【摘要】：目的：建立經(jīng)低頻強聲暴露的巴馬香豬噪聲性耳聾模型。通過對巴馬香豬低頻強聲暴露后不同時刻行聽性腦干反應(yīng)(Auditory Brainstem Response, ABR)檢測、觀察其行為學(xué)變化、前庭結(jié)構(gòu)及耳蝸毛細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)形態(tài)、內(nèi)耳凋亡因子天冬氨酸特異性的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)免疫組織化學(xué)及免疫熒光染色,了解正常組巴馬香豬耳蝸內(nèi)、外毛細(xì)胞形態(tài)變化,低頻強聲對巴馬香豬聽功能損傷程度、耳蝸毛細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)及前庭器官形態(tài)的影響及內(nèi)耳凋亡因子的表達(dá)。初步觀察低頻強聲對巴馬香豬位聽器官損傷特點,探討其損傷產(chǎn)生的相關(guān)機制。方法：將8只巴馬香豬隨機分為對照組(2只)及實驗組(6只),均于實驗前行聽性腦干反應(yīng)檢測,將實驗組再隨機分為暴露后即刻組、暴露后36小時組及暴露后84小時組,每組2只。實驗組動物暴露于50Hz,142dBSPL的低頻噪聲中5分鐘,再分別于暴露后即刻、暴露后36小時及暴露后84小時觀察行為學(xué)變化,并行ABR檢測,然后在掃描電鏡下觀察各組動物耳蝸毛細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)及前庭器官的形態(tài)變化；用免疫組織化學(xué)染色檢測各組動物內(nèi)耳相應(yīng)結(jié)構(gòu)上Caspase-3的表達(dá)；用免疫熒光4',6--二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽(DAPI)標(biāo)記細(xì)胞核方法進(jìn)一步觀察證實毛細(xì)胞胞質(zhì)中Caspase-3的表達(dá)情況,同時通過細(xì)胞計數(shù)方法計算毛細(xì)胞缺失率以判定細(xì)胞死亡情況。對照組巴馬香豬除不暴露于噪聲環(huán)境外,其他與實驗組巴馬香豬處理相同。結(jié)果：8只(16耳)巴馬香豬低頻強聲暴露前ABR閾值為91.25±10.72 dBSPL;實驗組所有動物低頻強聲暴露后雙耳ABR閾值均未能引出。實驗動物在強聲暴露過程中多安靜不動,暴露后即刻出現(xiàn)短暫站立、行走不穩(wěn),未見眼震；暴露后第2天巴馬香豬活動基本恢復(fù)正常,但活躍程度仍有所下降；實驗組動物球囊斑及橢圓囊斑掃描電鏡下耳石及感覺細(xì)胞的纖毛未見明顯異常。噪聲暴露后即刻組掃描電鏡下可見內(nèi)、外毛細(xì)胞氣球樣變,外毛細(xì)胞靜纖毛融合及散在性缺失；噪聲暴露后36小時組可見內(nèi)、外毛細(xì)胞輕度氣球樣變及其靜纖毛散亂；噪聲暴露后84小時組耳蝸基底回可見內(nèi)、外毛細(xì)胞缺失,中回及頂回內(nèi)、外毛細(xì)胞靜纖毛缺失且以第三排外毛細(xì)胞靜纖毛缺失最重。噪聲暴露后毛細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)損傷以基底回及中回為主,頂回?fù)p傷較輕。巴馬香豬耳蝸各部位均可見Caspase-3陽性表達(dá),隨著暴露后時間延長,Caspase-3陽性表達(dá)逐漸減弱。免疫熒光方法可見噪聲暴露后即刻組、暴露后36小時組與正常對照組相比較,三排外毛細(xì)胞排列及層次明顯錯亂；同時免疫熒光染色可見噪聲暴露后84小時組三層外毛細(xì)胞消失,僅可見一層內(nèi)毛細(xì)胞。結(jié)論：經(jīng)50Hz,142dBSPL低頻強聲暴露后,巴馬香豬雙耳聽功能受損;內(nèi)耳結(jié)構(gòu)出現(xiàn)凋亡及機械性損傷。低頻強噪聲對巴馬香豬聽功能的損傷符合損傷隨著噪聲強度的增強而增強的特點。低頻強聲在損傷毛細(xì)胞的同時亦可誘導(dǎo)螺旋神經(jīng)節(jié)的凋亡。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R764.43

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本文編號：2307279