淺議靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表達的影響-碩士論文
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淺議靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表達的影響-碩士論文
論文正文
摘要:目的研究靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細胞凋亡、脂質代謝相關基因Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9表達的影響,同時驗證前期基因芯片結果。方法1、實驗分為三組:空白對照組、HK空載體組、COX-2shRNA1實驗組。2、利用構建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1,然后將其轉染至大鼠肝星狀細胞(HSC-T6),最后在熒光顯微鏡下評估轉染效率。3、利用RT-PCR技術分別檢測轉染24h,48h,72h后各組Ccl2, Phlda3, Aldoc,Car9mRNA的表達情況。4、對照前期基因芯片結果對比分析各基因的表達情況。結果1、熒光顯微鏡下可見,COX-2shRNA1在轉染大鼠HSC24h,48h及72h后,細胞質中見綠色熒光,各組轉染效率有所差異。2、不同組別大鼠肝星狀細胞COX-2表達情況:在轉染24h,48h及72h后,COX-2mRNA在COX-2shRNA1組中的表達低于空白組和空載體組(P0.05),,其中以COX-2shRNA1在轉染后72h最明顯。3、不同組別大鼠肝星狀細胞凋亡相關基因表達情況:在轉染24h,48h及72h后,COX-2shRNA1組中凋亡相關基因Ccl2表達下降、Phlda3表達上升(P0.05),且以72h最明顯,空白組及空載體組表達無明顯差異。4、不同組別大鼠肝星狀細胞脂代謝相關基因表達情況:在轉染24h,48h及72h后,COX-2shRNA1組中脂代謝相關基因Aldoc, Car9表達下降(P0.05),且以72h最明顯,空白組及空載體組表達無明顯差異。5、對照基因芯片結果可知,Phlda3, Aldoc, Car9在本實驗中表達情況與基因芯片結果一致,而Ccl2的表達情況與基因芯片結果相反。結論1、靶向COX-2的shRNA可以沉默大鼠肝星狀細胞COX-2的表達。2、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后,可促進肝星狀細胞凋亡相關基因Phlda3表達。3、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后,可抑制肝星狀細胞脂代謝相關基因Aldoc、Car9表達。4、靶向COX-2的shRNA可能通過調節(jié)Phlda3、Aldoc、Car9的表達來促進HSC凋亡。
關鍵詞:環(huán)氧化酶2 shRNA 肝星狀細胞 Ccl2 Phlda3 Aldoc Car9
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精彩回放:供,需要代寫論文可以聯(lián)系客服人員哦。 主要英文縮略語索引4-5中文摘要5-7Abstract7-9前言9-13材料與方法13-221 實驗材料13-152 實驗方法15-213.轉染圖片的分析及統(tǒng)計結果的處理21-22實驗結果22-331. COX-2shRNA1 的轉染效率22-242. RT-PCR檢測肝星狀細胞 COX-2 的表達水平24-253.
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本文編號:172107
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