目的:研究1,25-二羥維生素D3誘導(dǎo)人喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡及其對(duì)PI3K/AKT/Bcl-2信號(hào)通路的影響。方法:用不同劑量(10-8、10-7、10-6 mol/L)1,25-二羥維生素D3處理Hep-2細(xì)胞24、48、72 h,四甲基偶氮唑藍(lán)法(MTT)檢測(cè)Hep-2細(xì)胞的增殖情況,計(jì)算抑制率。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Hep-2細(xì)胞的凋亡率。Western blot檢測(cè)用藥前后細(xì)胞中PI3K、AKT及其磷酸化、Bax和Bcl-2蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:MTT結(jié)果顯示,1,25-二羥維生素D3可以抑制Hep-2細(xì)胞增殖(P<0.05),1,25-二羥維生素D3濃度為10-6 mol/L抑制率可達(dá)30.71%,在上述濃度內(nèi)隨著濃度增加和時(shí)間延長(zhǎng),抑制作用逐漸增強(qiáng),呈時(shí)間-劑量依賴(lài)性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)到10-8、10-7、10-6 mol/L 1,25-二羥維生素D3作用48 h后,Hep-2凋亡細(xì)胞比例顯著增加,凋亡率分別為12.13%、14.05%、16.17%,高于空白對(duì)照組的6.82%(P<0.05)。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示1,25-二羥維生素D3處理48 h后,...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和藥物處理
        1.2.2 MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制效應(yīng)
        1.2.3流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.2.4 電鏡觀察INS-1細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化
        1.2.5 Western blot檢測(cè)PI3K、AKT、p-AKT、Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 1, 25-二羥維生素D3對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖的影響
    2.2 流式細(xì)胞儀分析1, 25-二羥維生素D3對(duì)Hep-2細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 電鏡觀察1, 25-二羥維生素D3對(duì)Hep-2細(xì)胞凋亡的影響
    2.4 1, 25-二羥維生素D3對(duì)Hep-2細(xì)胞PI3K/AKT/Bcl-2蛋白表達(dá)的影響
3 討論



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