天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當(dāng)前位置:主頁 > 醫(yī)學(xué)論文 > 五官科論文 >

VPS33B與NESG1相互作用抑制鼻咽癌增殖及誘導(dǎo)5-氟尿嘧啶化療敏感

發(fā)布時(shí)間:2020-05-23 03:43
【摘要】:鼻咽癌是來源于鼻咽粘膜上皮的一種高度惡性上皮性腫瘤,是東南亞地區(qū)尤其是中國兩廣地區(qū)的高發(fā)性腫瘤。目前研究表明,鼻咽癌的發(fā)病可能與基因易感性、EB病毒感染、特定飲食習(xí)慣等因素有關(guān)。鼻咽癌對放射治療敏感度較高,因此放療是早期鼻咽癌的主要治療手段。然而鼻咽癌極易出現(xiàn)放療抵抗,化療因此成為必不可少的輔助治療手段。癌基因與抑癌基因的失衡是腫瘤發(fā)生及進(jìn)展的重要基礎(chǔ)。VPS33B全稱為vacuolar protein sorting 33 homolog B(yeast),其編碼蛋白主要參與蛋白排序與液泡轉(zhuǎn)運(yùn)。目前關(guān)于VPS33B基因的報(bào)道大部分集中于關(guān)節(jié)攣縮、腎功能不全和膽汁淤積綜合征(ARC syndrome)和巨核細(xì)胞與血小板α-顆粒的生物合成障礙等疾病上。NESG1官方名稱為CCDC19,該基因特異性的表達(dá)于鼻咽和氣管纖毛柱狀上皮。已有多項(xiàng)研究證實(shí)該基因在鼻咽癌及肺腺癌等腫瘤中發(fā)揮抑癌基因作用。但其對鼻咽癌抑癌作用的深入機(jī)制尚未闡明。在本次研究中,我們研究了 VPS33B與NESG1 相互作用調(diào)控EGFR/PI3K/AKT/c-Myc/p53/miR-133a-3p環(huán)路從而抑制鼻咽癌增殖及促進(jìn)其對5-氟尿嘧啶化療敏感性的機(jī)制,為鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制研究提供新思路,并為鼻咽癌治療帶來了新的靶標(biāo)。研究內(nèi)容與方法1.VPS33B通過EGFR/PI3K/AKT促進(jìn)鼻咽癌對5-氟尿嘧啶化療敏感性。利用Western Blot實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證VPS33B對PI3K/AKT信號通路相關(guān)因子調(diào)控機(jī)制并利用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)及裸鼠生存模型驗(yàn)證VPS33B促進(jìn)鼻咽癌對5-Fu化療敏感性。2.miR-133a-3p抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖及其分子機(jī)制。(1)功能實(shí)驗(yàn)檢測miR-133a-3p對鼻咽癌增殖的影響;(2)機(jī)制實(shí)驗(yàn)檢測miR-133a-3p所調(diào)控的信號通路及其靶基因。3.c-Myc/p53通過調(diào)控EGFR/PI3K/AKT信號通路抑制miR-133a-3p對鼻咽癌增殖的抑癌作用;(1)生物信息學(xué)預(yù)測miR-133a-3p及p53啟動子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子;(2)ChIP、EMSA及雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測其預(yù)測轉(zhuǎn)錄因子是否結(jié)合并調(diào)控轉(zhuǎn)錄;(3)檢測c-Myc/p53是否調(diào)控miR-133a-3p;4.VPS33B誘導(dǎo)miR-133a-3p調(diào)節(jié)EGFR/PI3K/AKT/c-Myc/p53形成負(fù)性調(diào)控環(huán)路(1)檢測VPS33B是否調(diào)控miR-133a-3p表達(dá)利用qPCR實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)VPS33B對鼻咽癌細(xì)胞中miR-133a-3p表達(dá)量的改變;(2)功能及機(jī)制實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證EGFR或EGF介導(dǎo)VPS33B的功能及其相關(guān)信號通路;5.VPS33B與NESG1相互作用和誘導(dǎo)(1)驗(yàn)證VPS33B與NESG1是否相互作用;(2)功能及機(jī)制實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證VPS33B與NESG1相互的調(diào)控關(guān)系;6.LMP-1及尼古丁通過PI3K/AKT/c-Jun信號通路抑制VPS33B表達(dá)(1)檢測LMP-1及尼古丁是否調(diào)控VPS33B表達(dá);(2)機(jī)制實(shí)驗(yàn)分析LMP-1及尼古丁如何調(diào)控VPS33B表達(dá);7.VPS33B在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其臨床相關(guān)性分析(1)利用免疫組化檢測VPS33B及NESG1在鼻咽及鼻咽癌組織中的表達(dá)情況;(2)VPS33B與NESG1的相關(guān)性分析及VPS33B的臨床相關(guān)性分析。結(jié)果及結(jié)論1.VPS33B通過EGFR/PI3K/AKT信號通路促進(jìn)鼻咽癌對5-氟尿嘧啶的化療敏感性。2.miR-133a-3p通過靶向EGFR/PI3K/AKT信號通路抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖;3.VPS33B調(diào)控的EGFR/PI3K/AKT/c-Myc/p53/miR-133a-3p負(fù)反饋環(huán)路抑制鼻咽癌增殖;4.VPS33B通過EGFR/PI3K/AKT/c-Jun信號通路與NESG1相互作用并調(diào)控上述信號環(huán)路;5.LMP-1及尼古丁通過PI3K/AKT/c-Jun信號通路抑制VPS33B表達(dá);6.VPS33B在鼻咽癌中低表達(dá),但其高表達(dá)是鼻咽癌臨床預(yù)后良好的指標(biāo)。
【圖文】:

