本文關鍵詞：小劑量辣椒素對大鼠內臟機械及化學刺激敏感性的影響及機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《四川醫(yī)科大學》 2015年

小劑量辣椒素對大鼠內臟機械及化學刺激敏感性的影響及機制研究

胡容  

【摘要】：目的:通過檢測大鼠在不同時期攝食小劑量辣椒素(capsaicin,CAP),對內臟機械和化學刺激的敏感性,胃十二指腸組織內辣椒素受體(transient receptor potential vanilloid,TRPV1)的表達,胃、十二指腸粘膜屏障的變化,探討大鼠攝食小劑量辣椒素對內臟機械及化學刺激敏感性的影響及機制。方法:(1)CAP飼料的配制:50%CAP 2mg,加入到普通飼料粉100g,混勻,即得到CAP濃度為10mg/Kg的CAP飼料。(2)實驗動物及分組:SD大鼠160只,隨機分為實驗組(A組)與對照組(B組),每組80只,雌雄各半。A組攝食CAP飼料,CAP 1mg/kg/d,B組攝食普通飼料。為了探索CAP在不同時期對大鼠內臟機械和化學刺激的影響,實驗分為5期,按相應時期,A組與B組各分為5個小組,每組16只,雌雄各半。具體分期及時間:Ⅰ期:1天,實驗組(A1組):攝食CAP飼料,完成后給予普通飼料,自由進水;對照組(B1組):自由攝食進水;Ⅱ期:3天,實驗組(A2組):攝食CAP飼料,完成后給予普通飼料,自由進水;對照組(B2組):自由攝食進水;Ⅲ期,1周:實驗組(A3組):攝食CAP飼料,完成后給予普通飼料自由進水;對照組(B3組):自由攝食進水;Ⅳ期:2周,實驗組(A4組):攝食CAP飼料,完成后給予普通飼料,自由進水;對照組(B4組):自由攝食進水。Ⅴ期:4周,實驗組(A5組):攝食CAP飼料,完成后給予普通飼料,自由進水;對照組(B5組):自由攝食進水。(3)內臟機械刺激敏感性測定:采用直腸擴張試驗(rectal distention test,RDT):誘導大鼠排盡直腸內糞便,石蠟油涂抹肛周,10FR導尿管氣囊端緩慢置入大鼠直腸,膠布固定于尾部,用5ml空針緩慢向氣囊內勻速注氣,邊注氣邊觀察大鼠腹部撤離反射(abdominal withdrawal reflex,AWR),直到大鼠行為達到AWR評分的4分,結束注氣。(4)內臟化學刺激敏感性測定:采用腹腔注射新斯的明的方法:用1ml注射器向腹腔內注射濃度為60ug/ml新斯的明注射液,劑量為120ug/Kg,觀察大鼠AWR行為,記錄大鼠出現(xiàn)AWR評分3-4分的行為的開始時間及持續(xù)時間。(5)檢測指標及方法:①實驗過程中大鼠一般情況。②機械刺激的氣囊擴張體積,各組大鼠行RDT,直到大鼠行為達到AWR評分的4分。③腹腔注射新斯的明大鼠出現(xiàn)AWR評分3-4分行為的開始時間及持續(xù)時間。④胃、十二指腸組織內TRPV1的表達情況:用免疫組化方法進行TRPV1的檢測。⑤胃、十二指腸粘膜屏障的檢測:各組大鼠脫臼處死,沿胃大彎剪開胃及十二指腸后用生理鹽水將胃內容物沖洗干凈,肉眼觀察粘膜形態(tài),采用Guth標準改良評分評定胃、十二指腸粘膜損傷情況;并取距幽門約1cm處胃大彎側組織3塊,十二指腸組織3塊,送病理組織學檢查,光鏡下對HE染色后胃、十二指腸組織進行觀察。結果:(1)大鼠一般情況:實驗過程中,實驗組及對照組大鼠均精神狀態(tài)良好,行動靈活,食欲佳,皮毛光滑,大小便正常,體重增加。(2)機械刺激的氣囊擴張體積(ml):Ⅰ期、Ⅱ期實驗組與對照組之間均無顯著差異(P0.05);但A2組中雄性大鼠的氣囊擴張體積(2.24±0.13)顯著小于B2組中雄性大鼠(2.56±0.21)(P0.05)。Ⅲ期實驗組氣囊擴張體積(1.91±0.33)顯著小于對照組(2.30±0.30)(P0.05),且實驗組中雌性氣囊擴張體積顯著小于雄性(1.68±0.10 vs 2.15±0.30,P0.05)。Ⅳ期實驗組與對照組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。Ⅴ期實驗組氣囊擴張體積(2.85±0.33)顯著大于對照組(2.40±0.53)(P0.05)。(3)腹腔注射新斯的明大鼠出現(xiàn)AWR評分3-4分行為的開始時間及持續(xù)時間:①開始時間(min):Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期實驗組與對照組之間均無顯著差異(P0.05);Ⅴ期實驗組AWR評分達到3-4分的開始時間較對照組顯著延長(5.91±1.74 vs 4.49±1.53P0.05)。②持續(xù)時間(min):Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅳ期、Ⅴ期實驗組與對照組之間無顯著差異(P0.05);Ⅲ期實驗組AWR評分達到3-4分的持續(xù)時間較對照組顯著延長(6.30±3.16 vs 3.13±1.16 P0.05)。(4)胃、十二指腸TRPV1的表達結果:①胃黏膜TRPV1光密度(PI)值:Ⅰ期實驗組大鼠TRPV1的PI值(1.97±0.46)顯著高于對照組(1.60±0.25)(P0.05),Ⅱ期實驗組大鼠TRPV1的PI值(2.14±0.54)顯著高于對照組(1.63±0.51)(P0.05),Ⅲ期實驗組大鼠TRPV1的PI值(2.16±0.44)顯著高于對照組(1.65±0.43)(P0.05);Ⅳ期、Ⅴ期實驗組與對照組之間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。②十二指腸黏膜TRPV1光密度(PI)值:Ⅰ期實驗組大鼠TRPV1的PI值(1.87±0.38)顯著高于對照組(1.60±0.25)(P0.05)、Ⅱ期實驗組大鼠TRPV1的PI值(1.80±0.44)顯著高于對照組(1.61±0.31)(P0.05),Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期實驗組與對照組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(5)胃、十二指腸粘膜屏障的檢測:肉眼觀察:所有實驗組及對照組大鼠胃、十二指腸粘膜光滑,無明顯異常。病理學觀察:所有標本粘膜完整無損,絨毛排列整齊,組織結構完整,無炎性細胞浸潤。結論:1.大鼠攝入小劑量CAP連續(xù)1周對內臟機械刺激的敏感性顯著增加,連續(xù)2周敏感性逐漸恢復至正常,連續(xù)4周敏感性顯著降低。2.大鼠攝入小劑量CAP連續(xù)1周對內臟化學刺激的敏感性顯著增加,連續(xù)4周,敏感性顯著降低。3.雌性大鼠對內臟機械刺激較雄性大鼠更為敏感。4.攝入小劑量CAP(1mg/kg/d)從1天到4周,大鼠胃、十二指腸粘膜屏障均無明顯影響。5.大鼠攝入小劑量CAP可以調節(jié)胃、十二指腸組織TRPV1的表達,可能與大鼠機械和化學刺激敏感性的變化有相關性。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R57
【目錄】：

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