析三者之間的相關(guān)性進(jìn)一步探討NAFLD發(fā)病的分子機制。 (2)探討FTO與FoxO1在高脂誘導(dǎo)的人肝臟細(xì)胞中的表達(dá)水平,探討二者在非酒精性脂肪肝中的作用機制。 方法 (1)用高能高脂飼料制備非酒精性脂肪肝小鼠動物模型,測肝指數(shù)；全自動生化儀檢測AST、ALT、TG、TC、ALP、HDL、LDL；HE染色進(jìn)行小鼠肝臟病理檢測；用免疫組織化學(xué)方法檢測FTO、FoxO1蛋白,AMPK的表達(dá)及組織學(xué)定位； (2)用含50%胎牛血清的培養(yǎng)基誘導(dǎo)人L02肝細(xì)胞脂肪變性模型,正常對照組用含10%胎牛血清的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，兩組分別培養(yǎng)24h、48h、72h；油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴；全自動生化儀檢測細(xì)胞上清肝酶及細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量；RT-PCR檢測不同時間點各組肝細(xì)胞內(nèi)FTOmRNA、FoxO1mRNA表達(dá)； 結(jié)果 (1)模型組小鼠與正常組小鼠在喂養(yǎng)10周末相比肝重、體重及肝指數(shù)明顯升高(P0.05)ALP、ALT、AST、LDL顯著升高（P0.01）TC、TG亦明顯增高（P0.05）HDL明顯降低（P0.05）；HE染色結(jié)果顯示模型組肝小葉內(nèi)出現(xiàn)大量脂肪變性,正常組肝小葉內(nèi)無脂肪變性；正常組FTO蛋白及FoxO1蛋白呈低分化表達(dá)，模型組FTO蛋白及FoxO1蛋白表達(dá)顯著增高（P0.01)且二者的表達(dá)具有相關(guān)性，AMPK在模型組小鼠表達(dá)下調(diào)，AMPK與FoxO1尚不存在線性相關(guān)，F(xiàn)TO與AMPK之間存在相關(guān)性。 (2)油紅O染色結(jié)果顯示含50%胎牛血清的培養(yǎng)基24h、48h、72h均能成功誘導(dǎo)肝細(xì)胞脂肪變性模型，在各個時間點模型組肝酶及TG含量均高于正常對照組且隨著時間延長含量增加；模型組FTOmRNA、FoxO1mRNA表達(dá)較對照組顯著增高（P0.01）模型組三個時間點FTOmRNA、FoxO1mRNA在48h表達(dá)水平最高（P0.05），在24h、72h表達(dá)差異不明顯（P0.05）。 結(jié)論 高脂能引起小鼠肝臟中FTO表達(dá)上調(diào)，F(xiàn)oxO1去磷酸化水平升高，AMPK磷酸化水平降低，且FTO與FoxO1共同作用與非酒精性脂肪肝發(fā)病機制密切相關(guān)。FTO與FoxO1在非酒精性脂肪肝中變化趨勢一致，提示二者可能相互作用共同參與非酒精性脂肪肝的發(fā)病過程。
【關(guān)鍵詞】：肥胖易感基因 叉頭轉(zhuǎn)錄因子 非酒精性脂肪肝 腺苷酸活化蛋白激酶
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R575.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 主要英文縮略詞表11-12
• 前言12-15
• 參考文獻(xiàn)14-15
• 第一部分 FTO 與 FoxO1 在 NAFLD 小鼠肝臟中的表達(dá)及其意義15-31
• 材料和方法15-19
• 結(jié)果19-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 第二部分 FTO 與 FoxO1 在 L02 肝細(xì)胞脂肪變性模型中的表達(dá)及其意義31-47
• 材料和方法31-39
• 結(jié)果39-44
• 討論44-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-47
• 綜述47-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 致謝59-60
• 個人簡介60

【參考文獻(xiàn)】

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1 范建高,李新建,朱軍,李銳,戴菲,宋曉敏,劉天舒,陳蘭,李鋒;上海市成人代謝綜合征與脂肪肝關(guān)系分析[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;2005年04期

  本文關(guān)鍵詞：FTO與FoxO1在非酒精性脂肪肝中的表達(dá)及其意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：258091