【摘要】：【目的】觀(guān)察噪聲后血管紋巨噬細(xì)胞的改變,初步探討強(qiáng)噪聲暴露后血管紋巨噬細(xì)胞相關(guān)變化可能的機(jī)制�！痉椒ā繉�6-8周的C57BL/6J小鼠分別給予不同強(qiáng)度(100d B、106d B和112d B)噪聲(窄帶噪聲,8-16k Hz)處理2小時(shí)。在噪聲暴露后不同時(shí)間點(diǎn)(1小時(shí)、1天、3天、7天、9天及14天)獲取小鼠耳蝸進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。腹腔注射慶大霉素-德克薩斯紅(GTTR)后收集標(biāo)本,采用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)外側(cè)壁巨噬細(xì)胞變化和血管紋相關(guān)變化。同時(shí)檢測(cè)小鼠聽(tīng)性腦干反應(yīng)(ABR),利用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)等實(shí)驗(yàn)初步探究相關(guān)改變可能的機(jī)制�！窘Y(jié)果】1、不同強(qiáng)度噪聲引起不同程度的損傷1)噪聲引起的ABR閾值改變暴露后第1天,不同強(qiáng)度的噪聲組(106d B和112d B)均出現(xiàn)明顯的聽(tīng)力損傷,ABR閾值升高;噪聲暴露后的第14天,106d B組ABR閾值仍有一定程度的下降,而112d B組聽(tīng)力相較于之前沒(méi)有明顯變化。2)噪聲引起的血管紋巨噬細(xì)胞變化噪聲暴露后第7天,觀(guān)察到僅有112d B組的血管紋巨噬細(xì)胞有明顯減少,而100d B組和106d B組均未見(jiàn)變化。2、強(qiáng)噪聲(112d B)暴露引起的外側(cè)壁巨噬細(xì)胞變化1)噪聲引起血管紋Iba1+巨噬細(xì)胞變化強(qiáng)噪聲(112d B,8-16k Hz,2 hours)暴露后的第1天和第9天,血管紋Iba1+巨噬細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)及總體數(shù)目均發(fā)生了明顯變化;同時(shí),實(shí)驗(yàn)觀(guān)察了相同定位的螺旋韌帶,與血管紋巨噬細(xì)胞不同的是,其Iba1+巨噬細(xì)胞在噪聲暴露后的第7天,數(shù)目增多,但細(xì)胞形狀沒(méi)有明顯變化。2)耳蝸不同區(qū)段血管紋Iba1+巨噬細(xì)胞對(duì)噪聲的敏感度不一致噪聲暴露后第1天的血管紋中,巨噬細(xì)胞在耳蝸?lái)敾丶爸谢貐^(qū)段都有明顯的消失現(xiàn)象,而在其底回區(qū)段,仍可見(jiàn)不少巨噬細(xì)胞。3、噪聲引起的相關(guān)趨化因子(CCL2)和血管紋其他改變強(qiáng)噪聲暴露后,耳蝸表達(dá)的趨化因子CCL2隨時(shí)間變化,同時(shí)血管紋厚度和血管中毛細(xì)血管的寬度均有所增加,這些都可能是血管紋巨噬細(xì)胞變化的可能機(jī)制�！窘Y(jié)論】在成年小鼠耳蝸血管紋(SV)內(nèi),Iba1+細(xì)胞沿毛細(xì)血管分布,即血管紋巨噬細(xì)胞。在這里,大多數(shù)Iba1+巨噬細(xì)胞表現(xiàn)為分支狀,分叉或變性蟲(chóng)狀,突起附著在血管紋毛細(xì)血管上,相互交織成網(wǎng)。在中度噪聲暴露(100和106d B)的小鼠組中,暴露后第3天和第7天均未觀(guān)察到血管紋巨噬細(xì)胞數(shù)目或形態(tài)的明顯變化。強(qiáng)噪聲(112d B)損傷組,暴露后第1天,血管紋巨噬細(xì)胞出現(xiàn)明顯消失。而暴露后的第3、7天,血管紋巨噬細(xì)胞重新出現(xiàn)。損傷后第9天,血管紋Iba1+巨噬細(xì)胞有的出現(xiàn)減少,有的消失明顯。噪聲暴露后,可觀(guān)察到的血管紋厚度增加及毛細(xì)血管擴(kuò)張,與血管紋巨噬細(xì)胞的變化有時(shí)間的重合,同時(shí)在暴露后第1天,趨化因子(CCL2)表達(dá)明顯增多。以上一系列變化,能在一定程度上說(shuō)明血管紋巨噬細(xì)胞變化可能的機(jī)制:一方面涉及噪聲引起的炎性反應(yīng),另一方面與噪聲造成的物理變化相關(guān)。在耳蝸外側(cè)壁的螺旋韌帶上,噪聲能引起Iba1+巨噬細(xì)胞的變化,其數(shù)目在暴露后第3天明顯增多。這些螺旋韌帶巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的熒光信號(hào),但噪聲誘導(dǎo)的變化程度較低。
【圖文】：

圖1-A：106dB SPL噪聲暴露后，P1d組出現(xiàn)明顯ABR反應(yīng)閾平均值升高，與正常組（CON）相比差異有顯著性（P 0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）；而相較于P1d組，P7dP14d組ABR閾值均下降，差異有顯著性（P 0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。圖1-B：112dB SPL噪聲暴露后，P1d組中明顯ABR閾值升高，相比CON組有顯著性（P 0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）；相較于P1d組，P7d組ABR閾值下降，差異有顯著但P7d組和P14d組間并無(wú)明顯差異。2. 不同聲壓級(jí)噪聲暴露后的血管紋Iba1+巨噬細(xì)胞

但P7d組和P14d組間并無(wú)明顯差異。2. 不同聲壓級(jí)噪聲暴露后的血管紋Iba1+巨噬細(xì)胞圖2. 耳蝸（m1區(qū)段）外側(cè)壁血管紋m1區(qū)段熒光染色結(jié)果：100dB/106dB SPL噪聲暴露后第7天（P7d），Iba1+巨噬細(xì)胞（綠色）相較于對(duì)照組Iba1+巨噬細(xì)胞（藍(lán)色），數(shù)目及形態(tài)并無(wú)明顯不同，Iba1+巨噬細(xì)胞呈分枝狀，胞體膨大，分支細(xì)長(zhǎng)向四周突起；112dB SPL噪聲暴露后第7天（P7d），Iba1+巨噬細(xì)胞數(shù)目明顯減少，形態(tài)改變，大多數(shù)陽(yáng)性染色消失，細(xì)胞呈絲狀，未見(jiàn)膨大的胞體。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R764.433

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本文編號(hào)：2688677