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MiR-200b通過調(diào)控PIK3CA/AKT通路抑制大鼠角膜血管新生

發(fā)布時(shí)間:2021-04-10 01:55
  目的探討microRNA-200b(miR-200b)在大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization, CNV)形成中的作用及其調(diào)節(jié)機(jī)制。方法 24只雌性SD大鼠采用一眼經(jīng)縫線法構(gòu)建CNV模型(實(shí)驗(yàn)組),另一眼作為正常對照組,于裂隙燈下觀察建模后第4、7、14天角膜新生血管情況,采用HE染色觀察角膜組織結(jié)構(gòu)改變及炎性細(xì)胞浸潤情況,RT-PCR檢測造模后第14天各組大鼠角膜組織中miR-200b以及血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的表達(dá)。利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs),分為miR-200b模擬物(miR-200b mimic)組、陰性對照(miR-NC)組、空白對照(CON)組,利用RT-PCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效果,分別采用CCK-8檢測HUVECs增殖能力,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測HUVECs遷移能力,Matrigel膠成管實(shí)驗(yàn)檢測HUVECs管腔形成能力。并通過Western blot檢測VEGF及PIK3CA、AK... 

【文章來源】:第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

MiR-200b通過調(diào)控PIK3CA/AKT通路抑制大鼠角膜血管新生


縫線法構(gòu)建大鼠CNV模型 (×20)

縫線,角膜,觀察角,形態(tài)學(xué)


取正常和縫線后第14天角膜組織,采用RT-PCR檢測miR-200b/VEGF的表達(dá),結(jié)果顯示:縫線后第14天,角膜組織中miR-200b表達(dá)明顯降低,而VEGF表達(dá)明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,圖3)。圖3 RT-PCR檢測miRNA-200b、VEGF在兩組大鼠CNV 中的表達(dá)

MiR-200b通過調(diào)控PIK3CA/AKT通路抑制大鼠角膜血管新生


RT-PCR檢測miRNA-200b、VEGF在兩組大鼠CNV 中的表達(dá)


本文編號:3128724

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