本文選題：兒茶素　切入點：糖尿病視網(wǎng)膜病變　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的：糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic retinopathy,DR)是糖尿病(diabetesmellitus,DM)最常見和嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，它是在眼內(nèi)視網(wǎng)膜組織中發(fā)生的滲漏性、閉塞性和增殖性的微血管病變,是重要的致盲性眼病，在糖尿病患者不斷增加的今天，加強糖尿病眼病的防治工作已經(jīng)成為當(dāng)務(wù)之急。目前關(guān)于DR發(fā)病機制尚未完全明了，近年來甘油二酯(diacylglycerol,DAG)/蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)信號通路的激活,在DR發(fā)生及發(fā)展中的作用日益引起大家的重視。DM狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)葡萄糖含量增高，引起DAG合成增多,DAG作為PKC的激動劑,可導(dǎo)致PKC活性增強。激活的PKC的可引起視網(wǎng)膜組織細(xì)胞改變、視網(wǎng)膜基底膜增厚、視網(wǎng)膜組織中血管的滲透性增強以及新生血管形成。熱休克蛋白（heatshockprotein,HSP）是生物體內(nèi)進(jìn)化保守的蛋白家族,多種因素可誘導(dǎo)其產(chǎn)生,該家族蛋白是重要的分子伴侶,具有多種生物學(xué)作用。HSP27是小HSP家族成員之一,正常狀態(tài)下在細(xì)胞內(nèi)呈低水平表達(dá),當(dāng)遭遇應(yīng)激刺激時表達(dá)量增高,以發(fā)揮抗氧化損傷的作用。許多植物中存在PKC抑制劑，兒茶素作為天然植物提取物中藥理功能的主要成分，，因含酚性羥基而極易發(fā)生氧化、聚合、縮合等變化,具有較好的抗氧化、清除自由基的能力,且安全、無毒、用量少，并具有抗腫瘤、抗基因突變、抗菌消炎、抗動脈粥樣硬化、抗氧化、降壓、降糖等多種生物學(xué)功能。已有研究發(fā)現(xiàn)兒茶素對視神經(jīng)具有保護(hù)作用[1]，但對糖尿病視網(wǎng)膜病變的研究尚未見報道。 本實驗通過制作大鼠糖尿病模型，觀察視網(wǎng)膜組織中PKC、HSP27的改變并給予全身應(yīng)用兒茶素進(jìn)行干預(yù)，探討兒茶素對糖尿病視網(wǎng)膜病變的作用。 方法：選用健康雄性SD大鼠54只，體重175±15g,隨機分為3組，即正常對照組（正常組）18只(36眼),糖尿病對照組（對照組）18只(36眼)和兒茶素治療組（治療組）18只(36眼)。對照組和治療組大鼠制作糖尿病模型：兩組大鼠禁食過夜后，按65mg"kg體重一次性左腹腔內(nèi)注射鏈脲菌素（streptozotocin，STZ）,72h后通過尾靜脈取血測血糖,以血糖高于16.7mmol/L,作為糖尿病大鼠模型。三組大鼠均自由進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)鼠食和水，治療組大鼠給予兒茶素200mg/kg（以蒸餾水溶解）灌胃,1次/d;正常組、對照組給予等量蒸餾水灌胃，1次/d。每周監(jiān)測血糖、體重。分別于造模成功后第2w、第4w、第8w取正常組、對照組及治療組大鼠各6只,以水合氯醛麻醉,快速取雙側(cè)眼球，每只大鼠一眼在解剖顯微鏡下將大鼠眼球沿赤道部切開，去除角膜和晶狀體，冷生理鹽水沖洗玻璃體，用眼科顯微鑷剝離視網(wǎng)膜，制作視網(wǎng)膜勻漿以酶聯(lián)免疫吸附法測定大鼠視網(wǎng)膜組織中PKC的表達(dá)，另一眼迅速投入固定液固定24h，用于免疫組織化學(xué)染色觀察HSP27的變化。結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果: 1.各組大鼠各時間點血糖、體重比較： 糖尿病模型誘導(dǎo)成功后在實驗的各時間點，對照組、治療組大鼠血糖水平均較正常組高，有非常顯著性差異（p0.01),治療組與對照組大鼠血糖水平相比，第2w、第4w無統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05)，第8w較對照組大鼠血糖水平降低，有顯著性差異（p0.01)。 實驗過程中，糖尿病大鼠體重減輕，治療組、對照組與正常組相比各時間點均有顯著性差異（第2wp0.05，p0.01；第4w及第8wp0.01)；治療組與對照組相比，在第2w、第4w體重?zé)o顯著性差異（p0.05)，第8w治療組大鼠體重減輕程度較對照組變小，有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.01)。 2.各組大鼠視網(wǎng)膜組織中PKC活性比較： 糖尿病模型誘導(dǎo)成功后，第2w、第4w、第8w：對照組大鼠視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞膜PKC活性較正常組顯著增高（p0.01)，治療組大鼠視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞膜PKC活性在第2w、第4w與對照組相比無顯著性差異（p0.05)，但在第8w治療組視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞膜PKC活性明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.01)。 在實驗的各時間點，正常組、對照組與治療組大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞漿中PKC活性差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05)。 3.各組大鼠視網(wǎng)膜組織中HSP27免疫組織化學(xué)染色分析： 視網(wǎng)膜組織中HSP27的陽性表達(dá)主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和神經(jīng)纖維層中,表達(dá)陽性的細(xì)胞胞漿呈棕黃色,視網(wǎng)膜其余各層中未見明顯HSP27陽性表達(dá)。正常組大鼠僅見少量表達(dá)。對照組、治療組大鼠視網(wǎng)膜組織中HSP27陽性表達(dá)在實驗的第2w、第4w、第8w均較正常組明顯增加，有非常顯著性差異（p0.01)；治療組與對照組相比，在第2w、第4w明顯增加，有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05)，第8w無顯著性差異（p0.05)。 結(jié)論： 1.糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞膜PKC的活性增強；糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織中HSP27的表達(dá)增加。 2.全身應(yīng)用兒茶素，可抑制糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織中PKC的活性，在糖尿病早期對HSP27的表達(dá)有促進(jìn)作用。 3.全身應(yīng)用兒茶素可降低糖尿病大鼠血糖水平，改善糖尿病大鼠多飲、多食、多尿及體重減輕等癥狀。 4.兒茶素對糖尿病視網(wǎng)膜病變有一定的延緩其發(fā)展及治療作用。
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【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R774.1;R587.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1695353