【摘要】：目的:研究MCM7在下咽癌中的表達及作用,為下咽癌的發(fā)病機制研究和治療提供新靶點。方法:(1)利用Real-time PCR檢測MCM7在人下咽癌細胞系FaDu中的表達。(2)利用siRNA沉默F(xiàn)aDu細胞中MCM7的表達。分組:siRNA-MCM7處理的FaDu細胞作為實驗組(siRNA-MCM7實驗組);陰性對照siRNA(siRNA-NC)處理的FaDu細胞作為對照組(siRNA-NC對照組)。利用Real-time PCR和Western blot檢測沉默效果。(3)分別利用MTT實驗和細胞劃痕實驗檢測MCM7沉默對FaDu細胞增殖和遷移能力的影響。(4)基于TCGA數(shù)據(jù)庫和生物信息學(xué)方法建立人頭頸部鱗癌中MCM7的共表達基因網(wǎng)絡(luò)。利用基因模塊化分析技術(shù)篩選共表達網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮重要作用的核心基因模塊,以探索MCM7影響FaDu細胞增殖及遷移的潛在機制。結(jié)果:(1)人下咽癌細胞系FaDu中表達MCM7基因。(2)沉默效果驗證的結(jié)果顯示siRNA-MCM7處理的FaDu細胞中MCM7的表達受到明顯抑制。(3)MTT實驗證實,與對照組相比,MCM7沉默的FaDu細胞的增殖能力受到明顯抑制(P0.05)劃痕實驗結(jié)果顯示MCM7沉默后,FaDu的細胞遷移能力顯著下降(P0.05)。(4)人頭頸部鱗癌中MCM7的共表達基因網(wǎng)絡(luò)揭示MCM7可能通過影響其共表達基因發(fā)揮DNA復(fù)制、DNA損傷修復(fù)、調(diào)節(jié)細胞周期和細胞增殖等功能(P0.05)�；蚰K化分析顯示MCM7可能通過調(diào)控一個包含MCM6、RFC2、RFC5、CDC6等18個基因的基因模塊影響FaDu細胞的增殖和遷移。結(jié)論:(1)人下咽癌細胞系FaDu中表達MCM7。(2)MCM7沉默能夠抑制FaDu細胞的增殖及遷移能力。(3)MCM7可能通過調(diào)控其共表達基因模塊發(fā)揮調(diào)節(jié)DNA復(fù)制、調(diào)節(jié)細胞增殖及周期等功能。
【圖文】：

圖 2-1 FaDu 細胞表達 MCM7 基因Figure 2-1 The expression of MCM7 in FaDu7 的沉默檢測lot 和 Real-time PCR 檢測 MCM7 的 siRNA-NC 對照組相比（1.12±0.09）顯著降低（0.53±0.13），P=0.003，如示與 siRNA-NC 對照組相比（1.13±0表達顯著降低（0.52±0.18），二者差 2-2 B 所示。提示 FaDu 細胞中的 M

圖 2-2 FaDu 中，MCM7 的沉默效果檢測（A. MCM7 在蛋白水平的沉默效果；B.MCM7 在 mRNA 水平的沉默效果）Figure 2-2 The silent effect of MCM7 in FaDu（A. The silent effect of MCM7 in protein level; B. The silent effect of MCM7 in mRNAlevel）2.3 MCM7 對 FaDu 細胞增殖能力的影響為了檢測 MCM7 對 FaDu 細胞增殖能力的影響，我們利用 MTT 實驗檢測了 siRNA-NC 對照組和 siRNA-MCM7 組 FaDu 細胞在 0h、24h、48h 和72h 的細胞增殖能力。結(jié)果顯示與 siRNA-NC 對照組相比，siRNA-MCM組 FaDu 細胞在 0h 和 24h 的細胞增殖量無顯著差異，P<0.05。但是，在 48時，siRNA-MCM7 組的細胞增殖與 siRNA-NC 對照組相比，，受到明顯抑制P<0.01。在 72h，這種差異更加明顯，P<0.001。這一結(jié)果提示 MCM7 基因
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R739.63

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1 鄧博雅;王思亮;李愛琳;張頤;胡琰潔;李璐;姜彥多;;MCM7在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達及意義[J];解剖科學(xué)進展;2013年01期

2 任占平;石U

本文編號：2642143