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NK細(xì)胞在EAU疾病不同時(shí)期的分布及表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2018-04-28 18:44

  本文選題:NK細(xì)胞 + 葡萄膜炎; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:背景實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)是葡萄膜炎常見(jiàn)的動(dòng)物模型。本研究探討NK細(xì)胞在EAU中的作用及其機(jī)制。目的探討不同發(fā)病階段NK細(xì)胞在EAU大鼠視網(wǎng)膜組織中的定位分布,以及NK細(xì)胞的趨化因子動(dòng)態(tài)表達(dá)情況。方法將61只Lewis大鼠隨機(jī)分成兩組:正常對(duì)照組和EAU實(shí)驗(yàn)?zāi)P徒M。正常對(duì)照組采用生理鹽水聯(lián)合完全福氏佐劑和400ng百日咳毒素先后將其免疫,模型組使用光感受器間維生素A類(lèi)結(jié)合蛋白(IRBP)聯(lián)合完全福氏佐劑和400ng百日咳毒素先后免疫大鼠,建立EAU動(dòng)物模型,從造模后第1天到第21天,用裂隙燈顯微鏡進(jìn)行眼前段的光學(xué)檢查,根據(jù)Caspi方法進(jìn)行眼部炎癥評(píng)分,并在病程的第3天、第6天、第9天、第12天、第16天、第21天取材。HE染色檢測(cè)Lewis大鼠視網(wǎng)膜炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和組織結(jié)構(gòu)破壞情況,免疫熒光雙標(biāo)方法檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜NK細(xì)胞的分布以及浸潤(rùn)情況,RT-PCR法檢測(cè)眼球NK細(xì)胞趨化因子m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果EAU模型組在接受抗原免疫后的第6天出現(xiàn)炎癥,視網(wǎng)膜組織開(kāi)始腫脹,第12天炎癥達(dá)到最高峰,炎癥細(xì)胞明顯浸潤(rùn),組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,眼前節(jié)及視網(wǎng)膜炎癥評(píng)分為4分,第21天炎癥細(xì)胞消失,視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)。在第6天可見(jiàn)NK細(xì)胞,第9天NK細(xì)胞顯著增加,第12天較第9天明顯減少,第16天NK細(xì)胞基本消失。CXCL10在第9天較其他時(shí)間點(diǎn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=16.997,P0.01),而CXCL12各時(shí)間點(diǎn)之間比較均無(wú)差異(F=2.851,P0.05)。結(jié)論NK細(xì)胞在EAU早期發(fā)揮重要作用,而CXCL10是EAU中NK細(xì)胞的重要的趨化因子。
[Abstract]:Background Experimental autoimmune uveitis (EAU) is a common animal model of uveitis. The purpose of this study was to investigate the role and mechanism of NK cells in EAU. Objective to investigate the localization and distribution of NK cells in the retina of EAU rats and the dynamic expression of NK cell chemokines. Methods 61 Lewis rats were randomly divided into two groups: normal control group and EAU experimental model group. The normal control group was immunized with normal saline combined with complete Freund's adjuvant and 400ng pertussis toxin, while the model group was immunized with complete Freund's adjuvant and 400ng pertussis toxin. From the first day to the 21st day after the establishment of EAU animal model, optical examination of the anterior segment was performed with slit lamp microscope, and the ocular inflammation was scored according to the Caspi method, and on the 3rd, 6th, 9th, 12th, 16th day of the course of the disease. On the 21st day, the infiltration of inflammatory cells and the destruction of tissue structure were detected by HE staining in the retina of Lewis rats. The distribution of NK cells and the infiltration of NK cells in rat retina were detected by immunofluorescence double labeling method. The expression of chemokine m RNA in eyeball NK cells was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results in the EAU model group, inflammation appeared on the 6th day after immunization, the retinal tissue began to swell, the inflammation reached the peak on the 12th day, the inflammatory cells infiltrated obviously, the tissue structure was seriously damaged, and the inflammation score of anterior segment and retina was 4 points. On day 21, inflammatory cells disappeared and retinal structure recovered. NK cells were observed on the 6th day, increased significantly on the 9th day, and decreased significantly on the 12th day compared with the 9th day. On the 16th day, NK cells disappeared basically. CXCL10 was significantly different from other time points on the 9th day compared with the other time points, but there was no significant difference between the different CXCL12 time points in F2.851P0.05. Conclusion NK cells play an important role in the early stage of EAU, and CXCL10 is an important chemokine of NK cells in EAU.
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R773.9

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本文編號(hào):1816429

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