目的:結(jié)合長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA,lnc RNA）芯片及生物信息學(xué)方法,探索沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1（Sirtuin 1,SIRT1）對人小梁網(wǎng)細(xì)胞（human trabecular meshwork cells,HTMCs）細(xì)胞外基質(zhì)的可能分子調(diào)控機制,以篩選出青光眼的潛在治療靶點。方法:1.構(gòu)建SIRT1過表達(dá)慢病毒,檢測其HTMCs的最佳感染復(fù)數(shù)（multiplicity of infection,MOI）,將SIRT1過表達(dá)慢病毒和陰性對照慢病毒按照最佳MOI分別感染HTMCs后,進(jìn)行l(wèi)nc RNA芯片檢測。2.SIRT1激動劑-白藜蘆醇（resveratrol,RSV）和溶劑對照二甲基亞砜（dimethylsulfoxide,DMSO）分別處理HTMCs,進(jìn)行l(wèi)nc RNA芯片檢測。3.對差異性lnc RNAs進(jìn)行信息學(xué)分析,用實時定量PCR驗證差異性lnc RNAs。4.檢測氧化應(yīng)激下HTMCs細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）表達(dá)的影響5.分別檢測氧化應(yīng)激下RSV對HTMCs中纖維連接蛋白（... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CCK8實驗檢測不同濃度RSV對HTMCs細(xì)胞活性的影響

μMRSV刺激HTMCs12h后SIRT1的表達(dá)

即以MOI=10進(jìn)行后續(xù)的細(xì)胞模型構(gòu)建（圖3）：SIRT1過表達(dá)慢病毒感染HTMCs為實驗組（SIRT1過表達(dá)組），GFP陰性對照慢病毒感染HTMCs為對照組（GFP組）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白藜蘆醇對H2O2及TGF-β2誘導(dǎo)人小梁網(wǎng)細(xì)胞的影響及機制探討[J]. 齊艷,趙秀娟,徐琳琪,吳旭東,汪建濤.  天津醫(yī)藥. 2016(08)
[2]SIRT1增強青光眼小梁網(wǎng)細(xì)胞DSBs修復(fù)能力及抗細(xì)胞衰老的研究[J]. 任朋亮,范雪嬌,楊曉龍,劉明佳,劉戟,黃晶晶.  四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2014(04)



本文編號：2981056