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IL-37在小鼠變應(yīng)性鼻炎中的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2020-07-13 16:44
【摘要】:目的:體內(nèi)評價白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)-37干預(yù)對小鼠變應(yīng)性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸的影響,進(jìn)一步研究IL-37對CD4+Th亞群細(xì)胞增殖、分化和功能的影響,最后探討可能的作用機(jī)制。方法:使用OVA誘導(dǎo)建立小鼠變應(yīng)性鼻炎模型,分成正常對照組、OVA對照組和IL-37干預(yù)組。在最后一次激發(fā)結(jié)束后10分鐘觀察小鼠行為學(xué)改變,記錄打噴嚏和撓癢次數(shù)。24小時內(nèi)處死小鼠并收集標(biāo)本,收集小鼠外周血分離上清,采用ELISA檢測血清總Ig E和Th亞群效應(yīng)因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-17a)水平;分離小鼠脾細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測Th1(CD4+INF-γ+T細(xì)胞)、Th2(CD4+IL-4+T細(xì)胞)、Th17(CD4+IL-17+T細(xì)胞)、Treg(CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞)的表達(dá);分離鼻黏膜,采用HE染色,計數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞,采用Real-time PCR檢測Th關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3、Foxp3、RORγt、STAT3和STAT6,采用Western blot檢測調(diào)節(jié)Th亞群信號蛋白STAT3、STAT6、p STAT3和p STAT6的表達(dá)。結(jié)果:通過建立AR動物模型,觀察到IL-37干預(yù)后的AR小鼠噴嚏數(shù)及搔抓次數(shù),嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量,血清總Ig E及Th2和Th17相關(guān)的IL-4、IL-5、IL-6和IL-17a水平,CD4+IL-4+、CD4+IL-17+T細(xì)胞的比例,GATA3、RORγt及STAT3、STAT6蛋白磷酸化水平均低于OVA對照組(P0.05),而Th1及Treg的增殖與分化(CD4+INF-γ+T細(xì)胞和CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞)、相關(guān)的效應(yīng)因子(IFN-γ和IL-10)和關(guān)鍵核轉(zhuǎn)錄因子(T-bet和Foxp3)的表達(dá)水平三組之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論:IL-37能有效緩解小鼠的過敏進(jìn)程,可以通過調(diào)控STAT3及STAT6信號途徑,下調(diào)Th2及Th17相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá),從而抑制Th2及Th17細(xì)胞的分化與功能,參與AR的免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)控。
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R765.21
【圖文】:

示意圖,變應(yīng)性鼻炎,小鼠,行為學(xué)觀察


圖 1.1 BALB/c 小鼠變應(yīng)性鼻炎造模及 IL-37 干預(yù)示意圖ig 1.1 the allergic rhinitis models of BALB/c mice and IL-37 intervention proto(OVA: 卵清蛋白,Alum:氫氧化鋁,i.p: intraperitoneal,i.n: intranasal)行為學(xué)觀察

小鼠,次數(shù),鼻部


圖 1.2 各組小鼠打噴嚏數(shù)和搔鼻次數(shù)Fig 1.2 the number of sneezes and nasal rubbings in each group.2 IL-37 干預(yù)后降低 AR 小鼠鼻部嗜酸性粒細(xì)胞浸潤

嗜酸性粒細(xì)胞,小鼠,紅色,箭頭


圖 1.3.1 各組小鼠鼻黏膜病理學(xué)改變 H&E x400(紅色箭頭:嗜酸性粒細(xì)胞)Fig 1.3.1 the nasal mucosa sections from each treated mouse were stained with H&E x400(The red arrows indicate the eosinophils)

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