發(fā)布時間：2018-07-04 17:08

  本文選題：NRAGE + 缺血再灌注損傷　； 參考：《四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年04期

【摘要】：目的探討神經(jīng)生長因子受體作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog,NRAGE)是否參與腸缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)損傷的過程及其對腸上皮細胞凋亡及occludin蛋白的影響。方法制備SD大鼠小腸I/R損傷模型,取腸組織行免疫組化染色,觀察NRAGE蛋白的表達變化;體外腸上皮永生化細胞株IEC-6給予缺氧及復(fù)氧后觀察細胞NRAGE的表達變化;將NRAGE過表達慢病毒(Lv-NRAGE組)、NRAGE干擾表達慢病毒(sh-NRAGE組)及對照慢病毒(Lv-control組)感染IEC-6細胞,并設(shè)置不加慢病毒的對照組(NC組),Western blot及RT-PCR觀察各組細胞NRAGE蛋白及mRNA的表達變化,流式細胞術(shù)觀察各組IEC-6細胞的凋亡情況,Western blot觀察感染慢病毒后緊密連接蛋白occludin蛋白的表達變化。結(jié)果 I/R損傷后腸黏膜上皮細胞NRAGE表達較sham組升高(P0.01);體外IEC-6細胞缺氧6h后NRAGE蛋白的表達增加(P0.01),NRAGE mRNA表達升高(P0.01)。感染慢病毒48h后,相比于Lvcontrol組,Lv-NRAGE組早期凋亡率增加(P0.01),occludin蛋白表達降低(P0.01),sh-NRAGE組早期凋亡率降低(P0.01),occludin蛋白表達增高(P0.001)。結(jié)論 NRAGE參與了I/R損傷過程,并促進腸上皮細胞凋亡,降低occludin蛋白的表達。
[Abstract]:Objective to investigate the role of nerve growth factor receptor (NGF) receptor in the pathogenesis of neurotrophin receptor-interacting mage homologue gene (NRAGE) involved in the injury of (ischemia and reperfusionI / R and the effect of NGF receptor on apoptosis of intestinal epithelial cells and occludin protein. Methods the intestinal I / R injury model of SD rats was established, and the expression of NRAGE protein was observed by immunohistochemical staining in intestinal tissues of SD rats, and the changes of NRAGE expression in intestinal epithelial immortalized cell line IEC-6 were observed after hypoxia and reoxygenation in vitro. NRAGE overexpression lentivirus (Lv-NRAGE group) and control lentivirus (Lv-NRAGE group) were infected with IEC-6 cells. The expression of NRAGE protein and mRNA was observed by Western blot and RT-PCR in the control group (NC group). Apoptosis of IEC-6 cells in each group was observed by flow cytometry and the expression of tight junction protein (occludin) was observed by Western blot after infection with lentivirus. Results after I / R injury, the expression of NRAGE in intestinal mucosal epithelial cells was higher than that in sham group (P0.01), and the expression of NRAGE protein in IEC-6 cells was increased (P0.01) after hypoxia for 6 h (P0.01). 48 hours after infection with lentivirus, the early apoptosis rate of Lv-NRAGE group increased compared with that of Lvcontrol group (P0.01). The expression of cludin protein decreased (P0.01) in sh-NRAGE group (P0.01) and the expression of cludin protein increased (P0.001) in sh-NRAGE group. Conclusion NRAGE is involved in the process of I / R injury, promotes the apoptosis of intestinal epithelial cells and reduces the expression of occludin protein.
【作者單位】： 重慶市第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院普通外科;北京海軍總醫(yī)院普通外科;河南省信陽市明港鎮(zhèn)897醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(No.81370479)資助
【分類號】：R574

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