【摘要】：目的探討mi R-155對人晶狀體上皮細(xì)胞(HLEpi C)和SD大鼠高糖誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的抑制作用。方法采用細(xì)胞實(shí)驗(yàn)MTT法檢測mi R-155的最佳藥物濃度及不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基對細(xì)胞增殖的影響,并進(jìn)行晶狀體體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,動物實(shí)驗(yàn)組包括:5.5 mol/L正常糖組(LG),25 mol/L甘露醇組(M),25 mol/L高糖培養(yǎng)基組(HG),高糖培養(yǎng)基處理的mi R-155(30 nmol/L)給藥組。確定最佳藥物濃度后,建立細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組,將HLEpi C用正常糖組(LG)處理至30%-40%的密度,并設(shè)置不同的培養(yǎng)組進(jìn)行藥物處理。培養(yǎng)組包括:正常糖組(LG),25 mol/L甘露醇組(M),25 mol/L高糖培養(yǎng)基組(HG),高糖培養(yǎng)基處理30 nmol/L的mi R-155的激動劑mimic和藥物對照CTm組。Western blot檢測不同處理組細(xì)胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和procaspase-9的表達(dá)是否有差異。通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察mimic對HLEpi C細(xì)胞遷移的影響。結(jié)果動物實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)mi R-155的激動劑mimic濃度為30 nmol/L時(shí),可以改變由高葡萄糖引起的晶狀體濁度的變化。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著培養(yǎng)基中葡萄糖濃度的增高,細(xì)胞促凋亡率越高,當(dāng)30 nmol/L的mimic作用于細(xì)胞時(shí),對HLEpi C的增殖和遷移具有顯著影響。在western blot實(shí)驗(yàn)中,mimic能顯著抑制高糖誘導(dǎo)的HLEpi C凋亡和SD大鼠晶狀體蛋白的凋亡,改變凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3以及凋亡起始蛋白caspase-9的前體蛋白procaspase-9表達(dá)量,使促凋亡率明顯低于高糖對照組。結(jié)論mi R-155可抑制高糖誘導(dǎo)的HLEpi C和SD大鼠細(xì)胞凋亡。
【圖文】：

17圖 1 miR-155 對 HLEpiC 細(xì)胞形態(tài)的影響Fig 1 Effect of miR-155 on HLEpiC cell morphology55 對 HLEpiC 細(xì)胞增殖的影響TT 檢測不同梯度藥物濃度對由高糖誘導(dǎo)的 HLEpiC 的改善情結(jié)果可以證明，在 48 h 時(shí)，藥物已經(jīng)發(fā)揮作用，根據(jù)數(shù)據(jù)處理藥濃度為 100 nM、60 nM、30 nM、15 nM、7.5 nM。高糖可以，與高糖培養(yǎng)對照組相比，mimic 用藥濃度為 30nM 時(shí)數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)分析結(jié)果如下：mimic 用藥 30 nM（F=24.135,P=0.001

安徽醫(yī)科 大學(xué)碩士學(xué)位 論文（ F=8.397,P=0.02 ） ,100 nM （ F=13.119,P=0.007 ） ； CTm 用 藥 30 nM（F=6.118,P=0.038）,60 nM（F=7.919,P=0.023）,100 nM（F=11.114,P=0.01）。隨著 mimic 藥物濃度的增加，改善作用增強(qiáng)，在藥物濃度為 30 nM 的時(shí)候，藥物作用效果最好，，隨著藥物濃度的繼續(xù)增加，藥物的作用效果開始下降。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3 次以上。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R776.1

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本文編號：2677196