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淺談環(huán)氧細(xì)胞靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細(xì)胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表達(dá)的影響論文標(biāo)準(zhǔn)

發(fā)布時間:2016-11-12 14:02

  本文關(guān)鍵詞:靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細(xì)胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


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淺談環(huán)氧細(xì)胞靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細(xì)胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表達(dá)的影響論文標(biāo)準(zhǔn)格式

摘要:目的探討靶向COX-2的shRNA對大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡、脂質(zhì)代謝相關(guān)基因Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9表達(dá)的影響,同時驗證前期基因芯片結(jié)果。辦法1、實驗分為三組:空白對照組、HK空載體組、COX-2shRNA1實驗組。2、使用構(gòu)建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1,然后將其轉(zhuǎn)染至大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC-T6),最后在熒光顯微鏡下評估轉(zhuǎn)染效率。3、使用RT-PCR技術(shù)分別檢測轉(zhuǎn)染24h,48h,72h后各組Ccl2, Phlda3, Aldoc,Car9mRNA的表達(dá)狀況。4、對照前期基因芯片結(jié)果比較分析各基因的表達(dá)狀況。結(jié)果1、熒光顯微鏡下可見,COX-2shRNA1在轉(zhuǎn)染大鼠HSC24h,48h及72h后,細(xì)胞質(zhì)中見綠色熒光,各組轉(zhuǎn)染效率有所差別。2、不同組別大鼠肝星狀細(xì)胞COX-2表達(dá)狀況:在轉(zhuǎn)染24h,48h及72h后,COX-2mRNA在COX-2shRNA1組中的表達(dá)低于空白組和空載體組(P0.05),其中從COX-2shRNA1在轉(zhuǎn)染后72h最顯著。3、不同組別大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)狀況:在轉(zhuǎn)染24h,48h及72h后,COX-2shRNA1組中凋亡相關(guān)基因Ccl2表達(dá)下降、Phlda3表達(dá)上升(P0.05),且從72h最顯著,空白組及空載體組表達(dá)無顯著差別。4、不同組別大鼠肝星狀細(xì)胞脂代謝相關(guān)基因表達(dá)狀況:在轉(zhuǎn)染24h,48h及72h后,COX-2shRNA1組中脂代謝相關(guān)基因Aldoc, Car9表達(dá)下降(P0.05),且從72h最顯著,,空白組及空載體組表達(dá)無顯著差別。5、對照基因芯片結(jié)果可知,Phlda3, Aldoc, Car9在本實驗中表達(dá)狀況與基因芯片結(jié)果一致,而Ccl2的表達(dá)狀況與基因芯片結(jié)果相反。結(jié)論1、靶向COX-2的shRNA可從沉默大鼠肝星狀細(xì)胞COX-2的表達(dá)。2、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后,可推動肝星狀細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Phlda3表達(dá)。3、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后,可抑制肝星狀細(xì)胞脂代謝相關(guān)基因Aldoc、Car9表達(dá)。4、靶向COX-2的shRNA可能通過調(diào)節(jié)Phlda3、Aldoc、Car9的表達(dá)來推動HS源于

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    本文編號:172106

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