【摘要】：目的:使用18β-甘草次酸鈉對變應性鼻炎大鼠滴鼻,觀察對大鼠鼻黏膜TSLP表達的影響,探索18β-甘草次酸鈉對變應性鼻炎的作用機制。方法:100只Wistar大鼠隨機分為5組,分別是正常對照組,AR模型組,布地奈德組,18β-甘草次酸鈉20mg/kg和40mg/kg劑量組。除正常對照組外,其余4組以卵清蛋白致敏建立AR動物模型,造模成功后,以分組給予藥物干預,用藥周期為2周和4周。使用ELISA測定并比較各組間大鼠血清中IL-4和OVA-sIgE的濃度水平;免疫組化法檢測TSLP在大鼠鼻黏膜的分布情況,免疫印跡在蛋白水平檢測并比較各組間大鼠鼻黏膜TSLP的表達;實時熒光定量PCR在轉(zhuǎn)錄水平檢測并比較各組間大鼠鼻黏膜TSLP-mRNA的表達。結(jié)果:免疫組化和免疫印跡證實大鼠鼻黏膜中TSLP表達于上皮細胞、內(nèi)皮細胞和上皮纖毛處。AR模型組較正常對照組大鼠鼻黏膜TSLP及TSLP-mRNA的表達明顯增強(P0.05),給予藥物干預2周、4周后,布地奈德組,18β-甘草次酸鈉20mg/kg和40mg/kg劑量組均出現(xiàn)大鼠鼻黏膜TSLP及TSLP-mRNA的表達被抑制,較AR模型組均有明顯統(tǒng)計學差異(P0.05),和正常對照組相比不存在統(tǒng)計差異(P0.05)。隨著TSLP受抑制,IL-4、OVA-sIgE的血清濃度也降低。結(jié)論:18β-甘草次酸鈉對變應性鼻炎大鼠鼻黏膜TSLP有明顯抑制作用,可以控制Th2型免疫炎癥反應,表明18β-甘草次酸鈉在變應性鼻炎治療中具有潛在的應用價值。
【圖文】：

加鹽酸前 PH 試紙顏色，與比色卡比對約在 8～9 之間；b 為滴加鹽酸后 PH與比色卡比對約在 7～8 之間。圖 2-1 配制 18β-甘草次酸鈉滴鼻液的 PH 值對比圖精液量取 75%乙醇 99ml 及 1ml 濃 HCl，將其充分混勻，加蓋密封備用去離子水 0.5 升，向其中加入 DEPC 原液 0.5mL，充分攪拌，最終液的最終濃度為 0.1%。搖床 37℃震蕩 24h，混合均勻后加入無材料中，搖床培育一晝夜，然后收集 DEPC 水，滅菌三分鐘。低溫注意在未高壓前，DEPC 有劇毒，所以操作小心翼翼，，做好防護措糖凝膠

2.2.2 實驗動物的分組及藥物干預利用隨機數(shù)字表法將 100 只 Wistar 大鼠隨機分成正常對照組、AR 模型組、布地奈德組和 18β-甘草次酸鈉 20mg/kg 和 40mg/kg 劑量組，每組 20 只，還有 6只大鼠用于預實驗。除正常對照組，對其余組大鼠進行 AR 造模，模型建立之后，接著依據(jù)大鼠給藥劑量（mg/kg）=人的給藥劑量（mg/m2）/大鼠的體重（kg）×大鼠的體表面積（m2）進行藥物干預（22～49 天）。布地奈德組（陽性藥物對照組 0.2mg/kg：50ul/側(cè)鼻腔×次，3 次/日）以布地奈德混懸液給大鼠滴鼻；18β-甘草次酸鈉 20mg/kg 和 40mg/kg 劑量組（50ul/側(cè)鼻腔×次，3 次/日）以配置好的低、高濃度 18β-甘草次酸鈉溶液滴鼻。AR 模型組和正常對照組以等量的生理鹽水滴鼻（50ul/側(cè)鼻腔×次，3 次/日）。該階段除正常對照組，其他各組均以 2%OVA滴鼻（50ul/側(cè)鼻腔，1 次/隔日），維持鼻腔激發(fā)，正常對照組以等體積的生理鹽水滴鼻。然后在實驗第 35 天和第 49 天完成 2 周和 4 周的藥物干預，并于兩次給藥干預末次 24 h 后進行大鼠血清、鼻黏膜取材，每組 10 只大鼠（如圖 2-2）。
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R765.21

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本文編號：2648261