【摘要】：目的:研究MCM7在下咽癌中的表達(dá)及作用,為下咽癌的發(fā)病機(jī)制研究和治療提供新靶點(diǎn)。方法:(1)利用Real-time PCR檢測(cè)MCM7在人下咽癌細(xì)胞系FaDu中的表達(dá)。(2)利用siRNA沉默F(xiàn)aDu細(xì)胞中MCM7的表達(dá)。分組:siRNA-MCM7處理的FaDu細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組(siRNA-MCM7實(shí)驗(yàn)組);陰性對(duì)照siRNA(siRNA-NC)處理的FaDu細(xì)胞作為對(duì)照組(siRNA-NC對(duì)照組)。利用Real-time PCR和Western blot檢測(cè)沉默效果。(3)分別利用MTT實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MCM7沉默對(duì)FaDu細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。(4)基于TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)和生物信息學(xué)方法建立人頭頸部鱗癌中MCM7的共表達(dá)基因網(wǎng)絡(luò)。利用基因模塊化分析技術(shù)篩選共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮重要作用的核心基因模塊,以探索MCM7影響FaDu細(xì)胞增殖及遷移的潛在機(jī)制。結(jié)果:(1)人下咽癌細(xì)胞系FaDu中表達(dá)MCM7基因。(2)沉默效果驗(yàn)證的結(jié)果顯示siRNA-MCM7處理的FaDu細(xì)胞中MCM7的表達(dá)受到明顯抑制。(3)MTT實(shí)驗(yàn)證實(shí),與對(duì)照組相比,MCM7沉默的FaDu細(xì)胞的增殖能力受到明顯抑制(P0.05)劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示MCM7沉默后,FaDu的細(xì)胞遷移能力顯著下降(P0.05)。(4)人頭頸部鱗癌中MCM7的共表達(dá)基因網(wǎng)絡(luò)揭示MCM7可能通過(guò)影響其共表達(dá)基因發(fā)揮DNA復(fù)制、DNA損傷修復(fù)、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖等功能(P0.05)。基因模塊化分析顯示MCM7可能通過(guò)調(diào)控一個(gè)包含MCM6、RFC2、RFC5、CDC6等18個(gè)基因的基因模塊影響FaDu細(xì)胞的增殖和遷移。結(jié)論:(1)人下咽癌細(xì)胞系FaDu中表達(dá)MCM7。(2)MCM7沉默能夠抑制FaDu細(xì)胞的增殖及遷移能力。(3)MCM7可能通過(guò)調(diào)控其共表達(dá)基因模塊發(fā)揮調(diào)節(jié)DNA復(fù)制、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖及周期等功能。
【圖文】：

圖 2-1 FaDu 細(xì)胞表達(dá) MCM7 基因Figure 2-1 The expression of MCM7 in FaDu7 的沉默檢測(cè)lot 和 Real-time PCR 檢測(cè) MCM7 的 siRNA-NC 對(duì)照組相比（1.12±0.09）顯著降低（0.53±0.13），P=0.003，如示與 siRNA-NC 對(duì)照組相比（1.13±0表達(dá)顯著降低（0.52±0.18），二者差 2-2 B 所示。提示 FaDu 細(xì)胞中的 M

圖 2-2 FaDu 中，MCM7 的沉默效果檢測(cè)（A. MCM7 在蛋白水平的沉默效果；B.MCM7 在 mRNA 水平的沉默效果）Figure 2-2 The silent effect of MCM7 in FaDu（A. The silent effect of MCM7 in protein level; B. The silent effect of MCM7 in mRNAlevel）2.3 MCM7 對(duì) FaDu 細(xì)胞增殖能力的影響為了檢測(cè) MCM7 對(duì) FaDu 細(xì)胞增殖能力的影響，我們利用 MTT 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了 siRNA-NC 對(duì)照組和 siRNA-MCM7 組 FaDu 細(xì)胞在 0h、24h、48h 和72h 的細(xì)胞增殖能力。結(jié)果顯示與 siRNA-NC 對(duì)照組相比，siRNA-MCM組 FaDu 細(xì)胞在 0h 和 24h 的細(xì)胞增殖量無(wú)顯著差異，P<0.05。但是，在 48時(shí)，siRNA-MCM7 組的細(xì)胞增殖與 siRNA-NC 對(duì)照組相比，，受到明顯抑制P<0.01。在 72h，這種差異更加明顯，P<0.001。這一結(jié)果提示 MCM7 基因
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R739.63

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1 鄧博雅;王思亮;李愛(ài)琳;張頤;胡琰潔;李璐;姜彥多;;MCM7在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)及意義[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2013年01期

2 任占平;石U

本文編號(hào)：2642143