背景:臨床的長期觀察表明角膜損傷(創(chuàng)傷,化學(xué)傷,手術(shù)損傷等)通�？梢鸹颊甙l(fā)生難治性的視網(wǎng)膜炎,并伴有類似青光眼的不可逆視神經(jīng)損害,對患眼傷后(或術(shù)后)的視力恢復(fù)產(chǎn)生不良影響,嚴(yán)重者可因視網(wǎng)膜及視神經(jīng)損害導(dǎo)致失明。近期有研究表明腫瘤壞死因子家族及白介素家族的細(xì)胞因子可能參與了角膜損傷相關(guān)視網(wǎng)膜炎癥的發(fā)生與發(fā)展過程,但目前角膜損傷后相關(guān)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量丟失及視網(wǎng)膜炎性細(xì)胞浸潤的具體機(jī)制尚不明確,也沒有防治此類視網(wǎng)膜損害的有效方法。目的:本研究擬通過建立四種不同的角膜損傷模型,探究角膜損傷過程中免疫細(xì)胞參與視網(wǎng)膜炎性反應(yīng)的作用;證實(shí)角膜損傷后視網(wǎng)膜組織中出現(xiàn)巨噬/小膠質(zhì)細(xì)胞及炎性因子的作用機(jī)制;觀察不同的治療方案對視網(wǎng)膜炎性反應(yīng)的抑制及神經(jīng)保護(hù)作用,為臨床治療提供新的思路。方法:1.建立四種不同的角膜急性損傷模型,所有組別均選用C57BL/6小鼠進(jìn)行NaOH角膜化學(xué)燒傷,單根角膜縫線,同種同體穿透性角膜移植術(shù),自同種同體穿透性角膜移植聯(lián)合晶狀體摘除術(shù)處理。2.在不同時(shí)間點(diǎn)收集角膜及視網(wǎng)膜標(biāo)本進(jìn)行qPCR,流式細(xì)胞術(shù),TUNEL及激光共聚焦顯微鏡檢測,觀察炎性細(xì)胞因子的表達(dá)情況。3.制備骨髓...

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．?（Ａ）小鼠單側(cè)角膜堿燒傷祺型觀察角膜／視網(wǎng)膜炎性因子的表達(dá)及炎性細(xì)胞的授潤

ＴｈｌＴｈｌ７毒性活性物質(zhì)同時(shí)會引發(fā)大量的側(cè)支組織損傷，如果不能迅速控制炎性單核－巨噬??細(xì)胞的進(jìn)一步活動，可能會導(dǎo)致病理性轉(zhuǎn)歸并引起疾病的進(jìn)展甚至惡化，這一現(xiàn)象??在許多慢性炎癥和自身免疫性疾病中甚為常見［２０，?２１］。??在炎性反應(yīng)中，具有同一祖源的單核－巨噬細(xì)胞（存在于外....

圖１．小鼠角膜堿燒傷后２４小時(shí)炎性細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào)情況

（Ｘ表達(dá)明顯上調(diào)，ＮａＯＨ組平均值較對照組平均值升高６７．５倍；視網(wǎng)膜組織的ＩＬ－??Ｐ表達(dá)顯著性上調(diào)，ＮａＯＨ組平均值較對照組平均值升高１９５倍；視網(wǎng)膜組織的??ＮａＯＨ燒傷前后ＭＭＰ－９均呈現(xiàn)微量表達(dá)，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見圖１?（Ｂ）。??（Ａ）?Ｃｏｒｎｅａ，?２４Ｈ?....

圖２．小鼠角膜堿燒傷前后ＣＤ４５＋ＣＤｌｌｂ＋炎性細(xì)胞及ＣＸ３ＣＲ１＋單核－巨噬細(xì)胞所占比例變化

??證明單核－巨噬細(xì)胞在全部炎性細(xì)胞中所占比例顯著增多（ｐ＜０．０１），詳見圖２（Ｄ）。??（Ａ）?Ｃｏｒｎｅａ，?２４Ｈ??（Ｂ）?ｃ〇ｒｎｅａ??Ｓｈａｍ?ＮａＯＨ??ｃ〇４５＊ｃｏｎ?ｂｒｅｅｄｓ??ＣＤ４５?側(cè)ｂ．?ＣＤＡＳ＾ＣＯＵｂ－?｜?１。勹??＿巧＿＿?—＾一￣！....

圖３．小鼠角膜堿燒傷前后視網(wǎng)膜組織ＣＤ４５＋ＣＤｌｌｂ＋炎性細(xì)胞的比例及分群分析

??并且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｐ＜０．０５），詳見圖３?（Ｂ）。此結(jié)果提示視網(wǎng)膜在角膜堿燒傷??后２４小時(shí)確實(shí)受到了影響并出現(xiàn)了炎性細(xì)胞的浸潤現(xiàn)象。我們再對圖３?（Ａ）進(jìn)行??具體分析，可見細(xì)胞明顯分為兩群，分別為ＣＤ４５高表達(dá)的ＣＤ４５ｈｉＣＤｌｌｂ＋炎性細(xì)??胞以及ＣＤ４５低表達(dá)的....

本文編號：4021858