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《廣西醫(yī)科大學(xué)》 2012年

肝細(xì)胞生長因子影響肝星狀細(xì)胞增殖及凋亡的機制

孟云超  

【摘要】：目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)肝星狀細(xì)胞(HSCs)共培養(yǎng)體系中肝細(xì)胞生長因子激活因子(HGFA)激活肝細(xì)胞生長因子(HGF)后對HSCs增殖及凋亡的影響。 方法實驗分5組：①陰性對照組：纖維原細(xì)胞與HSCs共培養(yǎng)；②HSCs空白對照組：單純HSCs培養(yǎng)；③BMSCs空白對照組：單純BMSCs培養(yǎng)；④實驗組：HSCs與BMSCs共培養(yǎng)；⑤HGFA干預(yù)組：HGFA以70ng/ml干預(yù)HSCs。用半透膜transwell insert建立上下雙層細(xì)胞共培養(yǎng)體系,各組均培養(yǎng)24h、48h及72h,于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化；用流式細(xì)胞儀檢測BMSCs的表面抗原及HSCs的凋亡率；免疫組織化學(xué)法檢測HSCs中α-肌動蛋白(α-SMA)的表達(dá)；細(xì)胞爬片免疫熒光組織化學(xué)染色法檢測HGF的激活形式(即HGF-α鏈)；四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測HSCs的增殖率；酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa法)檢測各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HGF及HGFA的濃度。 結(jié)果①不同濃度的HGF在各時間段對HSCs增殖無抑制作用,與HSCs空白對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；HGFA在各時間段對HSCs增殖有明顯的抑制作用,且呈時間、濃度依賴性,在24hHGFA濃度為70ng/ml時抑制作用即開始較HSCs空白對照組明顯(0.26±0.00vs0.13±0.04),比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)；②在24h、48h時實驗組中HGF-α鏈的表達(dá)量(24h,48h：30.10±3.74,34.30±1.24)與HGFA干預(yù)組(24h,48h：32.74±1.72,36.47±2.07)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在72h實驗組中HGF-α鏈的表達(dá)量較HGFA干預(yù)組的低(37.24±1.03VS40.44±0.77),比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；實驗組和HGFA干預(yù)組在各時間段與各對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；③實驗組中HSCs的凋亡率在24h、48h和72h均較HGFA干預(yù)組高,在72h最顯著(40.77%±1.16%VS33.35%±2.04%),比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)；實驗組和HGFA干預(yù)組中HSCs的凋亡率在各時間段與各對照組比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)；④實驗組及HGFA干預(yù)組的細(xì)胞上清液中HGF濃度的降低呈時間依賴性,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；⑤實驗組細(xì)胞上清液中HGFA的濃度在各時間段均較各對照組高,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論BMSCs與HSCs共培養(yǎng)后促進HGFA的分泌,并激活更多的HGF使其發(fā)揮抑制HSCs增殖并促進其凋亡作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R575.2
【目錄】：

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7 金香淑;非霍奇金淋巴瘤患者血漿肝細(xì)胞生長因子水平測定及其臨床意義[D];中南大學(xué);2007年

8 凌躍新;肝細(xì)胞生長因子在胃癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

9 周偉;肝細(xì)胞增殖、凋亡與肝纖維化逆轉(zhuǎn)的關(guān)系及機制探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

10 宋麗;肝細(xì)胞生長因子在哮喘大鼠氣道內(nèi)的表達(dá)及血管緊張素受體拮抗劑的影響[D];鄭州大學(xué);2006年

  本文關(guān)鍵詞：肝細(xì)胞生長因子影響肝星狀細(xì)胞增殖及凋亡的機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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