本文關(guān)鍵詞：二亞硝基哌嗪（DNP）誘導(dǎo)AGR2基因表達(dá)參與鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本文分析二亞硝基哌嗪(N,N’-Dinitrosopiperazine,DNP)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和AGR2(Anterior gradient 2)、CTSB(Cathepsin B)和CTSD(Cathepsin D)基因表達(dá)的影響,探討DNP調(diào)控AGR2、CTSB和CTSD表達(dá)參與鼻咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。方法:1.以低轉(zhuǎn)移潛能鼻咽癌細(xì)胞6-10B和高轉(zhuǎn)移潛力鼻咽癌細(xì)胞5-8F作為實(shí)驗(yàn)材料。用DNP(100μM)處理鼻咽癌細(xì)胞6-10B,以0.1%DMSO(DNP溶劑)處理細(xì)胞作為對(duì)照,檢測(cè)細(xì)胞侵襲遷移能力。2.采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)分析DNP對(duì)6-10B細(xì)胞遷移能力的影響。3.采用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DNP處理鼻咽癌細(xì)胞6-10B后,細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。4.采用Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)DNP處理鼻咽癌細(xì)胞6-10B細(xì)胞AGR2、CTSB和CTSD基因的表達(dá)。5.采用SPSS13.0分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.劃痕實(shí)驗(yàn)分析DNP處理鼻咽癌細(xì)胞6-10B遷移能力,結(jié)果顯示DNP處理組細(xì)胞遷移至中央劃痕區(qū)的數(shù)量明顯多于對(duì)照組,細(xì)胞遷移能力顯著增強(qiáng)。2.Transwell實(shí)驗(yàn)分析DNP對(duì)鼻咽癌細(xì)胞6-10B侵襲轉(zhuǎn)移能力,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示DNP處理組鼻咽癌6-10B細(xì)胞24h內(nèi)穿過(guò)濾過(guò)膜細(xì)胞數(shù)顯著多于對(duì)照組細(xì)胞,6-10B細(xì)胞遷移和侵襲能力顯著增強(qiáng)。3.Real-time PCR分析DNP處理6-10B細(xì)胞AGR2、CTSB和CTSD基因表達(dá),結(jié)果顯示DNP處理6-10B細(xì)胞AGR2、CTSB和CTSD基因相對(duì)表達(dá)量分別為1.54±0.06(P0.05),0.80±0.07(P0.05)和0.84±0.10(P0.05);高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞5-8F AGR2、CTSB和CTSD基因相對(duì)表達(dá)量分別為1.93±0.52(P0.05),1.39±0.25(P0.05)和1.32±0.11(P0.05)。DNP處理組AGR2基因表達(dá)顯著高于對(duì)照組,而DNP處理6-10B細(xì)胞對(duì)CTSB和CTSD基因表達(dá)無(wú)明顯影響。高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞5-8F AGR2基因表達(dá)顯著高于低轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞6-10B。結(jié)論:鼻咽癌細(xì)胞AGR2基因高表達(dá)與鼻咽癌轉(zhuǎn)移能力有關(guān),DNP誘導(dǎo)AGR2基因轉(zhuǎn)錄可能是鼻咽癌高轉(zhuǎn)移重要因素之一。DNP處理對(duì)CTSB與CTSD基因轉(zhuǎn)錄無(wú)明顯影響。
【關(guān)鍵詞】：DNP 鼻咽癌 AGR2 CTSB CTSB
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R739.63
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 第一章 前言9-13
• 1 鼻咽癌概述9-10
• 2 AGR2概述10-13
• 第二章 技術(shù)路線(xiàn)13-14
• 第三章 實(shí)驗(yàn)材料14-18
• 3.1 細(xì)胞株14
• 3.2 化學(xué)致癌物DNP14
• 3.3 實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 3.4 實(shí)驗(yàn)耗材15
• 3.5 儀器與設(shè)備15-16
• 3.6 引物、探針序列16-17
• 3.7 試劑配制17-18
• 第四章 實(shí)驗(yàn)方法18-25
• 4.1 細(xì)胞培養(yǎng)18-19
• 4.1.1 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作18
• 4.1.2 細(xì)胞復(fù)蘇18
• 4.1.3 細(xì)胞傳代18-19
• 4.1.4 細(xì)胞凍存19
• 4.1.5 實(shí)驗(yàn)分組19
• 4.2 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)19-20
• 4.2.1 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)原理19
• 4.2.2 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)步驟19-20
• 4.3 Transwell實(shí)驗(yàn)20-21
• 4.3.1 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)20-21
• 4.3.2 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)21
• 4.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR21-24
• 4.4.1 從待檢細(xì)胞中抽提細(xì)胞總RNA21-22
• 4.4.2 RNA濃度和純度測(cè)定22-23
• 4.4.3 逆轉(zhuǎn)錄生成c DNA模板23
• 4.4.4 Real-time PCR23-24
• 4.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理24-25
• 第五章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-30
• 5.1 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-26
• 5.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)26
• 5.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)26-27
• 5.4 Real-time PCR結(jié)果27-30
• 第六章 討論30-35
• 6.1 鼻咽癌臨床特征30
• 6.2 鼻咽癌轉(zhuǎn)移機(jī)制30-32
• 6.3 AGR2、CTSB和CTSD與腫瘤轉(zhuǎn)移32-33
• 6.4 DNP促進(jìn)鼻咽癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制33-35
• 第七章 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-42
• 縮略詞表42-44
• 綜述 MICAL家族與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移44-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 在校期間已發(fā)表學(xué)術(shù)論文53-54
• 致謝54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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  本文關(guān)鍵詞：二亞硝基哌嗪（DNP）誘導(dǎo)AGR2基因表達(dá)參與鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：281968