【摘要】：目的:探討G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體-1(G-protein-coupled bile acid receptor-1,TGR5)在Vogt-Koyanagi-Harada綜合征(VKH)發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:采用實(shí)時(shí)熒光定量(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)M1型巨噬細(xì)胞中TGR5、iNOS、CD16、Arg1和CD206mRNA水平,運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10的蛋白水平及用流式細(xì)胞熒光分選技術(shù)(Fluorescence activated Cell Sorting,FACS)檢測(cè)Th1和Th17細(xì)胞比例,收集上清液運(yùn)用ELISA檢測(cè)相應(yīng)細(xì)胞因子IFN-γ和IL-17的表達(dá)水平,然后進(jìn)行相關(guān)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:活動(dòng)期VKH綜合征患者M(jìn)1型巨噬細(xì)胞中TGR5受體mRNA水平較健康對(duì)照組顯著降低。TGR5的特異型激動(dòng)劑INT-777可以誘導(dǎo)活動(dòng)期VKH綜合征患者的M1型巨噬細(xì)胞向M2型巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)換,并減少炎癥因子TNF-α,IL-1β和IL 6的分泌,促進(jìn)IL-10的分泌。將M1型巨噬細(xì)胞和CD4~+T細(xì)胞共培養(yǎng)后,TGR5的激活能夠抑制Th1和Th17極化并且降低IFN-γ和IL-17的表達(dá)。結(jié)論:研究表明,TGR5受體的低表達(dá)可能是VKH綜合征發(fā)病的原因之一。
【圖文】：

Real-time PCR 檢測(cè) TGR5 的相對(duì) mRNA 水平(活動(dòng)期 VKH 綜合征患康人 n=8， *p<0.05)。采用獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析macrophages from patients and healthy subjects using real-time PCR to m mRNA level of TGR5 (active VKH patients: n=8, healthy subjects: n=8, Using Independent-sample t test for statistical analysis.5 的激活使 M1 向 M2 極化研究 TGR5 對(duì)巨噬細(xì)胞表型的作用，我們首先通過(guò) Real-time動(dòng)劑 INT-777 對(duì)巨噬細(xì)胞中 TGR5 mRNA 表達(dá)的影響。我們發(fā)現(xiàn)征患者的 M1 型巨噬細(xì)胞中，INT-777 刺激后 TGR5 受體的表并且，在活動(dòng)期 VKH 綜合征患者的 M1 型巨噬細(xì)胞中加入 IN M1 巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物 iNOS 和 CD16 的表達(dá)明顯降低，M2物 Arg1 和 CD206 的表達(dá)顯著升高。證明加入INT-777 后使得活者的 M1 型巨噬細(xì)胞向 M2 型巨噬細(xì)胞極化。

動(dòng)期 VKH 綜合征患者的 M1 巨噬細(xì)胞與 INT-777 共培養(yǎng) 24 小時(shí)。用 Real-t組 TGR5 的相對(duì)表達(dá)(n=8， ***p<0.001)。結(jié)果采用 Wilcoxon 配對(duì)樣本 t 檢驗(yàn)異分析。1 macrophages from patients were cultured with or without the TGR5 agonist 4 hours. Relative expression of TGR5 mRNAwas measured using real-time PCR**P< 0.01). Results were analyzed using the Wilcoxon matched pairs test.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R773

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本文編號(hào)：2658486