【摘要】：背景和目的 變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis, AR)是一種由易感個體接觸致敏變應(yīng)原后由IgE抗體參與、以肥大細(xì)胞釋放介質(zhì)(主要是組胺等)為開端、有多種免疫活性細(xì)胞和細(xì)胞因子等共同作用的鼻黏膜慢性炎癥性疾病。二十余年前,在大量的實驗基礎(chǔ)上,Ciprandi G提出了變應(yīng)性鼻炎最輕持續(xù)炎癥反應(yīng)期(allergic rhinitis minimal persistent inflammation, AR-MPI)的概念,指出當(dāng)變應(yīng)原劑量較低時,即使患者無AR的癥狀表現(xiàn),但鼻黏膜已經(jīng)發(fā)生炎癥反應(yīng),并提出預(yù)防性治療的新方案,推測在癥狀未發(fā)作前給予藥物治療,將會改善患者生活質(zhì)量,減少并發(fā)癥的發(fā)生。雖然此舉當(dāng)時并未得到廣泛的認(rèn)同,卻給人們治療AR以啟迪,AR預(yù)防性治療的相關(guān)研究從未間斷。AR-MPI動物模型的成功建立為這一研究帶來新的契機(jī)。本文通過檢測提前4w、2w、1w使用鼻用糖皮質(zhì)激素預(yù)防治療豚鼠AR-MPI模型后鼻黏膜病理性改變及STAT6、IL-4的表達(dá)情況,以探討不同用藥時間預(yù)防治療AR的療效。 方法 健康Hartley系豚鼠120只,雌雄不限,體重200g-300g,隨機(jī)分為6組：A組(空白對照組),B組(AR無干預(yù)組),C組(AR-MPI期無干預(yù)組),D組(AR-MPI期糖皮質(zhì)激素提前1周治療組),E組(AR-MPI期糖皮質(zhì)激素提前2周治療組),F組(AR-MPI期糖皮質(zhì)激素提前4周治療組),每組20只。B、C、D、E、F組用卵清蛋白(OVA)行基礎(chǔ)致敏、強(qiáng)化致敏,繼之鼻腔局部激發(fā),建立豚鼠AR模型后,B組繼續(xù)以1%OVA激發(fā),C、D、E、F組改為0.01%OVA鼻腔局部激發(fā),建立AR-MPI模型。對照組用生理鹽水代替OVA進(jìn)行實驗。D、E、F組為AR-MPI模型丙酸氟替卡松鼻噴霧劑(fluticasone propionate nasal spray, FP)預(yù)防治療組,動物建模后FP(50微克\側(cè)\次)治療,每天2次,分別治療1w、2w、4w,用藥結(jié)束后1%OVA鼻腔激發(fā)。觀察豚鼠的行為學(xué)變化,最后一次鼻腔激發(fā)后處死動物取所有豚鼠的鼻黏膜,觀察HE染色情況,應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測STAT6、IL-4在各組豚鼠鼻黏膜中的表達(dá)。 結(jié)果 1動物的行為學(xué)觀察 采用疊加量化記分法評價豚鼠模型,總分5表示建模成功,癥狀減輕結(jié)合鼻黏膜病理學(xué)改變判定AR-MPI模型成功。不同時間藥物治療,1%OVA鼻腔攻擊后,A、E、F均無典型的AR表現(xiàn),B、C、D組均出現(xiàn)較典型的AR癥狀,A、E、F組間比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),B、C、D組組間無差異(P0.05),A、E、F組與B、C、D組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2鼻黏膜組織病理檢測結(jié)果 建模結(jié)束后,比較各組豚鼠鼻黏膜嗜酸粒細(xì)胞(EOS)計數(shù),A組偶見EOS,B組EOS明顯浸潤,與A組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；C、D、E、F組EOS輕微浸潤,與A、B組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型建立成功。 FP預(yù)防治療,1%OVA鼻腔局部攻擊后,A組豚鼠鼻黏膜較前無明顯改變,B組鼻黏膜出現(xiàn)更嚴(yán)重的組織重塑, C、 D組均有EOS大量浸潤,E、F組上皮基本完整、偶見炎癥細(xì)胞浸潤,B組與余組均有差異(P0.05),A、E、F組間無差異(P0.05),C、D組組間無差異(P0.05),A、C、D組組間有差異(P0.05)。 3STAT6、IL-4免疫組化檢測 在正常和AR豚鼠鼻黏膜中均可檢測到STAT6、IL-4,其分布基本一致,主要集中在下鼻甲粘膜及鼻中隔犁氏區(qū)粘膜上皮細(xì)胞胞膜和胞質(zhì)中； 建模后,STAT6、IL-4的表達(dá)情況(平均灰度值比較)為：A組少見棕黃色顆粒；B組棕黃色顆粒較多且成團(tuán)分布；C、D、E、F組棕黃色顆粒彌漫分布,組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；A組、B組分別與C、D、E、F組比較,均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)； FP治療,1%OVA鼻腔再攻擊后,STAT6、IL-4的表達(dá)情況(平均灰度值比較)為： A組同前,B組幾乎全部被染成棕黃色顆粒,C、D組棕黃色顆粒較多,成團(tuán)分布,E組、F組可零星見到棕黃色顆粒,比較灰度值,B組與余組均有差異(p0.05),A、E、F組間無差異(P0.05),C、D組組間無差異(P0.05),A、C、D組組間有差異(P0.05)。 以B組為例,AR模型建成后,比較STAT6、IL-4的灰度值,二者具有顯著相關(guān)性(r=0.960,p0.05)。 結(jié)論 1STAT6、IL-4在正常與AR豚鼠中均有表達(dá),且兩者具有相關(guān)性；STAT6可以作為判斷AR嚴(yán)重程度的指標(biāo)。 2FP可以下調(diào)STAT6、IL-4等因子的表達(dá)水平,這可能是鼻用糖皮質(zhì)激素治療AR機(jī)理之一。 3預(yù)防治療AR模型豚鼠,提前2W應(yīng)用鼻用糖皮質(zhì)激素可緩解發(fā)作后1W的炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R765.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 楊繼芳;劉濤;;下鼻甲注射地塞米松對常年性變應(yīng)性鼻炎患者血清IFN-γ、IL-4含量的影響[J];包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年01期

2 張羅,周兵,韓德民,顧之燕;變應(yīng)性鼻炎研究進(jìn)展(三):鼻用皮質(zhì)類固醇的藥理作用[J];中國耳鼻咽喉頭頸外科;2004年01期

3 寧顯會;邢志敏;王e，

本文編號：2524573