【摘要】：目的：長期使用抗青光眼藥物的患者行濾過手術(shù)后，濾過道瘢痕化的發(fā)生率可能高于無用藥史的患者。前列腺素類藥物是目前認(rèn)為最安全、最有效的局部抗青光眼藥物，臨床上應(yīng)用廣泛。本實驗研究拉坦前列素的活性成分拉坦前列素游離酸（latanoprost free acid，Lat-FA）對Tenon囊成纖維細(xì)胞（human Tenon fibroblastcells, HTFs）HTFs增殖和分泌結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor,CTGF）的影響，并對其調(diào)控機制進行初步研究。 方法：遵照赫爾辛基宣言，征得病人同意后手術(shù)取眼科無青光眼病史的白內(nèi)障病人Tenon囊組織，原代培養(yǎng)Tenon囊成纖維細(xì)胞（HTFs），光學(xué)像差顯微鏡和吉姆薩（Giemsa）染色觀察細(xì)胞形態(tài)。 1. CCK-8試劑盒檢測不同時間不同濃度拉坦前列素游離酸（Lat-FA）作用于HTFs的OD值。 2.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測Lat-FA對HTFs分泌CTGF的影響。 3.應(yīng)用MAPK信號通路阻斷劑條件下，采用ELISA檢測Lat-FA對HTFs分泌CTGF的影響。 結(jié)果：1.不同濃度0ng/ml、0.5ng/ml、5ng/ml、50ng/ml、500ng/ml、5000ng/mlLat-FA作用于HTFs測得OD值分別為：0.334±0.011，0.336±0.010，0.338±0.009，0.359±0.011，0.389±0.018，0.424±0.021，與對照組相比0.5ng/ml、5ng/ml組P值分別為0.665、0.375，無統(tǒng)計學(xué)差異，其余三組統(tǒng)計學(xué)均有顯著性差異（P0.05）；不同時間段24h、48h、72h Lat-FA作用于HTFs測得OD值分別為：0.349±0.030，，0.361±0.032，0.379±0.039，24h與48小時間無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.088），72h組與其余兩組比較均存在顯著的統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 2. Lat-FA處理HTFs24h后ELISA檢測不同組分泌CTGF：對照組為83.577±2.752ng/L，Lat-FA組為108.710±3.654ng/L；Lat-FA組與對照組相比，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 3. Lat-FA處理HTFs前，使用SP600125、SB203580、UO126三種MAPK信號通路亞家族阻斷劑，作用HTFs0.5小時，分為Lat-FA組、Lat-FA+SP600125組、Lat-FA+SB203580組和Lat-FA+UO126組ELISA，共四組。Lat-FA處理細(xì)胞24小時后ELISA測得CTGF分泌量分別為：108.710±3.654ng/L，75.199±3.040ng/L，84.507±4.239ng/L，99.091±6.359ng/L；使用不同MAPK信號通路特異性阻斷劑的三組與Lat-FA組相比，均存在統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 結(jié)論： Lat-FA對HTFs具有一定的促增殖作用，且該作用可能與時間和濃度存在一定相關(guān)性；Lat-FA能上調(diào)HTFs分泌CTGF； Lat-FA可通過MAPK信號通路上調(diào)CTGF分泌。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R775

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本文編號：2563196