單純皰疹病毒及腺病毒與慢性結(jié)膜炎的相關(guān)性研究
發(fā)布時間:2020-07-10 04:51
【摘要】:慢性結(jié)膜炎是眼科的常見病、多發(fā)病。慢性結(jié)膜炎根據(jù)主要致病因素可分為感染性結(jié)膜炎(細(xì)菌、病毒、衣原體等)和非感染性結(jié)膜炎(機(jī)械性刺激、藥品等化學(xué)性刺激、眼部其他疾病、不良衛(wèi)生環(huán)境刺激、不良的生活習(xí)慣等)。在臨床上由病毒感染導(dǎo)致的慢性結(jié)膜炎呈逐漸增多趨勢,部分報道由病毒感染導(dǎo)致的慢性結(jié)膜炎其重要體征為下瞼的濾泡。為探討慢性結(jié)膜炎中單純皰疹病毒1型(Herpes simplex virus-1,HSV-1)及腺病毒(Adenovirus,ADV)的感染比例及在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎患者中兩者的感染情況,本實(shí)驗(yàn)以臨床診斷為慢性結(jié)膜炎患者(分為有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎患者、無下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎兩組)及正常人群為研究對象,采集患者眼部淚液標(biāo)本,應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR (Real-time fluorescence quantification PCR,FQ-PCR)技術(shù)檢測有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎患者中單純皰疹病毒1型及腺病毒的感染比例。 目的:通過實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測單純皰疹病毒(主要是HSV-1)及腺病毒在慢性結(jié)膜炎和正常人群中的淚液標(biāo)本感染比例,及在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎、無下瞼濾泡為體征的慢性結(jié)膜炎患者中的表達(dá)情況。 方法:采集臨床診斷為慢性結(jié)膜炎患者的結(jié)膜囊淚液標(biāo)本102例,正常人群結(jié)膜囊淚液標(biāo)本30例。通過實(shí)時熒光定量PCR檢測單純皰疹病病毒1型(單純皰疹病毒性結(jié)膜炎主要由HSV-1引起)及腺病毒在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎組、無下瞼濾泡的慢性結(jié)膜炎組及正常人群組中的表達(dá)。分析病毒感染在慢性結(jié)膜炎致病因素中所占比例,并將慢性結(jié)膜炎患者分為有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎組(n=59)和無下瞼濾泡的慢性結(jié)膜炎組(n=43)。應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測單純性皰疹病毒1型及腺病毒在兩組中的表達(dá)情況。分析單純皰疹病毒-1型與腺病毒在兩組中表達(dá)的水平差異及與下瞼濾泡體征的相關(guān)性。所得數(shù)據(jù)用SPSS l3.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行相應(yīng)統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果:①單純皰疹病毒1型在慢性結(jié)膜炎患者中的陽性表達(dá)率為23.53%(24/102),在正常人群組中陽性表達(dá)率為3.33%(1/30);在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎中的陽性表達(dá)率為32.2%(19/59);在無下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎中的陽性表達(dá)率為11.63%(5/43);單純皰疹病毒1型在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎組的表達(dá)與無下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎組的表達(dá)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。②腺病毒在慢性結(jié)膜炎患者中的陽性表達(dá)率為27.45%(28/102),在正常人群組中陽性表達(dá)率為6.67%(2/30);在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎中的陽性表達(dá)率為35.6%(21/59);在無下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎中的陽性表達(dá)率為16.28%(7/43);腺病毒在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎組的表達(dá)與無下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎組的表達(dá)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。③單純皰疹病毒1型及腺病毒在慢性結(jié)膜炎患者中的感染比例為50.98%(52/102)。單純皰疹病毒1型及腺病毒在有下瞼濾泡體征的慢性結(jié)膜炎患者中的感染比例67.8%(40/59)。 結(jié)論:①在慢性結(jié)膜炎中由單純皰疹病毒-1型和腺病毒感染引起的病毒性結(jié)膜炎占有較大的比例。 ②慢性結(jié)膜炎下瞼濾泡的產(chǎn)生與病毒感染(單純皰疹病毒1型、腺病毒)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R777.31