過表達(dá),鼻咽癌細(xì)胞,細(xì)胞株


邐第一章VPS33B促進(jìn)鼻咽癌對5-氟尿嘧啶化療敏感邐逡逑為4pg/g,給藥方式為腹腔注射。給藥時(shí)間間隔為4天。對照組使用生理鹽水腹逡逑腔注射。計(jì)算裸鼠生存時(shí)間及稱量其體重。逡逑二結(jié)果逡逑1.熒光定量PCR及WB檢測穩(wěn)定過表達(dá)鼻咽癌細(xì)胞株HONE1-VPS33B和逡逑SUNE1-VPS33B中VPS33B的表達(dá)情況逡逑選取生長狀態(tài)良好的HONE1-VPS33B和SUNE1-VPS33B細(xì)胞提。遥危铃义喜⒛孓D(zhuǎn)錄,以進(jìn)行熒光定量PCR以及Western邋Blot檢測所選細(xì)胞株內(nèi)VPS33B逡逑的過表達(dá)程度。結(jié)果顯示所選細(xì)胞株中VPS33B表達(dá)量均明顯上調(diào),,證明逡逑VPS33B慢病毒載體轉(zhuǎn)染成功,適合進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。檢測結(jié)果如下所示:逡逑

信號通路,氟尿嘧啶,關(guān)鍵因子,鼻咽癌細(xì)胞


第一章邋VPS33B促進(jìn)鼻咽癌對5-氟尿嘧啶化療敏感胞中EGFR、p-PI3K、p-AKT表達(dá)量下調(diào),PI3K&AKT總蛋白表達(dá)而其下游c-Myc、E2F1、CCND1表達(dá)下調(diào),p53表達(dá)上調(diào)。抑制VPS33察到相反結(jié)果。該結(jié)果表明VPS33B通過EGFR/PI3K/AKT調(diào)控其下、P53、c-Jun等細(xì)胞周期關(guān)鍵因子在鼻咽癌細(xì)胞中發(fā)揮抑制增殖的作用果如下所示:逡逑NC邋VPS33B邋NC邋VPS33B邐NC邋VPS33B邋NC邋VPS33B逡逑
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R739.63

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 廖維婷;陳文勇;;鼻咽癌相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J];中醫(yī)耳鼻喉科學(xué)研究;2011年02期

2 ;鼻咽癌標(biāo)志物臨床應(yīng)用專家共識[J];中國癌癥防治雜志;2019年03期

3 黎騁;鄭裕明;郭俊宇;馬麗萍;陸愛英;湯敏中;吳惠惠;蔡永林;;鼻咽癌組織中多聚免疫球蛋白受體的表達(dá)及意義[J];山東醫(yī)藥;2015年46期

4 葉浩昕;范紹

本文編號:2677092


資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/wuguanyixuelunwen/2677092.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶1de80***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要?jiǎng)h除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
日本精品理论在线观看| 都市激情小说在线一区二区三区| 太香蕉久久国产精品视频| 欧美日韩成人在线一区| 欧美一区二区三区高潮菊竹| 国产av熟女一区二区三区四区| 色丁香一区二区黑人巨大| 热久久这里只有精品视频| 亚洲a级一区二区不卡| 98精品永久免费视频| 亚洲精品偷拍一区二区三区| 日本女优一色一伦一区二区三区| 91欧美亚洲视频在线| 国产传媒高清视频在线| 亚洲熟妇熟女久久精品 | 人妻内射在线二区一区| 欧美日韩人妻中文一区二区| 久久亚洲午夜精品毛片| 国产精品免费福利在线| 日本淫片一区二区三区| 国产高清精品福利私拍| 一区二区福利在线视频| 国产精品日韩精品一区| 亚洲午夜福利视频在线| 亚洲精品国产第一区二区多人| 亚洲国产一级片在线观看| 日韩中文字幕视频在线高清版| 国产精品一区欧美二区| 国产综合一区二区三区av| 国语对白刺激高潮在线视频| 超碰在线免费公开中国黄片| 国产又黄又猛又粗又爽的片| 99久久婷婷国产亚洲综合精品 | 九九热视频免费在线视频| 国产精品视频第一第二区| 欧美激情一区二区亚洲专区| 丝袜诱惑一区二区三区| 日韩人妻一区中文字幕| 午夜福利大片亚洲一区| 麻豆视频传媒入口在线看| 国产精品久久精品国产|