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淺議靶向COX-2的shRNA對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表達(dá)的影響-碩士論文

文章導(dǎo)讀：胞(HSC-T6)，最后在熒光顯微鏡下評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。3、利用RT-PCR技術(shù)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染24h,48h,72h后各組Ccl2, Phlda3, Aldoc,Car9mRNA的表達(dá)情況。4、對(duì)照前期基因芯片結(jié)果對(duì)比分析各基因的表達(dá)情況。結(jié)果1、熒光顯微鏡下可見，COX-2shRNA1在轉(zhuǎn)染大鼠HSC24h,48h及72h后，細(xì)胞質(zhì)中見綠色熒光，各組轉(zhuǎn)染效率有所差異。2、不同組別大鼠肝星

論文正文

摘要：目的研究靶向COX-2的shRNA對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡、脂質(zhì)代謝相關(guān)基因Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9表達(dá)的影響，同時(shí)驗(yàn)證前期基因芯片結(jié)果。方法1、實(shí)驗(yàn)分為三組：空白對(duì)照組、HK空載體組、COX-2shRNA1實(shí)驗(yàn)組。2、利用構(gòu)建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1，然后將其轉(zhuǎn)染至大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)，最后在熒光顯微鏡下評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。3、利用RT-PCR技術(shù)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染24h,48h,72h后各組Ccl2, Phlda3, Aldoc,Car9mRNA的表達(dá)情況。4、對(duì)照前期基因芯片結(jié)果對(duì)比分析各基因的表達(dá)情況。結(jié)果1、熒光顯微鏡下可見，COX-2shRNA1在轉(zhuǎn)染大鼠HSC24h,48h及72h后，細(xì)胞質(zhì)中見綠色熒光，各組轉(zhuǎn)染效率有所差異。2、不同組別大鼠肝星狀細(xì)胞COX-2表達(dá)情況：在轉(zhuǎn)染24h,48h及72h后，COX-2mRNA在COX-2shRNA1組中的表達(dá)低于空白組和空載體組(P0.05)，，其中以COX-2shRNA1在轉(zhuǎn)染后72h最明顯。3、不同組別大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)情況：在轉(zhuǎn)染24h,48h及72h后，COX-2shRNA1組中凋亡相關(guān)基因Ccl2表達(dá)下降、Phlda3表達(dá)上升(P0.05)，且以72h最明顯，空白組及空載體組表達(dá)無(wú)明顯差異。4、不同組別大鼠肝星狀細(xì)胞脂代謝相關(guān)基因表達(dá)情況：在轉(zhuǎn)染24h,48h及72h后，COX-2shRNA1組中脂代謝相關(guān)基因Aldoc, Car9表達(dá)下降(P0.05)，且以72h最明顯，空白組及空載體組表達(dá)無(wú)明顯差異。5、對(duì)照基因芯片結(jié)果可知，Phlda3, Aldoc, Car9在本實(shí)驗(yàn)中表達(dá)情況與基因芯片結(jié)果一致，而Ccl2的表達(dá)情況與基因芯片結(jié)果相反。結(jié)論1、靶向COX-2的shRNA可以沉默大鼠肝星狀細(xì)胞COX-2的表達(dá)。2、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后，可促進(jìn)肝星狀細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Phlda3表達(dá)。3、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后，可抑制肝星狀細(xì)胞脂代謝相關(guān)基因Aldoc、Car9表達(dá)。4、靶向COX-2的shRNA可能通過(guò)調(diào)節(jié)Phlda3、Aldoc、Car9的表達(dá)來(lái)促進(jìn)HSC凋亡。 關(guān)鍵詞：環(huán)氧化酶2 shRNA 肝星狀細(xì)胞 Ccl2 Phlda3 Aldoc Car9
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精彩回放：供,需要代寫論文可以聯(lián)系客服人員哦。                                          主要英文縮略語(yǔ)索引4-5中文摘要5-7Abstract7-9前言9-13材料與方法13-221 實(shí)驗(yàn)材料13-152 實(shí)驗(yàn)方法15-213.轉(zhuǎn)染圖片的分析及統(tǒng)計(jì)結(jié)果的處理21-22實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-331. COX-2shRNA1 的轉(zhuǎn)染效率22-242. RT-PCR檢測(cè)肝星狀細(xì)胞 COX-2 的表達(dá)水平24-253.

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本文編號(hào)：172107