【圖文】:
圖 3.1 自制的淚液標(biāo)本采集用紗布片及 EP 管.2 提取標(biāo)本基因組 DNA按試劑盒說明書程序進(jìn)行淚液基因組 DNA 提取;具^程如下(在室溫進(jìn)行腺病毒 DNA 提。1.陰性質(zhì)控品處理:取出試劑盒中陰性質(zhì)控品,離心機(jī) 8000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 1凈化工作臺上,微量加樣器吸取 50μl 陰性質(zhì)控品置于 0.5ml 滅菌離心管中,lDNA 提取液充分混勻,100℃恒溫處理 10 分鐘。12000 rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 分。2.標(biāo)本處理 :(1) 將保存淚液樣本從低溫冰箱中取出后,在室溫下融化,向 入 1 ml 無菌生理鹽水,至于振蕩器上 1 分鐘充分震蕩搖勻;(2) 置于凈化工作臺上后用微量加樣器取 100μl 液體轉(zhuǎn)至 1.5ml 離心管中,μl 濃縮液混勻,12000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 10 分鐘;
22圖3.2 單純皰疹病毒-1型典型PCR結(jié)果(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5、6為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品,曲線8為測試樣本陰性樣品).圖3.3 腺病毒典型PCR結(jié)果(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線6為測試樣本陰性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品).
(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5、6為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品,曲線8為測試樣本陰性樣品).圖3.3 腺病毒典型PCR結(jié)果(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線6為測試樣本陰性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品).
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R777.31
【圖文】:
圖 3.1 自制的淚液標(biāo)本采集用紗布片及 EP 管.2 提取標(biāo)本基因組 DNA按試劑盒說明書程序進(jìn)行淚液基因組 DNA 提取;具^程如下(在室溫進(jìn)行腺病毒 DNA 提。1.陰性質(zhì)控品處理:取出試劑盒中陰性質(zhì)控品,離心機(jī) 8000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 1凈化工作臺上,微量加樣器吸取 50μl 陰性質(zhì)控品置于 0.5ml 滅菌離心管中,lDNA 提取液充分混勻,100℃恒溫處理 10 分鐘。12000 rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 分。2.標(biāo)本處理 :(1) 將保存淚液樣本從低溫冰箱中取出后,在室溫下融化,向 入 1 ml 無菌生理鹽水,至于振蕩器上 1 分鐘充分震蕩搖勻;(2) 置于凈化工作臺上后用微量加樣器取 100μl 液體轉(zhuǎn)至 1.5ml 離心管中,μl 濃縮液混勻,12000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 10 分鐘;
22圖3.2 單純皰疹病毒-1型典型PCR結(jié)果(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5、6為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品,曲線8為測試樣本陰性樣品).圖3.3 腺病毒典型PCR結(jié)果(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線6為測試樣本陰性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品).
(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5、6為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品,曲線8為測試樣本陰性樣品).圖3.3 腺病毒典型PCR結(jié)果(曲線1、2、3、4為陽性質(zhì)控品,曲線5為測試標(biāo)本陽性樣品,曲線6為測試樣本陰性樣品,曲線7為陰性質(zhì)控品).
【參考文獻(xiàn)】
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1 尹安坤;單純皰疹性角膜炎中醫(yī)藥治療進(jìn)展[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2005年02期
2 姚建婷;晉安;;HSV及其實(shí)驗(yàn)室檢測研究進(jìn)展(綜述)[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報;2010年01期
3 朱則今,吳靜安,陶佩珍,王淑琴;廣譜抗病毒藥17997治療實(shí)驗(yàn)性單純皰疹性角膜炎的療效觀察[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1998年06期
4 郭楊;陳世界;郭萬柱;李t
本文編號:2748471
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